Артон переписки вк: [Антон Шастун × Арсений Попов],.. | Переписки | Импровизация | Артон

Содержание

"Импровизация" переписки — фанфик по фэндому «Импровизация»

Набросок из нескольких строк, еще не ставший полноценным произведением
Например, «тут будет первая часть» или «я пока не написала, я с телефона».

Мнения о событиях или описания своей жизни, похожие на записи в личном дневнике
Не путать с «Мэри Сью» — они мало кому нравятся, но не нарушают правил.

Конкурс, мероприятие, флешмоб, объявление, обращение к читателям

Все это автору следовало бы оставить для других мест.

Подборка цитат, изречений, анекдотов, постов, логов, переводы песен
Текст состоит из скопированных кусков и не является фанфиком или статьей.
Если текст содержит исследование, основанное на цитатах, то он не нарушает правил.

Текст не на русском языке
Вставки на иностранном языке допустимы.

Список признаков или причин, плюсы и минусы, анкета персонажей
Перечисление чего-либо не является полноценным фанфиком, ориджиналом или статьей.

Часть работы со ссылкой на продолжение на другом сайте
Пример: Вот первая глава, остальное читайте по ссылке...

Если в работе задействованы персонажи, не достигшие возраста согласия, или она написана по мотивам недавних мировых трагедий, обратитесь в службу поддержки со ссылкой на текст и цитатой проблемного фрагмента.

Попробуй не ответить — фанфик по фэндому «Импровизация»

Набросок из нескольких строк, еще не ставший полноценным произведением
Например, «тут будет первая часть» или «я пока не написала, я с телефона».

Мнения о событиях или описания своей жизни, похожие на записи в личном дневнике
Не путать с «Мэри Сью» — они мало кому нравятся, но не нарушают правил.

Конкурс, мероприятие, флешмоб, объявление, обращение к читателям

Все это автору следовало бы оставить для других мест.

Подборка цитат, изречений, анекдотов, постов, логов, переводы песен
Текст состоит из скопированных кусков и не является фанфиком или статьей.
Если текст содержит исследование, основанное на цитатах, то он не нарушает правил.

Текст не на русском языке
Вставки на иностранном языке допустимы.

Список признаков или причин, плюсы и минусы, анкета персонажей
Перечисление чего-либо не является полноценным фанфиком, ориджиналом или статьей.

Часть работы со ссылкой на продолжение на другом сайте
Пример: Вот первая глава, остальное читайте по ссылке...

Если в работе задействованы персонажи, не достигшие возраста согласия, или она написана по мотивам недавних мировых трагедий, обратитесь в службу поддержки со ссылкой на текст и цитатой проблемного фрагмента.

Антон Шастун ВКонтакте, Воронеж, Россия, id576296900

|My sugar daddy|
Материалы в сообществе могут содержать откровенные сцены и сцены сексуального характера, предназначенные исключительно для лиц, достигших 18 лет. Если Вы подписались на наше сообщество, то Вы подтверждаете свое совершеннолетие. Администрация сообщества не несет ответственности за нарушение возрастных ограничений. Все материалы взяты из открытых и доступных источников, без нарушения авторских прав. Все люди, задействованные в фото/видео материалах опубликованных в группе, достигли 18 лет. Данное сообщество не нарушает законодательство РФ и не пропагандирует гомосексуализм, насилие, экстремизм, разжигание межнациональной и религиозной розни.

историческая родина артон
Первая созданная Артон-группа ✔ Профессионально вырываем фразы из контекста ✔ Тэги для поиска по сообществу: #inst_air 🔺 #gif_air 🔺#advice_air 🔺 #video_air 🔺 #photo_air 🔺#old_air 🔺 #music_air 🔺 #moments_air 🔺#sms_air 🔺 #info_air 🔺 #question_air 🔺#pack_air 🔺 #fun_air 🔺 #fan_air 🔺#astrology_air 🔺 #other_air 🔺 #news_air 🔺#oldmemes_air 🔺 #fanfiction_air 🔺 #help_air 🔺#AU_air 🔺 #flashback_air 🔺 #storytime_air 🔺 Помните, что, если вас что-то не устраивает, вы вольны нас покинуть - мы никого не держим силой. Сообщество не носит принудительный характер. Контент может содержать материалы 18+ Администрация не несет ответственность за действия и собственные работы подписчиков данного паблика!

ФРЕНДЗОНА
Из этой френдзоны тебе не выбраться — мы тебя любим, но как друга. Мэйби Бэйби - https://vk.com/frendbaby Мэйклав - https://vk.com/meyklav Кроки - https://vk.com/krokiboy ДИСКОГРАФИЯ: Френдзона - «Флирт На Вписке» (2018) Мэйби Бэйби - «Только Если В Щечку» (2018) Мэйклав - «Бабочки Умирают В Полете» (2019) Френдзона - «Не Разлей Вода» (2020) Мэйклав - «Цветомузыка» (2021) Френдзона - «Альбомба» (скоро) организация выступлений: [email protected]

искренний смех серёжи матвиенко
моя маленькая обитель Дирежи и огромного количества шуток ~

Телеканал ТНТ
Добро пожаловать в официальную группу самого лучшего телеканала в мире!

Taking-meds
Аня, 25 годиков, крысую крысунки, ко мне можно на «ты». 💃🔞 ❤ Поддержать меня на VK Donut: в паблике под шапкой находится раздел VK Donut, где можно подписаться и получить доступ ко всем закрытым артам и спидпейнтам~ ❤ Поддержать меня на Патреоне: https://www.patreon.com/takingmeds ❤ Поддержать меня на Бусти (русскоязычный Патреон): https://boosty.to/takingmeds ❤ КОМИКС: https://vk.com/wall-96039932_7562 ❤ Если мои работы вызвали у вас чувства, которые сложно передать словами, можно передать монеткой: Пэйпал: https://paypal.me/takingmeds Сбер: 4276380040424280 Яндекс: https://money.yandex.ru/to/410016505697096 Или в паблике, в разделе с донатами~ ❤ Спасибо всем даже за самую малюсенькую поддержку, это безумно много значит для меня, вот правда, СПАСИБО. ❤

Где логика?
Человечеству известно два вида логики: мужская и женская. В эфире ТНТ мы не сталкиваем их вместе, а заставляем работать на один общий результат. Звездные семейные пары, партнеры по съемочной площадке, просто хорошие друзья и знакомые будут вместе пытаться выстраивать логические связи между самыми, казалось бы, нелогичными событиями, предметами или фактами.

Импровизация
Самое непредсказуемое комедийное шоу ТНТ от Comedy Club Production. В нём нет сценария и всё, происходящее на сцене, придумывается участниками на ходу.

ДМИТРИЙ ПОЗОВ || ОФИЦИАЛЬНОЕ СООБЩЕСТВО
Добро пожаловать в первый и самый информативный ресурс о Дмитрии Позове. Дмитрий Позов - шоумен, ведущий на свадьбе, актер. В 2016 году стал одним из участником шоу Импровизация идущего на телеканале ТНТ. 📌 В нашем сообществ вы найдете новости, факты, цитаты, фото и многое другое! ❤ Вступайте в нашу группу, мы обещаем вам уютную и теплую атмосферу❤

Артон | Антон Шастун + Арсений Попов
больные шипперы. скандалы. интриги. поясняем за канон. присоединяйся

что гуглит зритель Импровизации?
первая группа по гугл-запросам о Импровизации

АРСЕНИЙ ПОПОВ | ARSENIY POPOV OFFICIAL FAN PAGE
Это первое официальное сообщество поклонников Арсения Попова - искрометного импровизатора, драматического актера, юмориста, ведущего, шоумена, фотомодели, мастера #хештега и очень обаятельного человека 💗💗💗

Подслушано на съемках шоу "Импровизация"

homo
твой гей-уголок

корейская кофейня

Переписки | Импровизация | Артон
В фанфиках страданий не хватает, вот еще и переписки. >ВНИМАНИЕ! * Убедительная просьба, не искать под постами с одними переписками/коллажами/аушками совершенно другие, будь то фанфики, или же сами переписки. Для этого есть специальная тема. Мы ее всегда проверяем на наличие таких вопросов. * Не стоит спрашивать под одними переписками, когда выйдут новые части других. Это некорректно и захламляет комментарии. > Напоминаем, для того, чтобы ваши посты были опубликованы, они должны быть: * Правильно оформлены (примеры оформления различных постов вы найдете в обсуждениях) * Содержать соответствующие тематике поста теги (теги обязательны (!!!), их список приведен в обсуждениях)

это импровизация, детка
upd: Мы не шипперим парней, у нас нет фотографий или новостей. Мы носим исключительно развлекательный характер. Русский, грек, хач и украинец под руководством человека, которого узнают по слову «дрищ», попадают в самые разнообразные ситуации и выходят из них при помощи юмора. Если тебе это хоть о чём-то говорит, то ты без проблем станешь частичкой нашей импро-семьи! это импровизация, детка — для вас с 2017

Шастуша|Павел Воля и Антон Шастун|Шастуля
«храм прекрасных шпал тнт» ©

Студия Союз на ТНТ
Группа нового музыкального шоу на тнт "Студия союз" Сообщество создано фанатами. -------------------------------------- Студия СОЮЗ» на ТНТ: спасите наши уши! «Студия СОЮЗ» — первое комедийно-музыкальное шоу Четверг больше не будет прежним!!! -------------------------------------- Теперь каждый четверг в 21.00 звезды ТНТ будут меряться музыкальностью, чтобы сделать тебе очень смешно! Для этого каждый четверг им придется погружаться в мир изощренной русской эстрады, и только юмор и самоирония помогут им выстоять в этой схватке. Отныне четверги не будут прежними… Хотя бы потому, что в этом абзаце слово «четверг» повторяется целых пять раз! -------------------------------------- Вячеслав Дусмухаметов, генеральный продюсер ТНТ, создатель шоу: «Телеканал ТНТ не изменяет своим традициям и вновь запускает проект, не имеющий аналогов на российском телевидении. Шоу «Студия СОЮЗ» объединяет в себе сразу несколько жанров: юмористический, музыкальный и импровизационный, а его главная цель — вместе посмеяться над абсурдностью русской попсы». Шесть постоянных участников «Студии СОЮЗ» всячески помогают приглашенным звездам в этой игре на пределе человеческих возможностей. ---------------------------------- «Я всю жизнь жил в тени выходных. Меня редко замечали, ни во что не ставили. Большинство рейтинговых шоу обходили меня стороной. Ко мне заявлялись, только чтобы поесть рыбы и помыться. Но теперь все изменится! С помощью ТНТ и «Студии СОЮЗ» я стану воистину великим! Ну или как минимум — смешным. Трепещи, неделя! Грядет ЧЕТВЕРГ!» (с) Ваш Четверг --------------------------------------- Все материалы принадлежат телекналу ТНТ(Comedy club production). #СтудияСоюз #ТНТ

Телеграм канал Improbook | Фанфики Артон

Название: Город, который нас не знает
Автор: -Genry_Novak-
Рейтинг: NC-17
Пэйринг и персонажи:
Арсений Попов/Антон Шастун, Антон Шастун/Арсений Попов, Сергей Матвиенко, Дмитрий Позов
Размер: 118 страниц, 29 частей
Описание: Антон переезжает в другой город. Ему здесь нравится всё: красивые мосты, фасады зданий, непредсказуемая погода, новые друзья и...учитель? Их «игра» началась с первой встречи глаз, а закончится, пожалуй, никогда.

-------------------------

Комментарий от автора канала:

Школьное АУ. Антон - десятиклассник, Арсений - его классный руководитель.
Повествование от лица Антона.
НЦ есть, актив - Арсений.
Ну что я могу сказать? Довольно типичная работа для такого жанра.
Мне не особо зашла, правда. Написание не понравилось и развитие событий. На счёт второго, отношений слишком стремительно развиваются (особенно в самом начале (на 10 день знакомства они уже чуть ли не встречаются)).
У Шастуна, как обычно, проблемы в семье: родители на грани развода, отец его избивает, мать вообще в другом городе живёт (несмотря на то, что у них с Антоном отличные, любящие взаимоотношения). Жойско все, в общем.
На счёт стекла. Смотрите, оно тут вроде есть, но я бы отнесла эту работу больше к флаффу, честно.
В шапке не упоминается, но как персонаж присутствуют Паша (друг Арса) и Ира (чуть не разрушила отношения парней).

Далее спойлеры.

Счастливый финал.
Мать Шастуна умирает, родители Попова не принимают Артонов, угрожают (очень счастливый, ыхыхы).
В течение всего фанфика, Попов успевает и пожениться, и развестись, и почти стать отцом.
Дима женится на Кате, Сережа путешествует.
Сами же Антон с Арсением уезжают куда-то из страны, где живут долго и счастливо. Конец 👐

Личная оценка.

Написание: 6/10 довольных Арсениев
Оригинальность: 2/10
Стекло: 3/10
Атмосфера: 9/10
Подача: 8/10

Наконец-то...«Артон» - Занятия? - Wattpad

                                    
                                          

-Шастун, задержись пожалуйста.
В этот момент Антон уже похоронил у себя в голове этого Арсения, сука, Сергеевича. Как бы ему не хотелось щас оставаться с ним наедине. Почему? Он сам не знает. Или ему страшно?
-Вы что-то хотели? - ученик старался говорить непринуждённо и по лицу учителя можно было понять, что у него получилось.
-Слушай, Антош..

Он меня щас, блять, снова Антошей назвал?!

-Можешь объяснить что происходит? - Арсений вопросительно посмотрел на ученика.
-А вы, собственно, о чём щас? - Ну конечно он понял о чём он, но быть умным - вовремя прикинуться тупым.
-Боже, Шастун, я знаю ты понимаешь о чём речь. Расскажи, у тебя проблемы какие-то? И почему сегодня в таком виде? Зашуганный ты сегодня какой-то.
-Спасибо за комплимент. И, нет, у меня никаких, вроде, проблем. А даже если бы были, то они касаются только меня. Извиняюсь, но я пойду.

Арсений хотел было возразить и сказать что-то сродне того, что я твой учитель, я имею хоть какое-то право знать и, к тому же, я волнуюсь. Но он не успел, потому что Антон пулей вылетел из кабинета.

Боже, ну что с этим мальчишкой? Почему я за ним так бегаю?

Но делать нечего, рабочий день продолжался.
Ведь если подумать логически, ведь в школе очень много учащихся и многие учатся у Арсения. И много кто ходит без настроения, сторонится всех, не разговаривает, как-то прячется и тому подобное.
И сейчас Антон что-то высвечивается на их фланге. Потому что Попов уверен, что у него что-то происходит в жизни.
И почему Антон? Учитель не мог понять.
. *** .

После всех уроков Антон сразу же вернулся домой. Сегодня четверг, значит можно будет сделать всю домашку завтра и пойти гулять сколько влезет.
Такие планы и были у Шастуна. Отец благо не звонил больше, да и он сам не собирался.
По приходу домой он быстро сходил в душ, и начал делать уроки.
Но в один момент его отвлекли уведомления из группового чата.

*Чат*

Виталя.
Ребят, кто нибудь уже видел профиль в вк нашего нового учителя по литре?

Лёшка-Алексей.
Дааа, я видел. Он оказывается много где был. Интересно, а у него жена есть?

Вот после этого сообщения Антон начал читать всю переписку.

Григорий(цветик)
Ну давайте думать логически. У него есть фотки с разными женщинами. Возможно они все, просто его знакомые. Также возможно, что у него и жена есть. Но мне кажется если бы она у него была, то с ней бы была не одна фотка, верно?

Arton Shipperson — Порою кажется, что я Сбежала из психушки. Ведь...

Тут будет тупой блог о нытье, ибо, камон, я в депрессии и не хочу ничего писать. Постараюсь без мата, чтобы глазёнки не кровоточили.

КАРОЧЕ. Последний стих (да, который про одиночество) - крик моей души. Мне надоело, что каждый раз, когда у меня начинается депрессивная движуха в мозгу, я сама себя вгоняю в одиночество. Так как я большой (очень большой) эгоист, то мне нужно внимание. Но, ахтунг… я не могу ничего сказать ни родным, ни друзьям, ни знакомым, потому что не хочу, чтобы они брали мои проблемы! Вот такая дилема однако.
Ещё мне кажется, что у меня одержимость шипперством и серийными маньками и убийцами. Объясню подробно, чтобы было что своим внукам потом читать:
Где-то годик назад (может меньше) читала статью про массовый расстрел в старшей школе “Колумбайн”. Тогда я была ошарашена: как могут два парня расстрелять своих однокашников, а потом совершить самовыпил из этой никчёмной жизни? Ну, как обычно у меня это бывает - почитали-забыли. Недавно завели с одним томбоем беседу у самоубийствах. И тут я вспомнила их - Эрика Харриса и Дилана Клиболда! Вовремя, так ведь? Но про этот инцидент я опять-таки забыла, но в подкорку мощно впечатался этот Колумбайн. Дальше - хлеще.
Обнаружила у себя биполярное расстройство (диагноз не окончательный, но указывает на него), так как во время очередного (какой уже раз за один-то месяц лета?)депресс-трипа я начала реветь, а потом гладить себя по плечам, приговаривая, чтобы я успокоилась. И знаете, подействовало. Но потом неожиданно началось вот что. Я вспомнила про Харриса и Клиболда и снова перечитала статью из Вики (обожаю статьи в Вики). Так вот, мне они показались… симпатичными; парни, которые совершили самоубийство в 1999. А если мне что-то нравится, то я пытаюсь нарыть как можно больше информации. Оказалось, что они совершили это из-за издевательств в школе. Тогда я вспомнила свой “ любимый и обожаемый” класс. Сейчас меня уже который день не отпускает мысль о массовом расстреле в собственной школе. А что? Отличный подарок на выпускной - пару пуль во лбу. Хочу убить почти всю свою параллель за то, что они не соответсвуют МОИМ стандартам. Почему Я должна ИМ что-то?
Надеюсь, сий пост не отобъёт у вас желание читать мои недостишки)
Искренне ваш, artonslashestetic

P. S. Вайны, конечно, что с Колумбайн, что с Диланом Руфом, что с семьёй Мэнсон, что с ТиДжи и прочими убийцаии и маньяками - это эстетично богично.

Робот Антон в Телеграмме: как получить русский язык

Робот Антон в Телеграмме — это, наверное, один из первых ботов, с которым вам следует познакомиться. Этот бот позволяет перевести Telegram на русский язык. Но это далеко не все, что он умеет! Интересно? Давайте разбираться!

Как найти и использовать робота Антона в Телеграмме

Для того, чтобы активировать общение с ботом нужно сделать следующее:

На выбор предлагаются следующие языки:

  • Русский
  • Украинский
  • Белорусский
  • Турецкий
  • Польский
  • Чешский
  • Французский

Для Windows локализация применяется через запуск файла в языковых настройках.

Подробнее об этом мы написал тут: основные варианты русификации Телеграмм

Для мобильных устройств достаточно сделать долгий тап по загруженному файлу и выбрать строчку Apply Localization File (приметь файл локализации).

На Telegram девайсах с Mac OS и Линукс процесс аналогичен мобильным устройствам.

После этого меню и пункты управления мессенджера станут отображаться на русском языке.

Стоит отметить, что абсолютно не важно стоит у вас Телеграм на Виндовс 7 или 10, боты будут работать одинаково!

Как видите, все максимально просто и обычно данный процесс не вызывает трудностей. Однако иногда бывает, что робот Антон не активен.

Что делать, если робот Антон «не хочет» с вами общаться.

Очень часто из-за огромного числа запросов бот может не отвечать. Для решения проблемы достаточно просто ввести свой запрос через 5-10 минут! Эта проблема и её решение характерны для абсолютного числа ботов в Телеграмм. Связано это в первую очередь с тем, что робот Антон не построен на обычной платформе Bot Api для приложения, однако является одним из самых популярных в мессенджере и просто не предназначен для нагрузок, которые периодически возникают в связи с активностью пользователей.

Случайный Патриот? - Общество Массачусетса

Чарльз Джеймс Фокс, Карл Артон Хикель, 1774 г.

Генри Дж. Фогтл,
Канцлер Техасского общества SAR
SAR Magazine
Зима 2017. 111, №3

Считается, что Уинстон Черчилль сказал, что «историю пишут победители», и история американской революции не исключение. С чисто американской точки зрения мы узнаем о событиях из Закона о гербовых марках, Бостонской резни и защиты британских солдат Джоном Адамсом, Вашингтона в Вэлли-Фордж и помощи Франции и Испании в обеспечении независимости.Когда-то во время нашего обучения, кажется, было указано, что американцы были группой выскочки, взявшей на себя величайшую власть в то время. Это заставляет задуматься, была ли поддержка американскому делу в метрополии?

«… Он стоил целого континента». В 1775 году Чарльз Джеймс Фокс произнес эти слова в зале палаты общин. Член парламента, виг и откровенный критик правительства лорда Норта, остается вопрос: был ли Фокс сторонником независимости Америки? Мог ли он, с точки зрения Сынов американской революции, считаться патриотом?

Потомок мелкой дворянской семьи, Фокс сегодня известен как своим образом жизни, так и своими политическими взглядами.Тем не менее, его действия во время и сразу после Американской революции и его отношения с ее лидерами, похоже, указывают на его приверженность делу независимости. Известно, что во время революции он переписывался с Бенджамином Франклином и Джоном Адамсом. Возникает вопрос: активно ли он поддерживал независимость Америки или это было просто политическое решение, которое он принял?

Фокс родился 24 января 1749 года и был вторым выжившим сыном Генри Фокса, первого барона Голландии. В соответствии с положением своей семьи, Фокс учился в Итоне и начал свое обучение в Херевит-колледже Оксфордского университета в 1764 году.Фокс покинул колледж в 1766 году, чтобы отправиться на континент со своими родителями, двумя братьями и невесткой. 1

Вернувшись с континента, Фокс занялся грузинской политикой. В 1768 году, когда ему было 19 лет, семейные узы Фокса позволили ему легко получить место в палате общин в качестве вига. Как и положено его связям, он быстро продвинулся в верхние слои палаты общин. Однако так же быстро, как он поднялся, он отдалился от партийного руководства. В январе 1770 года руководство Палатой общин перешло от чатамской фракции вигов, возглавляемой сначала Уильямом Питтом Старшим, а затем Августом Графтоном, к так называемому правительству тори 2 под руководством Севера.В это время Фокс начал занимать позиции, расходящиеся с руководством своей партии и парламента. Тем не менее он получил два министерских назначения. Первое назначение Фокса было в Адмиралтейском совете в 1770 году, и он занимал эту должность до тех пор, пока не поссорился с Норт. 3 В 1773 году Фокс был включен в Совет Казначейства. 4 Оба эти назначения были бы довольно необычными для младшего члена парламента, если бы не семейные узы Фокса.Очевидно, Фокс не воспринял эти назначения всерьез - то, что считалось бесцеремонным отношением к этим назначениям, было отмечено в суде.

К 1774 году Фокс попал под влияние Эдмунда Берка, лидера фракции вигов Рокингема. Это ознаменовало его отделение от основных вигов под руководством Питта-старшего. Младший брат Фокса, Генри, выбрал военную карьеру и был отправлен лейтенантом в Бостон с 38-м пехотным полком. Несмотря на это, Фокс открыто высказывался по поводу поведения северного правительства в американских делах.Критика Фокса Американской революции касалась как истоков войны, так и ее поведения. Цитата, в которой он полагает, что действия Норта стоили целого континента, была сделана в ответ на невыносимые акты. 5

По мере того, как британские попытки подавить американскую революцию прогрессировали, Норт представил 6 февраля 1777 года законопроект, разрешающий правительству «охранять или задерживать лиц, обвиняемых или подозреваемых в преступлении государственной измены, совершенном в Северной Америке, или в открытом море, или преступление пиратства.«Содержание этого законопроекта включало приостановление действия процедуры habeas corpus. Обращаясь к этому законопроекту во втором чтении, Фокс был категорически против него. Он опасался не того, что это еще больше подстегнет колонии, а того, что его применение может быть распространено на Британские острова. Законопроект, по мнению Фокса, имел два серьезных недостатка. Первым было право короны арестовать человека по простому подозрению в причастности к действиям, которые могли быть восприняты как пособничество и подстрекательство «американских повстанцев».Другой одиозный аспект законопроекта заключался в том, что он отменял право на хабеас корпус. Критикуя законопроект, Фокс заявил:

Предположим, например, что у меня был старый школьный товарищ или близкий друг: мне, скорее всего, следовало бы поспевать за ним. переписка; и, когда он писал ему, должен был сказать ему, «что виги и те, кто были друзьями революции, теперь рассматривались как враждебные личности; ибо это время, когда предпринимаются большие шаги, чтобы уничтожить свободы не только Америки, но также и этой страны.'Был бы такой абзац, как это дает хорошие основания для подозрений? 6

Законопроект был принят Палатой общин во втором чтении 196-43 гг. 7 В своем возражении, похоже, Фокс меньше думал о влиянии законопроекта на Америку и больше думал о том, что он представляет собой пагубную угрозу гражданским свободам в Англии.

Вверху: бюст Чарльза Джеймса Фокса на постаменте, Чертси, Великобритания; наверху вертикальный анатомический разрез пополам Чарльза Джеймса Фокса, одна половина которого одет как француз, а другая половина - англичанин.[Цветной офорт У. Дента, 1793]

Почти год спустя, в феврале 1778 года, антивоенная позиция Фокса была усилена его предложением «не высылать из королевства больше членов Старого корпуса 8 ». 9 Делая это предложение, которое было отклонено, Фокс рассказал историю британских ошибок, как со стороны правительства, так и на поле боя. Его точка зрения, которая, возможно, была упущена его товарищами по палате общин, заключалась в том, что до этого момента революция была серией политических просчетов правительства и военных ошибок. 10 Смог ли Фокс увидеть, что война становится безнадежным делом для короны? Другое поведение Фокса предполагает, что он мог так думать.

В апреле 1778 года Томас Поуис предложил расширить полномочия мирных комиссаров, которые в то время состояли из лорда Хау и его брата генерала Хоу; Фредерик Ховард, граф Карлайл; Уильям Иден; и Джордж Джонстон в их отношениях с американцами. Резолюция Поуиса заключалась в том, чтобы позволить уполномоченным иметь полномочия «объявить американцев абсолютно и навсегда [sic] независимыми». 11 Замечания Фокса способствовали признанию американской «независимости», как он это сформулировал.

Совершенно очевидно, что к признанию независимости имелся скрытый мотив. Фокс отметил, что отношения между Францией и Америкой были существенными, с торговым договором и признанием независимости Америки французами, и что существует возможность участия Испании в революции. Он также отметил, что цена войны возрастает и что «зависимость Америки от какой-либо части страны, кроме министра и его иждивенцев, является весьма незначительным вопросом.Помимо непосредственных экономических и военных последствий, Фокс видел, что признание независимости может способствовать развитию торговли между Великобританией и Америкой, и что Британия «вероятно, должна обеспечить большую долю торговли американцев». . . . » 12 Он также предположил, что независимость Америки [не] так скоро возрастет. . . к морскому превосходству. У американцев не могло быть стимула к охоте за территорией за границей, когда то, что они тихо владели, было бы больше, чем они могли бы занять и возделывать.Они обнаружат, что преимущества завоеваний не равны преимуществам земледелия; и, помня, что человек от природы имел склонность к обладанию земельной собственностью, они сочли бы невозможным в стране, где земля должна быть получена даром, распространять дух мануфактуры и торговли. Каждый американец, более или менее, стал бы земледельцем и плантатором, и страна могла бы в какой-то будущий и отдаленный период стать Аркадией, но никогда не могла быть Британией всего мира. 13

Как и в случае с другими начинаниями, которые поддерживал Фокс, этот законопроект также умер в Палате общин, в данном случае из-за того, что предложение было бесславно внесено на рассмотрение. Однако похоже, что Фокс двигался от настройки правительства к полной поддержке независимости Америки. По мере того как война продолжалась, Фокс продолжал противодействовать ведению войны Норт. Он поддержал реакцию оппозиции на выступления правительства и сделал некоторые из них сам. Он напал на членов правительства даже до такой степени, что предложил сместить графа Сэндвича с поста первого лорда Адмиралтейства в 1779 году. 14 Однако политическая судьба Фокса менялась по мере ослабления власти Норта.

В мае 1781 года Фокс ответил на законопроект Дэвида Хартли 15 о восстановлении мира с Америкой. Как и в случае с его предыдущими начинаниями, комментарии Фокса по поводу законопроекта, по-видимому, указывают на глубокое понимание дихотомии, существовавшей в конфликте между Великобританией и Соединенными Штатами. 16 Когда лорд Норт окончательно ушел с поста премьер-министра в 1782 году, Фокс стал министром иностранных дел в администрации Чарльза Уотсона-Вентворта, второго маркиза Рокингема.Это правительство просуществовало недолго, всего 14 недель, но примечательно тем, что Рокингем признал независимость Америки.

После смерти Рокингема 1 июля 1782 года Фокс покинул правительство, отказавшись работать в администрации Шелбурна. В конце концов он сформировал коалицию с лордом Нортом, который пришел к власти 2 апреля 1783 года. Фокс снова стал министром иностранных дел. Во время второго пребывания Фокса на посту министра иностранных дел был заключен Парижский договор и признана независимость Америки.

Сторонним наблюдателям казалось, что Фокс менее чем поддерживает абсолютное признание независимости. В письме Дэвиду Хартли в сентябре 1783 года, 17 Бенджамин Франклин убеждал его проконсультировать Фокса по поводу его «ошибочных представлений об американском народе». Франклин продолжил: Вы слишком долго обманывали себя, пытаясь извлечь выгоду из нашего маленького недовольства. Мы более просвещенный народ в отношении наших политических интересов, чем, возможно, любой другой под небесами.Каждый среди нас читает: и так легко в своих обстоятельствах, что находит досуг для разговоров о совершенствовании и для получения информации. Наши внутренние недоразумения, когда они у нас есть, незначительны, хотя ваши микроскопические газеты чудовищно раздувают их. 18

Такой упрек мог бы привести к саботажу ратификации договора, если бы он не был заключен, однако из того, что Франклин подчеркивал путь от Декларации независимости к Парижскому договору, могло бы показаться, что Соединенные Штаты являются «свободным суверенным и независимым государством». независимые государства » 19 был призван успокоить любые остаточные мысли об американской зависимости от Великобритании.Мнение Франклина о том, что Фокс или другие английские политики могут по-прежнему придерживаться идеи о том, что штаты могут попытаться воссоединиться с метрополией или могут быть захвачены заново, подчеркивает, что он подозревал, что Фокс вынашивал некую концепцию, которая могла бы, если не в конечном итоге, восстановить британский суверенитет над страной. Америка позволяет Великобритании осуществлять значительный контроль над американской экономикой.

Взгляды Фокса на американскую революцию должны фильтроваться через его политические пристрастия. Трудно установить был ли он в качестве оппонента Севера мотивом политической вражды или своими либеральными взглядами.Тем не менее, как член парламента, Фокс мог выражать мнения, которые могли быть восприняты как антиправительственные, если не откровенно предательские. Но меркантилистская политика 18 века явно окрашивала его мнение о независимой Америке. Принимая все это во внимание, Фокса лучше всего рассматривать как сторонника независимости Америки или, возможно, случайного патриота.

Примечания
  1. Речи Чарльза Джеймса Фокса («Речи»), стр. 1.
  2. Хотя она возродится как партия при Уильяме Питте Младшем, в это время традиционная партия тори прекратила свое существование, и этот термин применялся как «недружественный эпитет для политиков, тесно связанных с Георгом III."Википедия", "Тори".
  3. Выступления, стр. 1
  4. Там же.
  5. Это были Закон о Бостонском порте (закрытие порта Бостона до тех пор, пока Ост-Индская компания не выплатит компенсацию за утраченный чай), Закон о правительстве Массачусетса (предусматривающий все правительственные назначения короля или губернатора и ограничение городских собраний до одного раза в год), Закон об отправлении правосудия (дающий короне право переносить судебные процессы в другие колонии или Великобританию), Закон о расквартировании (предоставляющий широкие полномочия для размещения британских войск) и Закон Квебека (расширяющий границы Квебека на Северо-Западные территории) и предоставление бесплатного исповедания католицизма).
  6. Выступления, стр. 13
  7. Выступления, стр. 13
  8. «Старый корпус» - это линейные британские пешие полки, имевшие королевские значки до принятия двухцветного оружия. система, состоящая из королевского флага и полкового флага в 1751 году. Архив цветов. Нога Его Величества.
  9. Речи, стр. 13-21.
  10. Речи, стр. 13-21.
  11. Выступления, стр. 22
  12. Выступления, стр. 22.
  13. Речи, стр. 23-24.
  14. Речи, стр. 32–38.
  15. Член парламента от реформы, который станет представителем Соединенного Королевства на переговорах по договору.
  16. Речи, стр. 84-93.
  17. Письмо датировано 6 сентября 1783 года, через три дня после подписания Парижского мирного договора.
  18. Работы Бенджамина Франклина, Vol. 10, стр. 1.
  19. Парижский договор, статья 1 в Общих статутах.
Цитируемые работы
  • Речи Чарльза Джеймса Фокса, 3-е издание. Лондон: Aylott & Co., 1853. Печать.
  • Архив цветов. Нога Его Величества. 2012. Интернет. 15 апреля 2013 г. Питерс, Ричард (ред.). Общественный устав в целом, т. 8: Договоры.
  • Бостон: Little, Brown & Co., 1867. Печать.
  • Спаркс, Джаред (ред.). Работы Бенджамина Франклина, т. 10. Лондон: Бенджамин Франклин Стивенс, 1882. Печать.
  • Тори (британская политическая партия). Википедия. 5 апреля 2013 г. Web. 15 апреля 2013 г.

Странная эволюция программы "Золотая виза Венгрии"

Тамас Видеманн, G7

16 Май 2018 г.

Твитнуть Поделиться на Facebook ПОЖЕРТВОВАТЬ

Начиная с 2013 года, если инвестор из-за пределов Европейского Союза хотел жить в Венгрии, он должен был купить специальную государственную облигацию у одной из восьми компаний с исключительными правами на их продажу от имени правительства.

И это было недешево: облигации изначально стоили 250 000 евро; цена позже подскочила до 300 000 евро.

Эта программа в стиле Golden Visa была приостановлена ​​в 2017 году после того, как общественная критика разразилась непрозрачностью продавцов облигаций. Никто не знал, кому принадлежало большинство компаний - семь из восьми были анонимно зарегистрированы в оффшорных налоговых убежищах, поэтому невозможно было узнать, кто забирал прибыль.

И они были значительными - согласно расчетам G7, восемь компаний в течение четырех лет работы программы выручили не менее 600 миллионов долларов США.ху.

Расследование, проведенное репортерами портала деловых и экономических новостей g7, показывает, что выбор этих компаний мог нарушить венгерский закон.

Центральный банк Венгрии обычно отвечает за надзор и лицензирование финансовых учреждений, включая те, которые покупают и продают акции и облигации, и был бы логичным выбором для выбора и регулирования компаний, продающих облигации заявителям на получение статуса резидента. Но в данном случае контроль взял на себя экономический комитет венгерского парламента.

В течение семи лет работа этого комитета была омрачена систематическим несоблюдением процедур, принятием решений по неполной информации, секретным процессам и, в некоторых случаях, потенциальной незаконной деятельности.

В Венгрии парламентские органы и члены парламента не могут нести юридическую ответственность за такие решения. Например, депутатов нельзя посадить в тюрьму из-за набранных голосов, а также подать в суд на экономический комитет. Суды Венгрии могут вмешиваться только в том случае, если комитет отклоняет запрос о предоставлении информации, представляющей общественный интерес.

С помощью Transparency International Hungary (TIH) корреспондент g7.hu подал в суд. Акция была направлена ​​против Государственной компании по управлению долгом - единственного агентства, имеющего право выпускать государственные облигации и торговать ими, - и Экономического комитета парламента. Ссылаясь на «свободу информации», репортер запросил документы, показывающие, как создавались предприятия Golden Visa и сколько пакетов облигаций они продали. Дело было передано в Столичный суд Будапешта.

Репортер и TI-Hungary в конечном итоге получили учредительные документы компаний, их заявки на получение разрешения на торговлю государственными облигациями и информацию о назначении представителей компании.

Правил? Какие правила?

Сравнивая документы с протоколами заседаний экономического комитета, g7.hu обнаружил, что председатель комитета постоянно пренебрегает тем, чтобы показать комитету всю информацию, требуемую по закону.

В законе, регулирующем жилищные облигации, четко указано, что каждое заявление должно быть представлено комитету в полном составе, и его члены должны проголосовать за него.

Два председателя возглавляли комитет за четыре года действия программы Golden Visa.Антал Роган был первым, проработавшим с апреля 2010 года по октябрь 2015 года, когда он был назначен главой кабинета премьер-министра Виктора Орбана. Его сменил Эрик Банки. Оба мужчины предоставили членам комитета лишь ограниченную информацию, делясь некоторыми документами и утаивая другие.

Члены оппозиционной партии из 15 членов комитета заявили репортерам, что они мало понимают, что происходит. Ситуация, очевидно, стала возможной благодаря тому факту, что большинство в две трети голосов получили члены правящей партии Орбана «Фидес».Документы комитета, полученные журналистами, включают переписку между его председателем и компаниями, продающими облигации, ответы на их вопросы или запросы дополнительной информации по мере необходимости.

Эта секретность была постоянной темой.

Согласно программе облигаций компаниям были выделены территории по всему миру, каждая из которых получила монополию на продажу облигаций в определенном регионе. Однако в двух случаях выясняется, что компании, которым изначально был предоставлен регион, были оттеснены комитетом, чтобы другая компания могла взять на себя управление.

С самого начала казалось, что программа выпуска облигаций предназначена для инсайдеров. Возможность продажи облигаций никогда не рекламировалась, поэтому компании, подавшие заявку, должны были заранее знать об этой возможности. Эти компании подали заявки либо по электронной почте на веб-сайте Экономического комитета, либо по почте на официальный адрес венгерского парламента. Согласно закону, все заявки должны были быть внесены в повестку дня комитета, но записи показывают, что это не всегда происходило.

Прощай, Евро-Азия

Случай с зарегистрированной в Сингапуре фирмой под названием Euro-Asia Investment Management Ltd. является ярким примером.

Документы показывают, что Евразия впервые подала заявку на обработку венгерских государственных облигаций для граждан Сингапура и Таиланда 3 мая 2013 года, когда Роган все еще был председателем комитета.

Этот запрос был окончательно одобрен на заседании 10 июня того же года, но только для Сингапура. Документы указывают на то, что желание Euro-Asia продавать тайским гражданам никогда не рассматривалось комитетом в полном составе, хотя компания никогда не отозвала свой запрос.

Кредит: OCCRP Веб-сайт одной из фирм, которым Экономический комитет предоставил исключительные права на продажу венгерских государственных облигаций в некоторых странах; в данном случае Китай.

Позже «Евро-Азия» подала заявку на расширение своей зоны продаж, включив в нее Россию, Украину, Казахстан, Армению, Малайзию, Индонезию, Индию и Иран, но, согласно протоколам комитета, полная группа так и не была представлена ​​вместе с заявкой и никогда ее не рассматривала. .

Ситуация только ухудшилась для Евразии, которая в конечном итоге лишилась разрешения на продажу долговых обязательств 15 декабря 2015 года, что, по всей видимости, было произвольным решением, которое могло нарушить закон. Экономический комитет сослался на «недостаточную активность» в качестве причины, отметив, что держатели облигаций должны были продать не менее 100 облигаций в течение трех лет для сохранения своих лицензий. Евро-Азия еще три года не продавала облигации. К концу 2015 года компания успешно продала 42 облигации, примерно в то время, когда Комитет по экономике отозвал ее лицензию.

Вторая компания, Discus Holding Ltd., получила практически такое же обращение в тот же день и по той же причине, потеряв разрешение на продажу в Южной Африке, Индонезии, Казахстане, Кении, Нигерии, США, Сингапуре и Таиланде. Discus продала 36 облигаций.

Время интересное. За несколько дней до того, как две фирмы лишились разрешений, компания с ограниченной ответственностью Arton Capital Hungary, зарегистрированная в Венгрии, подала заявку на продажу облигаций в нескольких из тех же стран (а именно в Сингапуре, Индонезии, Нигерии, Таиланде, США.S. и Казахстан), которыми занимались Euro-Asia и Discus. Однако первоначальная заявка Артона не фигурировала в повестках дня Экономического комитета, полученных репортерами или опубликованных комитетом. 7 января компания Arton Capital подала повторную заявку и получила лицензии в феврале 2016 года.

Arton Capital Hungary - местное отделение глобальной компании, предоставляющей услуги гражданства через инвестиции. Из восьми посредников, зарегистрированных в Венгрии для продажи долговых обязательств, Артон был единственным, чьи владельцы были публично известны.В конечном итоге ей было предоставлено право продавать венгерские облигации на жительство по всему миру - единственная компания, получившая такое право.

Представители экономического комитета не ответили на неоднократные вопросы о том, почему территории, управляемые Euro-Asia и Discus, были переданы Arton Capital. Arton Capital также не ответила на запросы о комментариях.

Когда доказательства идут наперекосяк

Кредит: CC-by-SA-4.0: Solymari Политик Fidesz Антал Роган, первый председатель экономического комитета венгерского парламента.

Одно любопытное совпадение касается посредника, который продал больше всего облигаций: Венгерского государственного специального долгового фонда (HSSDF), который был учрежден на Каймановых островах, британской оффшорной налоговой гавани, 26 октября 2012 года.

Уже на следующий день председатель экономического комитета Роган предложил парламенту программу облигаций.

После того, как HSSDF получил лицензию на продажу облигаций, он продал лицензию одноименной Венгерской государственной специальной компании по управлению долгом (HSSDM), зарегистрированной в Гонконге.

Гонконгская компания принадлежит трем предприятиям, зарегистрированным на Британских Виргинских островах (БВО): Star Wealth Ltd., 25 процентов; Prime Ally Ltd. - 30 процентов; и Ace Deal Investments Ltd - 45 процентов.

Prime Ally Ltd. была основана на Британских Виргинских островах 26 октября, в тот же день, что и HSSDF - два других предприятия были созданы несколькими днями позже.

Были и другие очевидные нарушения.

Йозеф Херманн, директор и владелец зарегистрированной в Лихтенштейне компании Voldan Investments Ltd., подал заявку 12 декабря 2015 года, чтобы представлять программу жилищных облигаций в Южной Африке, Кении, Азербайджане, Австрии и Турции, но этот запрос так и не был представлен комитету. Бела Шонек, адвокат Волдана, также никогда не подавал документов, подтверждающих, что у него была юридическая доверенность на представление интересов Волдана. (В мае 2013 года Волдан подал заявку и сумел получить разрешение на продажу венгерских государственных облигаций в ряде восточноевропейских и постсоветских стран).

Другая зарегистрированная на Кипре компания, Innozone Holding Ltd., 16 апреля 2013 г. предполагалось приложить к заявке четыре документа: запись о своем корпоративном уставе на Кипре, записи в кипрском реестре со ссылкой на компанию и их официальные переводы на венгерский.

Однако нет записей об оригиналах документов, которые указывали бы на то, что комитет рассмотрел заявку компании без всех необходимых доказательств.

История была в документах

Миклош Лигети, юридический директор Transparency International, Венгрия, подал официальную жалобу на уголовное дело в полицию Пятого округа Будапешта.30, о злоупотреблении властью и незаконном сокрытии общественной информации.

Лигети сказал, что доказательства показывают, что комитет одобрил разрешения на продажу облигаций на жительство на основании неполных данных и документов.

И хотя сам комитет не может быть привлечен к суду, Легети утверждает, что в соответствии с Уголовным кодексом Венгрии члены комитета считаются государственными должностными лицами, и нерегулярные процедуры комитета могли представлять собой нарушение служебных обязанностей или злоупотребление служебным положением.

13 марта полиция сообщила Transparency International в Венгрии, что они направили жалобу в Главное управление прокурорских расследований, отдел прокуратуры Венгрии, обладающий исключительной юрисдикцией для расследования предполагаемых правонарушений лиц, обладающих иммунитетом, таких как члены парламента.

Примечание редактора : С тех пор, как была написана эта история, Direkt36 сообщила, что приостановленная венгерская программа Golden Visa, возможно, вернулась в новой, более дешевой версии, хотя правительство не сделало официального объявления.Вскоре после убедительной победы правящей партии «Фидес» на парламентских выборах 8 апреля в китайских социальных сетях появилось объявление, рекламирующее новую иммиграционную программу в Венгрии, размещенное компанией LSP International Ltd., базирующейся в Гонконге.

Новая схема, получившая название Home Purchase Immigration, предлагает вид на жительство в Венгрии в обмен на инвестирование не менее 25 миллионов венгерских форинтов (78 000 евро) в венгерскую недвижимость и уплату сборов в размере 50 000 евро.Компания, рекламирующая новую схему, принадлежит Лиану Вангу, китайскому бизнесмену, который также участвовал в весьма спорной программе жилищных облигаций Венгрии, действие которой было приостановлено в прошлом году из-за обвинений в коррупции и угрозах безопасности.

Китайская компания заявляет, что договорилась о сделке с иммиграционной службой Венгрии. Однако этот офис и Правительственный информационный центр заявляют, что такой сделки не было.

Этот материал был подготовлен в рамках Глобального антикоррупционного консорциума, партнерства OCCRP и Transparency International.

Твитнуть Поделиться на Facebook ПОЖЕРТВОВАТЬ

Исследование группы клинических испытаний СПИДа A5260s

AIDS. Авторская рукопись; доступно в PMC 2016, 10 сентября.

Опубликован в окончательной редакции как:

PMCID: PMC4571277

NIHMSID: NIHMS706062

, a , b , c , d , b , c , a , g , e , c , f и g

Джеймс Х.Stein

a Школа медицины и общественного здравоохранения Университета Висконсина, Мэдисон, Висконсин

Хизер Дж. Рибаудо

b Гарвардская школа общественного здравоохранения, Бостон, Массачусетс

Ховард Н. Ходис

c Медицинская школа Кека, Университет Южной Калифорнии, Лос-Анджелес, Калифорния

Тодд Т. Браун

d Медицинская школа Университета Джона Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

Туи Тьен Т.Тран

b Гарвардская школа общественного здравоохранения, Бостон, Массачусетс

Минчжу Ян

c Медицинская школа Кека, Университет Южной Калифорнии, Лос-Анджелес, Калифорния

Элизабет Лауэр Броделл

a University of Висконсинская школа медицины и общественного здравоохранения, Мэдисон, Висконсин

Теодор Келесидис

g Медицинская школа Дэвида Геффена, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, Лос-Анджелес, Калифорния, США.

Грейс А. МакКомси

e Медицинская школа Кейса, Кливленд, Огайо

Майкл П. Дьюб

c Медицинская школа Кека, Университет Южной Калифорнии, Лос-Анджелес, Калифорния

Роберт Л. Мерфи

f Медицинская школа Фейнберга, Северо-Западный университет, Чикаго, Иллинойс

Джудит С. Карриер

g Медицинская школа Дэвида Геффена, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, Лос-Анджелес, Калифорния, США.

a Школа медицины и общественного здравоохранения Университета Висконсина, Мэдисон, Висконсин

b Гарвардская школа общественного здравоохранения, Бостон, Массачусетс

c Школа медицины Кека, Университет Южной Калифорнии, Лос-Анджелес, Калифорния

d Школа медицины Университета Джонса Хопкинса, Балтимор, Мэриленд

e Медицинская школа Кейс, Кливленд, Огайо

f Медицинская школа Фейнберга, Северо-Западный университет, Чикаго, Иллинойс

g Школа медицины Дэвида Геффена, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе, Лос-Анджелес, Калифорния, США.

Переписка с Джеймсом Х. Стейном, доктором медицины, Школа медицины и общественного здравоохранения Университета Висконсина, 600 Highland Avenue, Room h5 / 520 CSC (MC 3248), Madison, WI 53792, США. Тел .: +1 608 265 4188; факс: +1 608 263 0405; [email protected] Окончательная отредактированная версия этой статьи издателем доступна по адресу AIDS

Эта статья была исправлена. См. Исправление в томе 30 на стр. 337.

См. Другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.

Реферат

Цель

В этой статье сравнивается влияние начала трех современных схем антиретровирусной терапии (АРТ) на прогрессирование толщины интима-медиа сонной артерии в течение 3 лет.

Дизайн

Рандомизированное клиническое исследование.

Установка

Мультицентр (26 учреждений).

Пациенты

ВИЧ-инфицированных, не получавших АРТ ( n = 328) без известных сердечно-сосудистых заболеваний или сахарного диабета.

Вмешательство

Случайное назначение тенофовира / эмтрицитабина вместе с атазанавиром / ритонавиром (ATV / r), дарунавиром / ритонавиром (DRV / r) или ралтегравиром (RAL).

Основные критерии оценки результатов

ТИМ правой сонной артерии оценивали с помощью УЗИ в B-режиме до начала АРТ, а затем через 48, 96 и 144 недели.Для сравнения ежегодных темпов изменения ТИМ сонных артерий использовались модели линейной регрессии со смешанными эффектами, которые позволяли не только оценить влияние АРТ на прогрессирование ТИМ сонных артерий, но также и то, как связаны с АРТ изменения традиционных факторов риска, билирубина и маркеров ВИЧ-инфекции. ассоциированное прогрессирование ТИМ сонных артерий.

Результаты

Показатели подавления РНК ВИЧ-1 были высокими во всех группах (> 85%) в течение 144 недель. Умеренное повышение уровней триглицеридов и холестерина липопротеинов не высокой плотности наблюдалось в группах, содержащих ингибитор протеазы, по сравнению со снижением при RAL.Напротив, ТИМ сонной артерии прогрессировал медленнее при ATV / r [8,2, 95% доверительный интервал (5,6, 10,8) мкм / год], чем DRV / r [12,9 (10,3, 15,5) мкм / год, P = 0,013]; изменения с RAL были промежуточными [10,7 (9,2, 12,2) мкм / год, P = 0,15 по сравнению с ATV / r; P = 0,31 по сравнению с DRV / r]. Уровни билирубина и холестерина липопротеинов невысокой плотности, по-видимому, влияют на скорость прогрессирования ТИМ сонных артерий.

Заключение

У ВИЧ-инфицированных, ранее не получавших АРТ, с низким риском сердечно-сосудистых заболеваний, ТИМ сонных артерий прогрессировала медленнее у участников, инициирующих ATV / r, чем у участников DRV / r, с промежуточными изменениями, связанными с RAL.Частично этот эффект может быть связан с гипербилирубинемией.

Ключевые слова: антиретровирусная терапия, атеросклероз, сердечно-сосудистые заболевания, сонные артерии, ВИЧ

Введение

Относительный вклад антиретровирусной терапии (АРТ), традиционных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), воспаление и активация иммунной системы на повреждение артерий прогрессирование атеросклероза у ВИЧ-инфицированных неизвестно [1]. Предыдущие обсервационные исследования, в том числе исследования толщины интима-медиа сонных артерий (IMT), показали, что пациенты с ВИЧ-инфекцией имеют повышенный риск сердечно-сосудистых заболеваний [1,2].Некоторые исследования показывают, что определенные АРТ, включая определенные ингибиторы протеазы и абакавир, могут вызывать повышенный риск ССЗ у пациентов с ВИЧ-инфекцией [3,4]. Однако различия в распространенности факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний среди людей с ВИЧ-инфекцией, которые могут частично быть связаны с АРТ, а также эффекты стойкого воспаления и активации иммунной системы также могут способствовать повышению риска сердечно-сосудистых заболеваний у людей с ВИЧ [5,6].

Новые схемы АРТ имеют меньше неблагоприятных метаболических эффектов, чем более старые схемы на основе ингибиторов протеазы.Например, усиление дарунавира (дарунавир / ритонавир, DRV / r) и усиленного атазанавира (атазанавир / ритонавир, ATV / r) связано с менее неблагоприятным липидным профилем, меньшей инсулинорезистентностью и меньшей липодистрофией, чем более старые схемы с ингибиторами протеазы [7– 9]. Точно так же ралтегравир (RAL), ингибитор интегразы, обладает относительно нейтральным метаболическим действием [10,11]. Эти три современных режима АРТ сравнивались напрямую по вирусологическим показателям, переносимости и метаболическим исходам в исследовании группы клинических исследований СПИДа A5257 (ClinicalTrials.gov: {"type": "клиническое испытание", "attrs": {"text": "NCT00851799", "term_id": "NCT00851799"}} NCT00851799 и {"type": "клиническое испытание", "attrs ": {" text ":" NCT00811954 "," term_id ":" NCT00811954 "}} NCT00811954), проспективное рандомизированное исследование [12]. Предыдущие сравнения артериальных эффектов АРТ ограничивались включением лиц, ранее получавших АРТ. Настоящее исследование - предопределенное предполагаемое дополнительное исследование A5257 - предоставило уникальную возможность изолировать эффекты трех современных схем АРТ от стойких эффектов предыдущей АРТ.

Основная цель этого исследования заключалась в том, чтобы сравнить влияние трех современных схем АРТ на прогрессирование ТИМ сонной артерии, подтвержденного маркера повреждения стенки сонной артерии и будущего риска сердечно-сосудистых заболеваний [13–15]. ТИМ сонных артерий является обычным суррогатным конечным результатом в клинических исследованиях по снижению ССЗ, например, с использованием гиполипидемической и антигипертензивной терапии [13–15]. Учитывая его антиоксидантные эффекты и повышенную частоту гипербилирубинемии среди лиц, принимающих атазанавир, мы также оценили ( post hoc ) влияние уровней билирубина во время лечения на прогрессирование ТИМ сонных артерий.

Материалы и методы

Дизайн исследования

Исследование A5260s, являющееся частью исследования группы клинических испытаний СПИДа A5257, представляет собой проспективную продольную оценку лиц, не получавших АРТ, ВИЧ-инфицированных лиц без известных сердечно-сосудистых заболеваний, сахарного диабета или использования липидов. -снижающие лекарства. Соответствующие критериям участники группы A5257 были рандомизированы в равной степени на одну из трех схем тенофовира / эмтрицитабина вместе с ATV / r, DRV / r или RAL; рандомизация была стратифицирована путем скрининга уровня РНК ВИЧ (> 100 000 или ≤ 100 000 копий / мл) и 10-летней оценки риска ишемической болезни сердца по Фрамингему (риск <6% или ≥6%).Посещения дополнительных исследований были запланированы на исходном уровне, через 4, 24, 48, 96 и 144 недели после начала лечения. Заключительные визиты для дополнительного исследования могут быть выполнены в любое время между 112 и 144 неделями после начала лечения. Исследование A5260s, а также его исходное исследование, A5257, было одобрено экспертными советами всех 26 участвующих сайтов, и все участники предоставили письменное информированное согласие (см. Приложение A, http://links.lww.com/QAD/A722) . Текущее использование статинов, рыбьего жира (> 2 г / день), производных фиброевой кислоты или ниацина (> 1000 мг / день) было исключено при включении в исследование.Подробные критерии включения и исключения для исследования были представлены ранее в нашем базовом поперечном анализе [16].

УЗИ сонной артерии

Изображения в B-режиме дистальной правой общей сонной артерии (ОСА) и бифуркации правой сонной артерии были получены с помощью линейного ультразвукового датчика высокого разрешения с одновременной электрографической записью до начала АРТ, а затем после 48 , 96 и 112–144 недели [16]. Правая ОСА была визуализирована в поперечном сечении, и датчик переместился латерально в яремную вену, так что они были совмещены с веной, отображаемой наверху артерии.Датчик поворачивали на 90 °, сохраняя яремную вену уложенной выше ОСА и бифуркацию, получая продольный вид обоих сосудов с акцентом на дальней стенке. Изображения были отправлены в электронном виде в Центр визуализации и чтения основного отдела исследования атеросклероза Университета Южной Калифорнии для контроля качества и интерпретации одним опытным техником. «Поражения» сонной артерии определялись как очаговые области IMT размером не менее 1,5 мм. CCA и бифуркация были измерены с помощью запатентованной программы автоматического обнаружения кромок.Парное ультразвуковое сканирование и фантомное сканирование были получены на исходном уровне, но внутри группы коэффициент вариантов был спарен на исходном уровне ОСА. Коэффициенты вариации для сканирования IMT общей сонной артерии и парных исходных сканирований IMT с бифуркацией сонной артерии составляли 1,09 и 1,27%, соответственно [16].

Оценка реактивности плечевой артерии

Расширение плечевой артерии, опосредованное кровотоком (FMD), измеряли с помощью ультразвука после индукции реактивной гиперемии окклюзией нижней части руки, до начала АРТ, а затем через 4, 24 и 48 недель, как описано ранее. [16].Эти сканированные изображения были измерены в основной лаборатории программы исследований атеросклероза Висконсинского университета.

Лабораторная оценка и оценка биомаркеров

Образцы крови были получены от участников, которым требовалось голодать не менее 8 часов, и отправлены в базовые лаборатории для анализа, как описано ранее [16]. Липопротеины, а также GlycA и GlycB были количественно определены с помощью спектроскопии ядерного магнитного резонанса в LipoScience (Роли, Северная Каролина, США). Воспалительные биомаркеры измеряли в лаборатории клинической биохимии Университета Вермонта в плазме, хранящейся при -70 ° C.Эти меры включали высокочувствительный С-реактивный белок (вчСРБ) по нефелометрии (Siemens BNII Nephelometer; Siemens Healthcare, Индианаполис, Индиана, США), интерлейкин-6 и D-димер. Плазменные маркеры моноцитарной и иммунной активации (растворимые CD14 и CD163) определяли с помощью ELISA (R&D Systems, Миннесота, США).

Мононуклеарные клетки периферической крови были изолированы и криоконсервированы в течение 30 часов после сбора крови. Все образцы хранили в жидком азоте при -70 ° C. Иммунофенотипирование проводили на криоконсервированных мононуклеарных клетках периферической крови с использованием многоцветной проточной цитометрии.В качестве конъюгированных с флуорохромом антител использовали анти-CD3 PE-Cy7 (клон SK7), анти-CD8 APC (клон RPA-T8), анти-HLADR FITC (клон L243), анти-CD38 PE (клон HB7), анти-CD14. APC (клон M5E2), анти-CD16 PE-Cy7 (клон 3G8) (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США, и Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США). Образцы собирали на проточном цитометре LSR-II. Контроли Fluorescence Minus One были приготовлены на контрольных образцах для каждого цикла. Моноциты считались отрицательными по DUMP (CD2, CD3, CD19, CD20 и CD56); HLADR-положительные клетки и провоспалительные моноциты были охарактеризованы и выражены в виде пропорциональных процентов (CD14 + , CD16 + ), как описано ранее.Активацию Т-клеток (CD4 + CD38 + DR + и CD8 + CD38 + DR + ) измеряли с помощью проточной цитометрии. Данные были скомпенсированы и проанализированы в программе FlowJo, версия 9.3.3 (Treestar, Ashland, Oregon, USA).

Соображения, касающиеся размера выборки и статистический анализ

Основная гипотеза заключалась в том, что прогрессирование ТИМ правой ОСА будет быстрее в течение 144 недель у участников, начинающих схему, содержащую ингибитор протеазы, усиленную ритонавиром, по сравнению с схемой, содержащей RAL.Целевой размер выборки в 110 участников / группу обеспечивал 80% -ную мощность для обнаружения разницы в скорости прогрессирования CCA IMT между режимами объединенного ингибитора протеазы и RAL 1,3 мкм / год. В случае значительного различия между ATV / r и DRV / r, исследование было разработано для изучения всех парных сравнений групп лечения.

При сравнении групп первичного лечения использовался подход «намерено лечить»; поддерживающие анализы были ограничены получателями лечения и успешно пролеченными популяциями ().Во всех анализах результатов IMT использовалась модель линейной регрессии со смешанными эффектами со случайным пересечением и наклоном, а также неструктурированная ковариационная матрица случайного эффекта с поправкой на факторы стратификации. Интересующим эффектом группы лечения была разница в скорости изменения (т. Е. Крутизны) IMT с течением времени (т. Е. Взаимодействие между группой лечения и временем). Учитывая рандомизацию, первичный анализ включал IMT неделю 0 в вектор исхода; вспомогательные анализы включали только результаты лечения и скорректированы с учетом исходных показателей ТИМ.Сходные сравнения групп лечения для изменения функции эндотелия на 24-й неделе по сравнению с исходным уровнем были проведены с использованием линейной регрессии с поправкой на исходный диаметр плечевой артерии на 0-й неделе.

(a) Изменение толщины интима-медиа общей сонной артерии в зависимости от недели исследования (намерение лечить). (b) Изменение толщины интима-медиа бифуркации сонной артерии в зависимости от недели исследования (намерение лечить). Точечные оценки и планки ошибок дают среднее значение и 95% доверительный интервал соответственно.ATV / r, атазанавир / ритонавир; DRV / r, дарунавир / ритонавир; RAL, ралтегравир.

Связи между прогрессированием CCA IMT и традиционными факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний, показателями, связанными с ВИЧ, и другими биомаркерами были изучены в анализах, ограниченных успешно пролеченной когортой, чтобы свести к минимуму искажение из-за отсутствия контроля над вирусемией ВИЧ-1 (). Влияние биомаркеров на исходный уровень и в начале лечения (24 или 48 неделя) как на уровень, так и на скорость прогрессирования ОСА IMT были включены в качестве непрерывных исходов; Также были исследованы проксимальные эффекты, обновленные по времени.Чтобы изучить потенциал путей, опосредованных лечением, также был проведен анализ с поправкой на группу лечения. Можно было бы ожидать ослабления предполагаемых различий в группах лечения, если бы различия в группах лечения были опосредованы изменениями заданных биомаркеров.

Чтобы изучить возможность того, что гипербилирубинемия, связанная с ATV / r, опосредует эффекты этого режима на прогрессирование CCA IMT, мы исследовали, как корректировка повышения билирубина влияет на предполагаемые различия в группах лечения.В частности, уровни билирубина на начальном этапе лечения были параметризованы как бинарные точки отсечения 0,6, 0,8 и 1,0 мг / дл и по непрерывной шкале [17].

Заключение для всех сравнений лечения оценивалось по ошибке типа I 2,5% с доверительным интервалом 97,5%; все остальные выводы были выполнены с частотой ошибок 1-го типа 5%. Анализы выполняли с использованием SAS версии 9.2 (Кэри, Северная Каролина, США).

Результаты

Характеристики участников

334 участника в A5260s были аналогичны тем, которые были зарегистрированы в A5257, за исключением меньшей доли женщин и чернокожих и немного большего количества клеток CD4 + (дополнительная таблица S1, http: // ссылки.lww.com/QAD/A722). Базовые характеристики участников для 328 участников анализируемой популяции: заметных диспропорций в группах лечения не наблюдалось. Риск Фрамингемской ишемической болезни сердца оценивался как минимум 6% / 10 лет у 12% участников; 13% имели метаболический синдром и 9% имели поражение сонной артерии на исходном уровне (6% ATV / r, 8% RAL, 12% DRV / r). Восемьдесят четыре процента завершили последующее наблюдение за исследованием, и двое участников умерли. Окончательное сканирование ОСА IMT проводилось более чем через 112 недель после начала лечения; 88% ( N = 288) имели исходный уровень и минимум 2 постентральных сканирования.

Таблица 1

Исходные характеристики по группам лечения.

Группа обработки
Характеристики 3 В целом ( N = 328) ATV / r ( N = 109) RAL () 106 DRV / r ( N = 113)
Пол
Мужчины 294 (90%) 91 (90%) 89%) 101 (89%)
Женщины 34 (10%) 10 (9%) 12 (11%) 12 (11%)
Возраст (лет) ) 36 (28, 45) 37 (31, 45) 36 (27, 44) 35 (27, 46)
Расовая / этническая принадлежность
Белый неиспаноязычный народ 144 (44%) 53 (49%) 43 ( 41%) 48 (42%)
Неиспанский черный 105 (32%) 34 (31%) 34 (32%) 37 (33%)
Латиноамериканцы 65 (20%) 20 (18%) 20 (19%) 25 (22%)
Азиат / другой / более одной расы 13 (4%) 2 (2%) 8 (8%) 3 (3%)
10-летний риск заболевания твердой коронарной артерии b (%)
Низкое (<6%) 289 (88%) 96 (88%) 96 (91%) 97 (86%)
Среднее / высокое (≥6%) 39 ( 12%) 13 (12%) 10 (9%) 16 (14%)
РНК ВИЧ-1 (log 10 копий / мл) 4.5 (4,0, 5,1) 4,6 (4,0, 5,1) 4,5 (4,1, 5,1) 4,5 (4,0, 4,9)
CD4 + количество клеток (клеток / мкл) 349 (203 , 455) 350 (211, 461) 343 (185, 445) 355 (207, 461)
SBP (мм рт. Ст.) 117 (108, 125) 117 (107, 124 ) 117 (107, 125) 117 (108, 125)
ДАД (мм рт. Ст.) 74 (68, 80) 74 (68, 80) 74 (68, 80) 76 (68, 80)
Общий холестерин натощак (мг / дл) 152 (133, 177) 153 (134, 178) 150 (135, 178) 150 (131, 172) )
Триглицериды натощак (мг / дл) 107 (78, 151) 114 (86, 160) 105 (76, 150) 98 (74, 133)
ЛПВП натощак холестерин (мг / дл) 37 (31, 45) 3 6 (32, 43) 39 (32, 45) 37 (30, 47)
Холестерин не-ЛПВП натощак (мг / дл) 112 (94, 136) 114 (96, 142) 111 (97, 136) 111 (89, 131)
Расчетный холестерин липопротеидов низкой плотности натощак (мг / дл) 89 (73, 109) 91 (69, 109) 89 (74, 110) 88 (71, 107)
ИМТ (кг / м 2 ) 25 (22, 28) 26 (23, 29) 24 (22 , 28) 24 (22, 27)
Окружность талии (см) 88 (81, 98) 92 (81, 100) 89 (82, 96) 86 (81, 95)
Метаболический синдром 44 (13%) 16 (15%) 14 (13%) 14 (12%)
Текущий курильщик 124 (38%) 44 (40%) 39 (37%) 41 (36%) 905 68
Общий билирубин (мг / дл) 0.50 (0,40, 0,60) 0,50 (0,40, 0,60) 0,45 (0,30, 0,60) 0,40 (0,40, 0,60)
Диаметр плечевой артерии (мм) 0,43 (0,39, 0,46) 0,43 (0,39, 0,46) 0,43 (0,39, 0,46) 0,43 (0,39, 0,46)
Расширение плечевой артерии, опосредованное кровотоком (%) 4,5 (3,0, 6,3) 4,4 (3,2, 6,3) ) 4,3 (2,6, 5,9) 4,5 (3,1, 6,6)
ТИМ общей сонной артерии (мкм) 0.65 (0,59, 0,70) 0,66 (0,59, 0,72) 0,64 (0,58, 0,69) 0,64 (0,59, 0,70)
Разветвление сонной артерии IMT (мкм) 0,74 (0,6568, 0,82) 0,74 (0,65, 0,81) 0,72 (0,64, 0,83) 0,74 (0,66, 0,83)
Признаки поражения сонной артерии 28 (9%) 7 (6%) 8 (8 %) 13 (12%)

Показатели подавления РНК ВИЧ-1 были высокими во всех группах на протяжении всего исследования (> 85% в течение 144 недель).О вирусологических, иммунологических и метаболических ответах на эти схемы и их побочных эффектах в исходном исследовании сообщалось в другом месте [12]. Как и в исходном исследовании, умеренное и устойчивое повышение уровней холестерина и триглицеридов липопротеидов не высокой плотности (ЛПВП) наблюдалось при инициировании ATV / r и DRV / r, которые поддерживались с течением времени, в отличие от наблюдаемого снижения этих параметров. с RAL [12]. Наблюдались тенденции к увеличению использования липидных препаратов во всех группах на протяжении всего исследования с аналогичным количеством статинов (от двух до пяти на группу) при последнем посещении.

Влияние лечения на прогрессирование толщины интима-медиа сонной артерии

Значительные различия между группами лечения были отмечены в годовой скорости изменения значений правой ОСА и бифуркационного ТИМ (,). Пациенты, начавшие ATV / r [8,2 (5,6, 10,8) мкм / год], прогрессировали медленнее, чем пациенты, начавшие DRV / r [12,9 (10,3, 15,5) мкм / год, P = 0,013]. У тех, кто инициировал RAL, наблюдалось промежуточное прогрессирование [10,7 (9,2, 12,2) мкм / год; P = 0,15 vs.Квадроцикл / г; P = 0,31 по сравнению с DRV / r]. Преимущество ATV / r было более выражено в когортах, получавших лечение и успешно леченных [6,6 (3,2, 10,0) мкм / год для ATV / r по сравнению с 12,8 (9,7, 15,9) мкм / год для DRV / r, P = 0,007 и 10,2 (8,3, 12,2) мкм / год с RAL, P = 0,044). Подобные результаты были замечены в бифуркации сонной артерии (,).

Таблица 2

Годовая скорость изменения толщины интима-медиа общей сонной артерии и бифуркации сонной артерии по группам лечения и сравнения групп лечения.

CCA IMT (мкм / год) a , c CCA IMT (мкм / год) a , d CCA IMT ( мкм / год) b , d ТИМС разветвления сонной артерии (мкм / год) a , c
Расчетная скорость прогрессирования по группам лечения (95 % доверительных интервалов) c
-п. -п. -п. -п.
ATV / r 8.2 (5,6, 10,8) <0,001 7,9 (5,2, 10,6) <0,001 6,6 (3,2, 10,0) <0,001 8,7 (5,6, 11,8) <0,001
DRV / r 12,9 (10,3, 15,5) <0,001 12,6 (9,8, 15,3) <0,001 12,8 (9,7, 15,9) <0,001 14.7 (11,6,17,8) <0,001
RAL 10,7 (9,2, 12,2) <0,001 10,4 (8,7, 12,1) <0,001 10,2 (8,3, 12,2) <0,001 11,5 (9,7, 13,3) <0,001
Расчетная разница (первая минус вторая группа) в скорости прогрессирования (доверительный интервал 97,5%) c
-п. -п. -п. -п.
ATV / r vs.DRV / r –4,7 (–8,9, –0,4) 0,013 –6,0 (–11,0, –1,0) 0,007 –4,7 (–9,0, –0,5) 0,013 –6,2 (–11,3, –1,1) 0,007
ATV / r по сравнению с RAL –2,8 (–7,0, 1,5) 0,15 –2,3 (–7,4, 2,7) 0,30 –2,7 (–7,0, 1,5) 0,15 –4,6 (–9,7, 0,5) 0.044
DRV / r по сравнению с RAL 1,9 (–2,4, 6,2) 0,31 3,7 (–1,4, 8,7) 0,11 2,0 (–2,3, 6,3) 0,30 1,6 (–3,3, 6,5) 0,46

Связь продольного прогрессирования ОСА IMT с исходными и начальными факторами риска, биомаркерами плазмы (вчСРБ, интерлейкин-6, D-димер, sCD14, sCD163, GlycA и GlycB) и меры клеточной иммунной активации (% CD4 + : CD38 + HLADR + Т-клетки,% CD8 + : CD38 + HLADR + Т-лимфоциты и% CD14 + CD16 + моноцитов) показаны на.За исключением слабых доказательств ассоциаций, предполагающих более быстрое прогрессирование ОСА IMT для более высоких уровней исходного HOMA-IR ( P = 0,06) и hsCRP ( P = 0,06), нет связи между прогрессированием CCA IMT и исходными факторами риска или биомаркерами. были очевидны ( P > 0,19). Обнаружена связь между более быстрым прогрессированием CCA IMT и более высокими уровнями холестерина не-ЛПВП во время лечения (24 неделя) ( P = 0,011). Эта ассоциация не изменилась после корректировки для группы лечения, и предполагаемые эффекты лечения не изменились, что позволяет предположить, что различия в группах лечения не были опосредованы путём холестерина, не связанного с ЛПВП.Никаких других ассоциаций между прогрессированием ОСА IMT и ранними на лечении или обновленными во времени (проксимальными) уровнями биомаркеров не обнаружено ( P > 0,12,).

Таблица 3

Продольные ассоциации толщины интима-медиа общей сонной артерии с исходным уровнем и биомаркером на 24 или 48 неделе в успешно пролеченной популяции.

0,46 –0,03, 0,02) : CD38 + HLADR + Т-клетки 0,12 (–0,28, 0,03)
Дополнительная годовая скорость IMT (мкм / год) на единицу изменения биомаркера (95% доверительный интервал)
Исходный биомаркер a
Неделя 2414 или 48 биомаркера 900 б
-п. -п.
Модель гомеостаза оценка инсулинорезистентности (log 10 ) 5.27 (–0,29, 10,83) 0,06 1,56 (–3,63, 6,74) 0,55
Холестерин липопротеидов не высокой плотности (на 30 мг / дл) 1,24 (–0,6268 ) 90 0,19 2,22 (0,52, 3,93) 0,011
D-димер (log 10 мкг / мл) 1,97 (–2,10, 6,04) 0,34 1,08 (–2,9568, 5,08) 0,60
Высокочувствительный С-реактивный белок (log 10 мк / мл) 3.93 (–0,18, 8,04) 0,06 –0,96 (–4,29, 2,37) 0,57
Интерлейкин-6 (log 10 пг / мл) 2,54 (–4,29, 9,37) –2,27 (–6,53, 1,98) 0,29
Растворимый CD14 (log 10 нг / мл) 3,03 (–14,75, 20,81) 0,74 4,37 (–14) 0,65
Растворимый CD163 (log 10 нг / мл) 4.93 (–3,36, 13,22) 0,24 0,36 (–10,92, 11,64) 0,95
GlycA (мкмоль / л) –0,00 (–0,03, 0,02) 0,94 0,94 0,67
GlycB (мкмоль / л) 0,03 (–0,04, 0,11) 0,37 0,03 (–0,03, 0,09) 0,41 +
–0,07 (–0,20, 0,06) 0.28 –0,15 (–0,34, 0,05) 0,15
% CD8 + : CD38 + HLADR + Т-клетки –0,05 (–0,18, 0,08) 0,45 0,12
% CD14 + CD16 + моноциты –0,05 (–0,25, 0,15) 0,63 0,02 (–0,14, 0,17)

Влияние лечения на поражение сонной артерии и реактивность плечевой артерии

Новые поражения сонной артерии были редкостью.Среди 28 пациентов с признаками поражения на исходном уровне 22 пациента (79%) находились под постоянным наблюдением с признаками поражения на каждой последующей неделе исследования. При последнем посещении поражения были очевидны в аналогичных пропорциях у 28 пациентов (10% в группе ATV / r, 15% в группе DRV / r и 7% в группах RAL). Скорость прогрессирования ТИМ сонной артерии не различалась через 48 ( P = 0,97) и 96 недель ( P = 0,97) в зависимости от наличия или отсутствия поражений сонных артерий.

Ящур значимо не изменился ни в одной группе лечения ( P > 0.35). Никаких существенных различий в частоте ящура между группами не отмечалось ни на одной неделе исследования ( P > 0,28). Более половины всех пациентов во всех группах лечения имели изменения ящура в пределах 2% на каждой неделе исследования, 61% на 4 неделе, 56% на 24 неделе и 59% на 48 неделе. Изменения ящура после 4, 24 и 48 недель. 48 недель не были связаны с 48- и 96-недельными изменениями в CCA IMT. Диаметр плечевой артерии оставался стабильным во всех группах лечения со средним изменением не более 0,01 мм.

Влияние повышения билирубина на прогрессирование толщины интима-медиа сонной артерии

Повышение билирубина часто встречается во время лечения атазанавиром.Мы предположили, что антиоксидантный эффект бессимптомного увеличения неконъюгированного билирубина в ATV / r может способствовать более медленному прогрессированию IMT сонной артерии [18]. Как и ожидалось, общий уровень билирубина быстро увеличивался и оставался повышенным у лиц, которым назначали ATV / r (дополнительный рисунок S2, http://links.lww.com/QAD/A722). В целом, более высокие уровни билирубина во время лечения были связаны с более медленным прогрессированием ТИМ ОСА (). Однако из всех выполненных анализов единственными эффектами, которые достигли статистической значимости, были уровни билирубина на 4 и 24 неделях с использованием точки отсечения для двоичной системы, равной 0.6 мг / дл ( P = 0,021 и 0,027 соответственно). Аналогичные тенденции наблюдались для более высоких точек отсечки 0,8 и 1,0 мг / дл; однако эти результаты не достигли статистической значимости ( P > 0,12). После корректировки уровней билирубина на 4 и 24 недели с использованием точки отсечения 0,6 мг / дл, различия групп лечения в скорости изменения CCA IMT между ATV / r и DRV / r, а также между ATV / r и RAL были уменьшены с потеря ранее описанной статистической значимости для сравнений групп DRV / r; это затухание не наблюдалось при более высоких порогах (и Дополнительная таблица S2, http: // ссылки.lww.com/QAD/A722).

Таблица 4

Связь продольной толщины интима-медиа общей сонной артерии с уровнями общего билирубина на 4-й и 24-й неделях в успешно пролеченной популяции.

Разница в годовой скорости изменения (мкм / год) с 95% доверительным интервалом
Уровень билирубина на 4 неделе a -п.
Непрерывный (мг / дл) –0.79 (–2,77, 1,19) 0,43
> по сравнению с ≤0,6 –4,49 (–8,30, –0,67) 0,021
> по сравнению с ≤0,8 –2,37 (–6,47, 1,72) 0,25
> против ≤1,0 –3,35 (–7,68, 0,98) 0,13
Уровень билирубина на 24 неделе a 0,13
-п.
Непрерывный (мг / дл) -1.13 (–2,95, 0,69) 0,22
> по сравнению с ≤0,6 –4,21 (–7,95, –0,47) 0,027
> по сравнению с ≤0,8 –2,61 (–6,67, 1,46) 0,21
> против ≤1,0 –3,38 (–7,65, 0,88) 0,12

Обсуждение

В этом проспективном рандомизированном клиническом исследовании 328 ВИЧ-инфицированных начали свое исследование При первом назначении АРТ мы обнаружили, что через 3 года ТИМ как ОСА, так и бифуркации сонной артерии прогрессировала медленнее у участников, инициирующих ATV / r, чем у тех, кто начинал DRV / r, с промежуточными изменениями, связанными с RAL, несмотря на более благоприятные липидные эффекты с RAL.Эти различия были более выражены у участников, которые продолжали успешно лечиться по своей рандомизированной схеме на протяжении всего исследования. Средние различия в прогрессировании ТИМ сонных артерий между ATV / r и DRV / r клинически значимы и составляют от половины до одной трети эффекта статиновой терапии у пациентов с высоким уровнем холестерина. Наши данные также предполагают, что гипербилирубинемия низкого уровня могла повлиять на прогрессирование ТИМ ОСА и опосредовать эффект ATV / r.

Неясно, влияют ли различия в схемах АРТ или их метаболические эффекты на риск сердечно-сосудистых заболеваний, в значительной степени потому, что в нескольких рандомизированных клинических испытаниях, оценивающих АРТ, было зарегистрировано значительное количество неблагоприятных сердечно-сосудистых событий из-за молодого возраста участников и короткой продолжительности наблюдения. -up [1].Таким образом, необходимо оценить влияние АРТ на суррогатные конечные точки, которые предсказывают неблагоприятные сердечно-сосудистые события. Это было первое проспективное рандомизированное клиническое исследование по оценке влияния современной АРТ на ТИМ сонных артерий, доказанного суррогата риска сердечно-сосудистых заболеваний в клинических испытаниях на лицах без ВИЧ-инфекции [13–15]. Пациенты наблюдались в течение 144 недель с высоким уровнем соответствия лекарственным препаратам и доступности данных, и хотя большее количество участников прекратили прием ATV / r из-за переносимости, чем DRV / r и RAL, результаты нашего анализа намерения лечить были укреплены. в условиях успешного лечения.

Мы выбрали прогрессирование КИМ сонных артерий в качестве первичной конечной точки для этого исследования, потому что это хорошо зарекомендовавший себя суррогатный показатель риска сердечно-сосудистых заболеваний и для оценки эффектов артериального и сердечно-сосудистого риска профилактических методов лечения, таких как гиполипидемические и гипотензивные препараты [13–15]. Хотя недавняя мета-регрессия показала, что прогрессирование ТИМ сонных артерий не является сильным маркером риска сердечно-сосудистых заболеваний в обсервационных исследованиях [19], в клинических испытаниях недавний метаанализ показал, что на каждые 10 мкм / год более медленная скорость ТИМ сонных артерий наблюдается вероятность инфаркта миокарда была на 18% ниже [14].Терапия статинами также была связана со снижением скорости прогрессирования ТИМ сонных артерий на 12 мкм / год и снижением частоты сердечно-сосудистых событий на 52% [13]. Эти результаты убедительно подтверждают использование изменения ТИМ сонных артерий в качестве суррогатной конечной точки изменений риска сердечно-сосудистых заболеваний в исследованиях лечебного вмешательства.

Наше открытие преимущества ATV / r над DRV / r было неожиданным. Фактически, A5260s был первоначально разработан с предположением об отсутствии разницы в прогрессировании IMT сонной артерии между ATV / r и DRV / r, и что эти группы будут объединены для сравнения с участниками, которым назначен RAL.При оценке исходных и во время лечения факторов риска и биомаркеров, связанных с прогрессированием ТИМ сонных артерий, статистически значимые ассоциации были обнаружены только с ранним (24 неделя) уровнем холестерина не-ЛПВП и общим билирубином в крови выше 0,6 мг / дл. Кроме того, поправка на различия во время лечения повлияла на расчетную разницу в группах лечения только по уровням билирубина. Хотя анализ билирубина был исследовательским, post hoc , и ограничивался почти неперекрывающимся распределением билирубина между ATV / r по сравнению с группами DRV / r и RAL, вероятно, что польза ATV / r была опосредована билирубином.Билирубин - антиоксидант, улучшающий функцию эндотелия и замедляющий прогрессирование атеросклероза [20,21]. В недавнем отчете Национального исследования здоровья и питания, уровни общего билирубина были связаны с общей смертностью в Соединенных Штатах, а значения выше 0,6, а также значения ниже 0,4 мг / дл в значительной степени связаны со смертностью в моделях, полностью скорректированных с учетом другие факторы, сердечно-сосудистые заболевания, сахарный диабет, рак, прием некоторых лекарств, функция почек и печени, а также курение, алкоголь и ИМТ [17].В связи с тем, что атеросклероз вызывает артериальный окислительный стресс, билирубин считается возможной мишенью для использования в качестве антиатеросклеротического агента. Дополнительным подтверждением этого наблюдения является наш анализ во время лечения, который смещает исследуемую популяцию в сторону лиц с длительным приемом ATV / r и, следовательно, воздействием билирубина; это предполагало еще большее преимущество ATV / r.

В этом исследовании начало АРТ не было связано с улучшением показателей ящура через 4, 24 и 48 недель. Предыдущее рандомизированное клиническое испытание лиц, не получавших АРТ, рандомизированных для получения трех более старых схем АРТ, экономящих класс, продемонстрировало значительную эндотелиальную дисфункцию, которая улучшилась через 4 и 24 недели во всех группах АРТ при успешном лечении [22].Между участниками A5152s и нашего исследования были заметные различия в том, что наши участники были более здоровыми. По сравнению с участниками группы A5152s, у наших участников до начала АРТ была более высокая частота ящура (4,5 против 3,7%). Действительно, ящур в нашем исследовании был аналогичен тому, который наблюдался после 4 недель АРТ у A5152s. У наших участников также были более высокие средние показатели холестерина ЛПВП (39 против 31 мг / дл) и количества клеток CD4 + (349 против 245 клеток / мкл) и более низкие уровни РНК ВИЧ (4.5 против 4,8 log 10 копий / мл). Следует отметить, что более недавнее перекрестное исследование также продемонстрировало, что ни использование ATV / r, ни общий уровень билирубина не были связаны с улучшением ящура у лиц, получавших АРТ, и лиц с супрессией [23].

Ограничения

Поскольку не было контрольной группы, имеющей опыт АРТ, обобщение наших результатов на пациентов, имеющих опыт АРТ, сомнительно. Поскольку не было ВИЧ-инфицированных, но нелеченных пациентов, нельзя исключить возврат к среднему значению для результатов ящура.В среднем участники исследования были молодыми, с низким риском сердечно-сосудистых заболеваний, и только 10% составляли женщины, поэтому возможность обобщения на пожилых пациентов, особенно женщин, может быть ограничена. Тем не менее, это самый крупный отчет с самым длительным периодом наблюдения, описывающий на сегодняшний день влияние современного риска АРТон на сердечно-сосудистые заболевания среди ВИЧ-инфицированных, ранее не получавших лечения. Это исследование относительно невелико и недостаточно полно для выявления умеренных ассоциаций факторов риска с прогрессированием ТИМ сонных артерий, а также эффектов повышенного уровня билирубина у лиц, получающих ATV / r.Большое количество участков могло также внести вариабельность в измерения ТИМ сонных артерий и ящура и, возможно, скрыть некоторые взаимосвязи; однако маркеры изменчивости были отличными. Поскольку несколько человек в группах RAL и DRV / r имели экстремальное повышение билирубина и поскольку группа лечения и экстремальные повышения билирубина были коллинеарными, эти ассоциации требуют осторожной интерпретации. Эти предостережения, а также отсутствие большого распределения уровней билирубина в группе ATV / r не позволили нам окончательно установить, способствовало ли повышение билирубина влиянию атазанавира на прогрессирование ТИМ сонных артерий.

Заключение

Среди лиц, ранее не получавших лечения, ТИМ сонных артерий прогрессирует при приеме ATV / r медленнее, чем DRV / r, с промежуточными изменениями у лиц, получавших RAL, несмотря на его более благоприятный липидный эффект. Гипербилирубинемия низкого уровня, по-видимому, влияет на прогрессирование ТИМ сонных артерий и может опосредовать некоторое влияние ATV / r на прогрессирование ТИМ.

Дополнительные материалы

Дополнительные таблицы и рисунки

Благодарности

Из-за обширного списка участников, сотрудников и финансирующих агентств они перечислены в Приложении A, http: // ссылки.lww.com/QAD/A722.

Ссылки

1. Stein JH, Currier JS, Hsue PY. Артериальные заболевания у пациентов с инфекцией вируса иммунодефицита человека: чему нас научила визуализация? JACC Cardiovasc Imaging. 2014; 7: 515–525. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Халтен Э, Митчелл Дж, Скалли Дж, Гиббс Б., Виллинес Т.С. ВИЧ-позитивность, воздействие ингибиторов протеазы и субклинический атеросклероз: систематический обзор и метаанализ обсервационных исследований. Сердце. 2009; 95: 1826–1835. [PubMed] [Google Scholar] 3.Червь SW, Сабин С., Вебер Р., Рейсс П., Эль-Садр В., Дабис Ф. и др. Риск инфаркта миокарда у пациентов с ВИЧ-инфекцией, подвергшихся воздействию определенных индивидуальных антиретровирусных препаратов из трех основных классов препаратов: исследование сбора данных о побочных эффектах препаратов против ВИЧ (D: A: D). J Infect Dis. 2010. 201: 318–330. [PubMed] [Google Scholar] 4. Ланг С., Мэри-Краузе М., Котт Л., Гилкин Дж., Партизани М., Саймон А. и др. Влияние отдельных антиретровирусных препаратов на риск инфаркта миокарда у пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека: исследование случай-контроль, включенное в базу данных французских больниц по когорте CO4 ВИЧ ANRS.Arch Intern Med. 2010; 170: 1228–1238. [PubMed] [Google Scholar] 5. Штейн JH, Hsue PY. Воспаление, активация иммунной системы и риск сердечно-сосудистых заболеваний у людей с ВИЧ-инфекцией. J Am Med Assoc. 2012; 308: 405–406. [PubMed] [Google Scholar] 6. Триант В.А., Мейгс Дж.Б., Гринспун СК. Связь С-реактивного белка и ВИЧ-инфекции с острым инфарктом миокарда. J Acquir Immune Defic Syndr. 2009. 51: 268–273. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Aberg JA, Tebas P, Overton ET, Gupta SK, Sax PE, Landay A, et al.Метаболические эффекты дарунавира / ритонавира по сравнению с атазанавиром / ритонавиром у не получавших лечения субъектов, инфицированных ВИЧ типа 1, в течение 48 недель. AIDS Res Hum Retroviruses. 2012; 28: 1184–1195. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Ортис Р., ДеДжесус Э., Ханлоу Х., Воронин Э., ван Лунзен Дж., Андраде-Вильянуэва Дж. И др. Эффективность и безопасность дарунавира / ритонавира один раз в день по сравнению с лопинавиром / ритонавиром у не получавших лечения ВИЧ-1-инфицированных пациентов на 48 неделе. СПИД. 2008. 22: 1389–1397. [PubMed] [Google Scholar] 9.Hill A, Sawyer W., Gazzard B. Влияние использования первой линии нуклео-побочных аналогов, эфавиренца и ингибиторов протеазы, усиленных ритонавиром, на уровни липидов. Клинические испытания ВИЧ. 2009; 10: 1–12. [PubMed] [Google Scholar] 10. Леннокс Дж. Л., Де Джесус Э., Бергер Д. С., Лаззарин А., Поллард Р. Б., Рамальо Мадруга СП и др. Схемы лечения ралтегравиром и эфавиренцем у ВИЧ-1-инфицированных пациентов, ранее не получавших лечения: 96-недельный анализ эффективности, стойкости, подгруппы, безопасности и метаболических анализов. J Acquir Immune Defic Syndr. 2010; 55: 39–48. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11.Rockstroh JK, Lennox JL, DeJesus E, Saag MS, Lazzarin A, Wan H и др. Длительное лечение ралтегравиром или эфавиренцем в сочетании с тенофовиром / эмтрицитабином у не получавших лечения пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека-1: результаты исследования STARTMRK за 156 недель. Clin Infect Dis. 2011; 53: 807–816. [PubMed] [Google Scholar] 12. Леннокс Дж. Л., Ландовиц Р. Дж., Рибаудо Х. Дж., Офотокун И., На Л. Х., Годфри С. и др. Эффективность и переносимость трех схем антиретровирусной терапии без использования нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы для добровольцев, не получавших лечения, инфицированных ВИЧ-1: рандомизированное контролируемое исследование эквивалентности.Ann Intern Med. 2014; 161: 461–471. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Эспеланд М.А., О'Лири Д.Х., Терри Дж. Г., Морган Т., Эванс Г., Мудра Х. Толщина интимы-среды сонной артерии как суррогат для событий сердечно-сосудистых заболеваний в испытаниях ингибиторов ГМГ-КоА редуктазы. Curr Control Trials Cardiovasc Med. 2005; 6: 3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Goldberger ZD, Valle JA, Dandekar VK, Chan PS, Ko DT, Nallamothu BK. Связаны ли изменения толщины интима-медиа сонных артерий с риском нефатального инфаркта миокарда? Критический обзор и мета-регрессионный анализ.Am Heart J. 2010; 160: 701–714. [PubMed] [Google Scholar] 15. Ходис Х., Мак У., Лабри Л., Зельцер Р., Лю С., Лю С. и др. Роль интима-медиальной толщины сонной артерии в прогнозировании клинических коронарных событий. Ann Intern Med. 1998. 128: 262–269. [PubMed] [Google Scholar] 16. Stein JH, Brown TT, Ribaudo HJ, Chen Y, Yan M, Lauer-Brodell E, et al. Ультрасонографические измерения риска сердечно-сосудистых заболеваний у лиц с ВИЧ-инфекцией, не получавших антиретровирусную терапию. СПИД. 2013; 27: 929–937. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17.Онг К.Л., Эллисон М.А., Чунг Б.М., Ву Б.Дж., Бартер П.Дж., Рай К.А. Взаимосвязь между уровнем общего билирубина и общей смертностью у пожилых людей: Национальное обследование здоровья и питания США (NHANES) 1999–2004 гг. PLoS One. 2014; 9: e94479. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Калли К.Л., Кианг Т.К., Гилкрист С.Е., Энсом М.Х. Влияние аллеля UGT1A1M28 на неконъюгированную гипербилирубинемию у ВИЧ-положительных пациентов, получающих атазанавир: систематический обзор. Энн Фармакотер. 2013; 47: 561–572.[PubMed] [Google Scholar] 19. Lorenz MW, Polak JF, Kavousi M, Mathiesen EB, Volzke H, Tuomainen TP, et al. Прогрессирование толщины интима-медиа сонных артерий для прогнозирования сердечно-сосудистых событий в общей популяции (совместный проект PROG-IMT): метаанализ данных отдельных участников. Ланцет. 2012; 379: 2053–2062. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20. Антониадес С., Каннингтон С., Антонопулос А., Невилл М., Маргаритис М., Демосфенус М. и др. Индукция сосудистой GTP-циклогидролазы I и эндогенного синтеза тетрагидробиоптерина защищает от вызванной воспалением эндотелиальной дисфункции при атеросклерозе человека.Тираж. 2011; 124: 1860–1870. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Dekker D, Dorresteijn MJ, Pijnenburg M, Heemskerk S, Rasing-Hoogveld A, Burger DM, et al. Повышающий билирубин препарат атазанавир улучшает функцию эндотелия у пациентов с сахарным диабетом 2 типа. Артериосклер Thromb Vasc Biol. 2011; 31: 458–463. [PubMed] [Google Scholar] 22. Torriani FJ, Komarow L, Parker RA, Cotter BR, Currier JS, Dube MP, et al. Эндотелиальная функция у инфицированных вирусом иммунодефицита человека субъектов, ранее не получавших антиретровирусную терапию, до и после начала мощной антиретровирусной терапии: исследование 5152s ACTG (Группа клинических испытаний СПИДа).J Am Coll Cardiol. 2008. 52: 569–576. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Hileman C, Longenecker C, Carman T, Milne G, Labbato DE, Storer N и др. Связь между общим билирубином и функцией эндотелия, воспалением и окислительным стрессом у ВИЧ-инфицированных взрослых, получающих стабильную антиретровирусную терапию. HIV Med. 2012; 13: 609–616. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Daily News из Нью-Йорка, Нью-Йорк, 29 апреля 1999 г. · 358

Help Wanted 2ot - Health Care 500 - Служба занятости.Служба занятости - 800 -. Learn To Earn -4 & amp; -fc CO u I fe lt J- V) 5 Q OFFICE CLERK Двуязычный испанский английский, легкий набор текста, заполнение. Буду тренироваться. На постоянной основе. Подайте заявку лично: 654 East 133 St., Bronx, NY. ПРИНИМАЮЩИЕ ЗАКАЗЫ: кассиры, повара, склад, официантки, доставка для быстро меняющейся компании dell. 8 долларов в час, накануне недели. Нет exp nec. Звоните 212-593-907 САНТЕХНИКУ. 5 лет опыта. Чистые водительские права. (718) 522-9093 или отправьте резюме по факсу: (718) 624-2879. ПОМОЩНИК САНТЕХНИКА (минимум 2 года опыта. Амбициозный, надежный 8, только трудолюбивый.Немедленные открытия. Позвоните Мари с 9 до 17. (718) 858-7982 Сантехника: Счетчики для Нью-Йорка и Нью-Йорка; Места Вестчестера, предпочтение отдается определенному опыту, хорошая оплата, льготы. Позвоните по телефону (914) 968-9200 Elec Pre-Press: ведущий оператор Mac во 2-ю смену. Полное знание всех приложений Quark, Photoshop, Illustrator, Imposition и т. Д. Опыт с Rampage - плюс. Fox резюме на 212-378-8351, арт: Pre-Press Manoger. PRimraippER Для небольшого магазина, полный опыт в 2C & amp; 4С работа. Звоните (212) 929-7272 ПРОИЗВОДИТЕЛЬ Требуется в супермаркет изысканной кухни.F7 эксп. Спрашивайте по адресу: Ragtime Dairy 157-48 Crossbay Blvd Howard Beach, пн-пт. 7.00-12.00. Никаких звонков! ПРОФЕССИОНАЛЬНЫЙ ИНЖЕНЕР Безумное знание внешних раскопок писателя матнса 8. Канализация. Отправьте резюме по факсу на:; ifl-A54 .t87VorcoH; (718) 522-9092 Real Fstate. НЕТ опыта, который не нужно ЗАРАБАТЫВАТЬ, ПОКА ВЫ УЧИТЕСЬ. БЕСПЛАТНОЕ ОБУЧЕНИЕ & amp; Бонус, .. Узнайте наши секреты о том, как ЗАРАБАТЫВАТЬ от 50 000 до 1 20000 долларов в ГОД., Бронкс офс, Ко'л Джеймс ЭРА Бесматч 7183295300 РЕЦЕПЦИОНЕР ПО НЕДВИЖИМОСТИ в Айорк; n модель нового дома в Новой Зеландии, Брюнкс, Пн, U5.i; .vk Fnx 'psump! H 231 -! 781 Предложение в сфере недвижимости: BNX co стремится к расширению своих возможностей в сфере торговли и недвижимости. выполнить runt - "QllvcTifiriv 2 vn" p f-'q-res JfTomt -soc i '1ft 38-1'? '6 K E b f A UP ANT ОФИЦИАНТЫ Только опытные! . Необходимо иметь грин-карту и 2 удостоверения личности. Только личное присутствие, Arton, чт 9–11 1:00 8, 15–15. РЕСТОРАН ЮНИОРОВ 386 FlOtbusfl Ave. Ext at DeKaib Ave, Brooklyn SALES Busv Bronx loc. Expamust, оклад H комм. Coll Mr. Gray 71833-0100 SALES NY фирма ищет Kitchen 8.Баня Продавец в возрасте 5-10 лет, эксп. Двуязычный а. Пожалуйста, отправьте резюме по факсу на номер 212-246-0857 SecuritvGuardryPorters Швейцары, операторы лифтов. MF, без эксп. Более 18 лет. Телефон & amp; ID, не включенные в другие категории. Будем тренироваться, бнффты! Позвоните по телефону 212-754-4572 ShionintjWarehouse Manager Возьмите на себя ответственность exo-менеджера. Должен знать складские операции, транспортные документы, грузоперевозки и т. Д. Refs nec. Преимущества, Бронкс. Резюме по факсу 516-869-0236 СТАЖИНЫ БРОКЕРОВ Центр города. Будет спонсором экзамена ирнмед. Испытайте плюс. Топ-доллар оплачивает звонок Ирен (212) 809-8655.Портной - Требуется опытный портной Для очень занятых уборщиков. Дневной звонок, 914-7237638; ночь, 914-693-8418. ВОДИТЕЛЬ БУКСИКИ: Требуется опыт на шоссе Heavy Dity Highway. Лицензия класса A & amp; ID-карта обязательна. Звоните (718) 237-165 СПЕЦИАЛИСТ ПО ПЕРЕДАЧЕ Должен иметь опыт работы с "АВТОМАТИЧЕСКИМИ ПЕРЕДАЧАМИ". Собственные инструменты. Звоните: (212) 567-3341. РАЗЫСКИВАЕТСЯ ВОДИТЕЛЬ ГРУЗОВИКА. 4 davswk, 10 hrsdav, пн-чт, пт офт. Начните с 550 долларов в неделю с мед & amp; стоматологический 718-634-2085. Начальник склада (Манн) Контроль и надзор Координируйте работу 15 рабочих по переработке, транспортировке, штабелированию, заполнению заказов, маркировке, упаковке, отправке и отправке; ведение складского учета отечественных & amp; импортные продукты питания (мясо, фрукты, овощи 8.консервы) на складе. Обучайте новых рабочих. Перевести мандаринский диалект, кантонский диалект, фучжоу и т. Д. Английский. 4 г. опыт читать. $ 19,02 час 40 час. Нед. Отправить резюме в дупл. к PM 2186, P.O. Box 703, NY, NY 10014-0703 Склад - 25 человек требуется Edrn до S350-S450 в неделю Звоните Walter 212-248-072 Welder - Co. требуется опытный сварщик, не входящий в профсоюз. Должны иметь водительские права. Подайте заявку по адресу: 12-08 37th Ave, bsmt, L. LC. Qns, с 6 до 7 или с 16 до 17, см. VicNunzio. Реставратор деревянных полов. В обязанности входит знание различных типов деревянных полов: необходимо знать, как работать с соответствующим оборудованием.Требу 2 года. опыт 40 часов в неделю, CnM (7181157-7774 Административные 425 ПОЛЬЗОВАТЕЛИ КОМПЬЮТЕРА Обработка текстов. Ввод данных. Высокая компенсация. Полный рабочий день Частичная занятость Cnll) 800 821 4502 Уход за приемными детьми 478 Вы можете быть приемными родителями Звоните 1-800-4-KIDS-27 (454-3727) Доступная финансовая помощь The Foster Corp Network Health Care 500 IMMEDIATE Childcore, Housekeeper. Няни, компаньоны, NA. (718) 458-М1И. ДОМАШНЯЯ МЕДИЦИНСКАЯ ПОМОЩЬ! 510 вакансий! Бесплатное обучение! Преимущества! Бруклин: (7! 8) 49-8M3 Оуэнс: (718)843-8449 МЕДСЕСТРЫ НЕМЕДЛЕННО ПОЛУЧАЮТ wСертификаты HHA'sPCA ABLE HEALTH CARE -9400 ЗАРЕГИСТРИРОВАННЫЕ МЕДСЕСТРЫ Неполный рабочий день.Опытный. Тел: (718) 972-9792. Факс: (718) 972-7435. RN LPN CNA HHA PCA Присоединяйтесь к J & amp; K Familvt Доступна немедленная работа. Районы Бронкс-Вестчестер. Полный 8, возможна неполная занятость. Доступна работа по выходным. Гибкие часы работы ЗВОНИТЕ: (914) 433-7810 Медсестринское образование - 501 HHANAHOUSEK EE PINGNANNY Бесплатное обучение. Место работы! ! ! Также upgrodesto HHA. Знакомство с компьютерами. Coll '(718) 237 0467 или (718) 222 0051. Охрана 403 ОФИЦЕРЫ БЕЗОПАСНОСТИ 75 ОТКРЫТИЙ ПРЕДОТВРАЩЕНИЕ ПОТЕРИ РОЗНИЧНОЙ ТОРГОВЛИ ДЕТЕКТИВЫ МАГАЗИН Немедленный старт для Охранников с расширенной безопасностью & amp; Детективы с опытом розницы 2 года.Кандидаты должны иметь чистую судимость и домашний телефон. Преимущества упак. ОТКРЫТЫЙ ДОМ АБСОЛЮТНАЯ СЕТЬ БЕЗОПАСНОСТИ 360 ЗАПАД 3! УЛИЦА. КОМНАТА 1010 NYC (B & amp; 9ave) ПН-ПТ, 10:00 - 16:00 СЛУЖБЫ БЕЗОПАСНОСТИ STARR Непосредственные должности охранника Интервью 8o 4p. Пн-пт & amp; Суббота на этой неделе только с 8a-12.30o. .50 Broad St, Room 1020 212-344-262 SECUPI FY GUARDS Armed & amp; Безоружный. Bronx & amp; Куини - Чистая запись & amp; проверяемые ретрансляции. Автомобиль & amp; имя tf lepnofie o MUST Cr, r, 24.hour hctnne800 'i ?? - lV4ff 3 ДЕТЕКТИВЫ МАГАЗИНОВ T j работают со всеми Doroughs и Westchester r: arjnlv. Должен быть nave 3 vn efperienre. 1,9 $ i4hr для Mart Call 7ifi 379 821 '?. ОХРАННИКИ БЕЗОПАСНОСТИ должны быть сертифицированы государством, открыты trnrrurd. PT FT, профсоюзные льготы, 470 E- 1 49th Street, Bronx, (76 465-1515 VGI Inc. ОХРАНА БЕЗОПАСНОСТИ Должна быть лицензия штата Нью-Йорк, по вечерам и выходным. Звоните с понедельника по пятницу, 10:00, 14:00 (7181 272-336, служба безопасности). Обучение 404 CITY SECURITY TRAINING Присоединяйтесь к профессионалам! В тот же день 8 Hr NYS Cert.S25, OJT $ 60 Ann 30 $. Бесплатные печатные издания WNYS Ложь. упак. New Fire Gcard Preps & amp; Убыток Пред. занятия: пн-сб. Оба участка 303 З 42 ул. ste 610. (212) 957-1350 A 397 Мост sf. 9-я Пихта, Бклин: 718-254-9630. Обучение охранников PACE UNfV Manh Sales Help 202 ПРОДАЖИ: Если ваш бизнес не приносит 500 долларов в день, позвоните мне. У меня хорошие новости !! Toll Free 1 800-811-2141 код 67338 ТЕЛЕСАЛИЗАЦИЯ Только лучшие исполнители. Уникальное телешоу, ищущее агрессивных телефонных сотрудников для связи с руководителями бизнеса. Комиссия 600 долларов за закрытие.Высшая словесная кожа-; n должен CaH Dan,? 1? ? 37 JO. Развлечения 700 ПРИМЕЧАНИЕ. Для рекламы, указанной без классификации, может потребоваться футболка. Dally News не поддерживает каких-либо рекламодателей, перечисленных в этом классе, и мы рекомендуем вам проявить благоразумие перед отправкой денег или подписанием какого-либо контракта. МОДЕЛИ ГДЕ ТЫ ?. Заработайте 1500 долларов в день в моде. Нет опыта. Женщины 5'0 - 511 "Мужчины 5'0 - 6'2" 212 836-4749 599 Lexington 23rd ftr ACT ДЛЯ ВСЕХ ВОЗРАСТОВ МОДЕЛЬ Вакансии уже доступны !! 212-243-SO30 ДЕЙСТВУЮЩИЕ МОДЕЛИ ДЛЯ МНОГО ВОЗРАСТА Новые лица для всех типов до $ l500Dav МНОГО РАБОТЫ! НЕТ ОПЫТА! 212-532-8154 ДЕЙСТВУЮЩИЕ АУДИТОРИИ Предстоящие художественные фильмы Телевизионный ролик.Нет exp nec. Детали ExtrasBit. Lie 6 (212) 391-4668 ActModels, MF, дети всех возрастов и возрастов. виды, для показов мод, каталогов, фильмов, ТВ рекламы. Нет опыта. не включенные в другие категории (212) 967-2760 DANCERS 1 Джентльменский клуб! ищет танцоров NiteOays. Опыт плюс. Зарабатывайте до 1000 долларов в день. Также опытные хозяйки шампанского, менеджеры, ди-джеи. Для записи звоните после полудня. (212) 977-1254 РАЗЫСКИВАЮТСЯ ТАНЦЫ Для массового развлекательного сотрудничества. Нет exp nec. Выплачены самые высокие комиссии. Немедленный прокат. 212-727-0705 Продайте машину быстро. Позвоните нам сегодня, квалифицированный консультант будет готов помочь вам.(212) 949-2000 За пределами Нью-Йорка 1-800-223-1660 NASSAU & amp; СООБЩЕСТВА СУФФОЛКА принимают заявки на сдачу экзамена 470 TRAIN FOR IT NOW! Я J.Mi ii Eui-a! lrt r. RMnafHe a IrtK Green Card OK Нет Высокий Полностью оплачиваемое обучение без отрыва от производства НАЧАЛЬНАЯ ОПЛАТА: 1 3,1 $ - 1 $ 8,43 час Обработчики почты Обработчики почты Наценка Клерки Расст. Машиностроители Городская транспортная компания и / или служащие ПРАВИТЕЛЬСТВО en nu A d JL .NEW YORK rtZJiiWORKS Обучите и будьте готовы к работе профессиональных охранников ТЕЛООХРАНИТЕЛЬ ПОЖАРНАЯ ОХРАНА ДЕТЕКТИВЫ МАГАЗИНА ТОРГОВОЙ БЕЗОПАСНОСТИ 6.00atoi.15.00lirg nt'itirH "" "" "ii 1 NY State High SCHOOL EQUTV. ДИПЛОМ ПОДГОТОВИТЬСЯ GcD Training Гарантированные результаты День, вечер или суббота METR0PLEX CAREERS CENTER 505 Bth Ave & amp; 35tn St 23rrl Floor 212 293-7080 TRA ДЛЯ РАБОТЫ В ОБЛАСТИ ГРАЖДАНСКИХ СЛУЖБ округа федерального штата СЕЙЧАС ОТКРЫВАЙТЕ АГЕНТСТВА СЕЙЧАС НАБОР ПОЧТОВЫХ КЛЕРОВ Начальная зарплата от: 9,44–20,83 долларов Будьте готовы за три недели! Звоните сейчас, чтобы записаться на прием: 212-244-1188 ПРАВИТЕЛЬСТВЕННЫЙ ЦЕНТР КАРЬЕРЫ 505 8-я авеню - 2-й этаж (на 35-й улице), NYC AIRLINES СЕЙЧАС ПРИНИМАЕМ KENNEDY LA GUARDIA Flight Aft Tktng Bag Hon Cargo.718-390-7171 Плата за 24 часа. АВИАЛИНИИ ПРИНИМАЮТСЯ! Позиции уровня входа до 18 часов. Нет опыта. не включенные в другие категории Звоните круглосуточно. 212-615-6640 Уборщики квартир $ ЗАРАБОТАЙ S2VHR. PTFT. $ ЛЕГКО! Гибкий график работы. Платеж. БУДУТ ОБУЧАТЬ! ЗВОНИТЕ (212) 613-3115 Няня VHousekeepers СЕЙЧАС ПРИНИМАЕМ ВСЕ BORO'S & amp; L.l. FTPT. ИНФОРМАЦИЯ 718-390-7259. 24Hrs-7Davs-No Empl Agency Fee BILLING S15-S30PER HOUR Простой медицинский биллинг. Полное обучение. Требуется компьютер. 1-800-259661 x241 "CITY JOBS" (NIC.) СЕЙЧАС HIRINGNO EXP N.Y.C. Агентства нанимают.Нет опыта. Платное обучение. До S55K. $ 3,95 мин. Лечебная, Отпускная, Больная, Пансионат. 212718 540-2040, 24 тирс7 дан. СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ СЧЕТ S20-S40 В ЧАС Легкий стоматологический биллинг. Полное обучение. Компьютер Reg'd. 1-800-434-5518 X606 ЛЕГКАЯ РАБОТА! ОТЛИЧНАЯ ОПЛАТА! СОБИРАЙТЕ ИЗДЕЛИЯ НА ДОМУ БЕСПЛАТНЫЙ ЗВОНОК 1-800-467-5566 EXT 2818 БЕСПЛАТНАЯ РАБОТА НА ПОСТОЯНУЮ РАБОТУ 3-недельный семинар по подготовке к работе, мастер-класс для людей в возрасте от 17 до 40 лет. Предоставляется стипендия на транспортировку. Звоните 212-360-1100 или 212-281-1200 ставка. 10 AM–2PM STRIVE t, rl f .1 SET Casi irita, AnaD 17 1 I В школе требуется диплом КАРЬЕРА CTR ocu o nj r - через 24 часа, ГЛАВНАЯ РАБОТА - 33 доллара за свой потенциал, платное обучение, полные льготы.Для информации звоните 888-67 4-91. 50 доб 3U02. Диплом средней школы 1-4 мес. НЕТ классов 212-465-0995 ПОЛОЖЕНИЯ В ОТЕЛЕ СЕЙЧАС! Нью-Йорк Лонг-Айленд Стойка регистрации flAoint Housekeeping. ИНФОРМАЦИЯ 212-479-0859 Круглосуточная плата. ПОЧТОВЫЕ РАБОТЫ НЕ НУЖДАЕТСЯ В ОБУЧЕНИИ. Нет опыта. Приглашаем на работу. 212 или 718-540-3337, 52,95–24 часа, Сим-Пт, Работа на дому 820 ПРИМЕЧАНИЕ. За рекламу, указанную в этой классификации, может взиматься плата. Daily News не поддерживает каких-либо рекламодателей, перечисленных в этом классе, и мы рекомендуем вам проявить благоразумие перед отправкой денег или подписанием какого-либо контракта.СБОРКА ДОМА до 60 долларов в неделю. Крофтс-Шитье -Игрушки из дерева-Ювелирные изделия и т. Д. ЗВОНИТЕ 24 ЧАСА: 718-401-9119 Требуемые позиции 1100 3 МУЖЧИНЫ WTRUCK & amp; VAN 1 делать переезд & amp; вывоз мусора Позвоните в Chester 718-206-2305, 917-407-8910 или 917-276-1125. СТРОИТЕЛЬСТВО SUPERINTENDENT, связанное с & amp; refs, позвоните Роберту гудку 917-290-5295 (том 718-409-961 HANDYMAN Гипсокартон, плотницкие работы, сантехника, электричество, покраска. Нужен суперинтендант. Позвоните Джонни 718-821-2877) Я сертифицированный домашний санитар и специалист по болезни Альцгеймера и няня с отличными рекомендациями Звоните (718 773-2001 Я ИЩУ ДОМОХНИЦУ.Я честен, у меня есть хорошие рекомендации & amp; поедет в Манхэттен или Квинс. Звоните (718) 994-5506 Я приятная молодая леди, ищу работу, чтобы работать с пожилыми людьми или помощником товарища. Понедельник - пятница Ref & amp; сертификат доступен. Звоните (718) 464-4788 Я ЗАБОТУСЬ О ПОЖИЛЫХ ИЛИ ДЕЛАЮ ДОМАШНУЮ УБОРКУ. Я ОЧЕНЬ ЭНЕРГЕТИЧНЫЙ & amp; ТЯЖЕЛО ТРУДЯЩИЙСЯ. Refs Доступен 716-485-9711 НУЖНЫ УСЛУГИ ПО УБОРКЕ? 1. Уберу ваш дом, офис и т. Д. У меня 10 лет опыта с отличными реф. Позвоните Бланке после 19:00 (718) 458-2475 ДРУЖНИК МОЖЕТ! Я занимаюсь покраской, гипсокартоном, плиткой, столярными изделиями, кровлей, бетонными работами, электрикой, кондиционерами.Бесплатные оценки. Позвоните в Tito 718-295-5901. У НАС ЕСТЬ НАДЕЖНАЯ, ФАНТАСТИЧЕСКАЯ НЯНЯ. Она доступна Full Time, пятилетняя. Ссылки доступны. Звоните Хизер (212) 250-8064 Майами! Научитесь зарабатывать 1200 КАРЬЕРА БАРТЕНДА Начните работать ВЧЕРА! 1-800-TEND-BAR dBASE LOTUS WP MS-WORD ИСПАНСКО-АМЕРИКАНСКИЙ ИНСТИТУТ Таймс-сквер 212-840-7111 I Мы - старейший технический колледж Нью-Йорка. Мы также его лучшие. TCI, основанный в 1909 году, до сих пор выпускает больше студентов с инженерными дипломами за два года, чем любой другой колледж Нью-Йорка.Мы можем подготовить вас к высокооплачиваемой технической карьере со степенью всего за 16 месяцев. Мы предлагаем практическое обучение: доступное обучение, дневное и дневное обучение; вечерние занятия, финансовая помощь квалифицированным студентам и выдающаяся помощь в трудоустройстве. Наши программы включают: Электроника Технологии Телекоммуникации Техника обслуживания зданий Компьютерные технологии и технологии; Сетевые компьютерные системы учета Офисная техника Отопление. Вентиляция & amp; Кондиционирование воздуха Промышленная электроника Технология Gall 1 Mandl Mae Старейшая и крупнейшая школа здравоохранения в Йорке, зарегистрированная МЕДИЦИНСКИЙ АССИСТЕНТ (RMA) V с обработкой текста ЗАРЕГИСТРИРОВАННЫЙ АССИСТЕНТ РАЗРАБОТЧИКА (RDA) ФЛЕБОТОМИЯ & amp; ТЕХНИК ЭКГ (RPTCCl) МЕДИЦИНСКИЙ СПЕЦИАЛИСТ (NT) ПОМОЩНИК МЕДИЦИНСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ (MOA) M ИСПОЛЬЗУЮЩИЙ ПОМОЩНИК МЕДИЦИНСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ (CNA) ДОМАШНЯЯ МЕДИЦИНСКАЯ ЛАБОРАТОРИЯ, ТЕХНИК (COLT) Т МЕДИЦИНСКИЙ АССИСТЕНТ 'Национальная сертификация Помощь при трудоустройстве Финансовая помощь если квалифицированный CTI 500 8th Ave.Ставка W. 35 & amp; W. 36 SL - 4 эт. (212) 564-0500 НАШ 30 ГОД По лицензии H.Y. State Ed. DepL ЧАСТНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬ Помощь в трудоустройстве Финансовая помощь, если соответствует требованиям CTI 500 8th Ave. Bet W 35 tW. 36 St -4th a (212) 564-0500 НАШ 30 ГОД по лицензии N.Y. State Ed. Dept. CHILD CARE Помощь в трудоустройстве Финансовая помощь, если вы соответствуете требованиям CTI 500 8th Ave. Bet 35 t W. 36 St - 4i R. (212) 564-0500 НАШ 30 ГОД по лицензии T. State Ed. Dept. - 800 - 878 - 8246 School Train Now для вашей КАРЬЕРЫ КОМПЬЮТЕРЫ ПУТЕШЕСТВИЯ ПУТЕШЕСТВИЯ ДЛЯ СТУДЕНТОВ-МЕДИЦИНСКИХ ПРОГРАММ, если вы соответствуете требованиям, стажировка включена! ДЕЙСТВУЙТЕ СЕЙЧАС - НЕ ПРОПУСТИТЕ Американский центр профессионального обучения 15 Park Row, 6th fl.Запись на прием возле мэрии (212) 349-3331 Лицензия Департамента образования штата Нью-Йорк $ BARTEND $ 1-2 недельные занятия. Самый большой & amp; самая доступная школа. Помощь в трудоустройстве. BARMASTERS OF MANHATTAN по лицензии NYS BOARD OF ED. 1 800-853-2640; www.bormaster.coni Трудоустройство BARTEND. Двухнедельный класс 1-800-532-9222 Школы американских барменов по всей стране, наш 30-й год Получите НА ДОМУ G.E.D. Заочная программа. Официальные материалы. Среднее время прохождения 2-3 недели. Бесплатные пересдачи. Звоните сейчас 718-225-7477 г.E.D. Пройдите заочный курс Af-Home GED, в среднем от 2 до 3 недель. ЗВОНИТЕ СЕЙЧАС 718-626-0649. ГИББС ГРЭДС ПОЛУЧИТЕ ОТЛИЧНУЮ РАБОТУ! Coll для получения дополнительной информации о компьютерных сетевых операциях, компьютерных технологиях. Поддержка и поддержка Администратор офиса. еще много программ! 212-867-9300 ШКОЛА КАТАРИН ГИББС - ВАС ЕЕ РАБОТЫ! 3 недели, чтобы стать БАНКОВСКИМ ДЕЛОМ или 4 недели, чтобы стать МЕДИЦИНСКИМ БИЛЛЕРОМ НАЦИОНАЛЬНАЯ СЕРТИФИКАЦИЯ NURsi TECH НАЦИОНАЛЬНАЯ СЕРТИФИКАЦИЯ ЭКГФлеботомия или 5 недель, чтобы стать МЕДСЕСТРАМ или пройти обучение, чтобы стать НОГТЯНЫМ ТЕХНИКОМ Caliber Training Institute 500 8th Ave., NYC (212) 564-0500 наша 30-летняя лицензия от N Y S. Education Dspt МЕДИЦИНСКИЙ ПОМОЩНИК Финансовая помощь может оплатить все ваше обучение, если вы соответствуете требованиям. Гарантированная стажировка Школа Аллена - Манхэттен - 212-279-4141 Школа Аллена - Куинс - 718-291-2200 Школа Аллена - Бруклин 718-243-1700 МЕДИЦИНСКИЙ ПОМОЩНИК Финансовая помощь может оплатить все ваше обучение, если вы соответствуете требованиям. Гарантированная стажировка Школа для иностранцев - Манхэттен - 212-279-4141 Школа Аллена - Квинс - 718-291-2200 Школа для иностранцев - Бруклин -718-243-UW ЛИЦЕНЗИЯ НА БОРЬБУ С ВРЕДИТЕЛЯМИ штата Нью-Йорк.5 дней. Помощь при работе в бизнесе. Самая известная школа. Низкие тарифы, легкий tnstaf Звоните 718-205-0557 или 800-220-5494

Локусы количественных признаков с возрастным влиянием на плодовитость у Drosophila melanogaster

Abstract

Теория жизненного цикла и эволюционные теории старения предполагают существование аллелей с возрастным влиянием на приспособленность. В то время как различные исследования документально подтверждают возрастные изменения генетического вклада в вариации компонентов приспособленности, мы очень мало знаем о лежащей в основе генетической архитектуре таких изменений.Мы использовали набор рекомбинантных инбредных линий для картирования и характеристики эффектов локусов количественных признаков (QTL), влияющих на плодовитость самок Drosophila melanogaster в возрасте 1 и 4 недель. Мы идентифицировали один QTL на второй хромосоме и один или два QTL, влияющих на плодовитость на третьей хромосоме, но эти QTL влияли на плодовитость только в возрасте 1 недели. Генетическая изменчивость плодовитости в возрасте 4 недель была больше, чем в возрасте 1 недели, и не было генетической корреляции между плодовитостью в раннем и позднем возрасте.Эти результаты предполагают, что разные локусы вносят вклад в вариацию плодовитости по мере старения организма. Наши данные подтверждают теорию накопления мутаций при старении применительно к репродуктивному старению. Сравнивая результаты этого исследования с нашей предыдущей работой по QTL продолжительности жизни, мы также находим доказательства того, что антагонистическая плейотропия также может вносить вклад в генетическую основу старения в этих линиях.

Основная задача эволюционной генетики состоит в том, чтобы охарактеризовать генетическую архитектуру естественной изменчивости жизненно важных черт, тех компонентов приспособленности, которые напрямую влияют на выживание в зависимости от возраста и репродуктивный успех.Теория истории жизни основана на идее, что естественный отбор способствует определенной стратегии возрастного распределения энергии для конкурирующих требований роста, развития, воспроизводства, хранения, поддержания и восстановления в данной экологической обстановке (Stearns 1992). Это говорит о том, что понимание генетической основы изменчивости жизненного цикла потребует, чтобы мы не только идентифицировали гены, которые влияют на эти признаки, но также характеризовали возрастные эффекты аллелей в этих локусах. Знание генетической основы вариабельности жизненного цикла на молекулярно-генетическом уровне не только будет способствовать нашему пониманию генетической архитектуры и эволюции количественных признаков в целом, но также даст представление о механизмах, поддерживающих вариабельность приспособленности (Barton and Turelli 1989). ; Бартон и Кейтли 2002; Турелли и Бартон 2004).

В то время как многочисленные исследования документально подтвердили существование генетически обусловленных вариаций жизненных характеристик в естественных популяциях (Mousseau and Roff 1987; Hard et al. 1993; Shaw et al. 1995; Kruuk et al. 2000) ; Leips et al. 2000; Sommer and Pearman 2003; Drnevich et al. 2004; Fox et al. 2004; Windig et al. 2004), мы очень мало знаем о генах, лежащих в основе этой вариации. . Кроме того, хотя несколько исследований подтвердили, что мутации могут иметь возрастные эффекты на компоненты фитнеса (Houle et al. 1994; Хьюз и Чарльзуорт 1994; Hughes 1995; Чарльзуорт и Хьюз 1996; Promislow et al. 1996; Татарский и др. 1996; Pletcher et al. 1998, 1999; Mack et al. 2000; Ямпольский и др. 2000; Hughes et al. 2002), лишь немногие пытались идентифицировать фактические локусы, которые влияют на эти возрастные изменения в естественных популяциях (Curtsinger, Khazaeli, 2002; Jackson, и др., , 2003; Khazaeli, , и др.). 2005; Нуждин и др. 2005).

Одной из наиболее важных характеристик жизненного цикла является плодовитость, то есть количество произведенных потомков, пропагул или яиц. Плодовитость особи определяет базовое количество потомства, которое может быть передано следующему поколению, и, таким образом, представляет собой максимально возможную приспособленность организма. Кроме того, возрастное распределение энергии для воспроизводства является более важным фактором, определяющим приспособленность, чем плодовитость в течение всей жизни в популяциях с возрастной структурой (Charlesworth 1994).Распределение энергии для воспроизводства в зависимости от возраста может также влиять на физическую форму за счет компромиссов с другими характеристиками, такими как выживание взрослых и будущее воспроизводство (Rose 1984; Gustafsson et al. 1994; Tatar and Promislow 1997; Jouventin and Dobson 2002; Оксанен и др. 2002; Федорка и др. 2004). Таким образом, локусы, которые контролируют возрастное выделение энергии для воспроизводства, должны иметь плейотропные эффекты на другие компоненты приспособленности и, таким образом, могут действовать как генетические ограничения на независимую эволюцию других компонентов приспособленности.

У многих видов наблюдается возрастное снижение плодовитости (Aigaki and Ohba 1984; Rose 1991; Partridge and Barton 1993; Rauser et al. 2003; Ricklefs et al. 2003; Broekmans et al. 2004; Новосельцев и др. 2004; Оттингер и др. 2004; Скорацка и Кучински 2004; Николс и др. 2005), поэтому понимание генетической основы репродуктивного старения также должно быть полезным для понимания генетики старения.Большое количество исследований выявило гены с помощью мутационного анализа или генетических манипуляций, которые влияют на скорость старения, что отражено в возрастных показателях смертности (Kenyon et al. 1993; Lin et al. 1998; Hsin and Kenyon 1999; Tatar и др. 2001; Сан и др. 2002; Ту и др. 2002; Марден и др. 2003; Пикард и др. 2004; Рогина и Хельфанд 2004; Халашек-Винер и др. 2005; Kaeberlein et al. 2005). Однако гены, влияющие на возрастную смертность, могут отличаться от генов, вызывающих старение по другим признакам, таким как репродуктивная способность. Кроме того, в вышеупомянутых исследованиях использовались искусственно индуцированные мутации для выявления генов-кандидатов на старение, которые могут или не могут способствовать естественным изменениям старения. Таким образом, чтобы понять, как генетическая архитектура жизненных признаков влияет на старение и поддержание вариабельности старения, важно охарактеризовать влияние естественных аллельных вариаций (Knight et al. 2001).

Процедуры картирования локусов количественных признаков (QTL) предоставляют полезные возможности для поиска локусов, которые вносят вклад в вариации компонентов приспособленности. Многие исследования QTL выявили хромосомные области, которые влияют на некоторые аспекты приспособленности (Нуждин и др. 1997, 2005; Фрай и др. 1998; Шук и Джонсон 1999; Лин 2000; Уэйн и др. 2001; Слейт et al. 2002; Steinmetz et al. 2002; Wayne and McIntyre 2002; Ayyadevara et al. 2003; Унгерер и Ризеберг 2003; Weinig et al. 2003; Меринг и Маккей 2004; Peripato et al. 2004; Валенсуэла и др. 2004; Verhoeven et al. 2004; Colosimo et al. 2005; Fiumera et al. 2005; Khazaeli et al. 2005; Чжун и др. 2005). В Drosophila melanogaster точное картирование этих QTL позволило уточнить положение генов-кандидатов в QTL, которые влияют на ряд признаков, включая продолжительность жизни (Pasyukova et al. 2000, 2004), брачное поведение самцов (Moehring and Mackay 2004), количество овариол (Wayne and McIntyre 2002), устойчивость к голоданию (Harbison et al. 2004) и обонятельное поведение (Fanara et al. 2002). Проверка эффектов естественной генетической изменчивости в генах-кандидатах в областях QTL также была начата с использованием ассоциативного картирования (De Luca et al. 2003). В то время как «золотой стандарт» для окончательного подтверждения влияния вариации последовательностей на фенотипические вариации - это функциональная характеристика влияния аллелей на фенотипы (Mackay 2001; Rong et al. 2002; Sun et al. 2004), процесс картирования оказался многообещающим методом идентификации генов, на которых следует сосредоточить наши функциональные генетические усилия (Long et al. 1995; Gurganus et al. 1999; Geiger-Thornsberry and Mackay 2004; Moehring и Маккей 2004; Нгуен и др. 2004; Палссон и Гибсон 2004; Пасюкова и др. 2004).

В этом исследовании мы используем популяцию рекомбинантных инбредных линий (RIL) D. melanogaster для решения трех проблем, связанных с генетической архитектурой возрастной плодовитости.Во-первых, мы картируем расположение QTL, которые вызывают различия в плодовитости в двух возрастах (1 неделя и 4 недели), и оцениваем их относительное влияние на плодовитость в каждом возрасте. Во-вторых, поскольку на эффекты аллельной вариации в QTL может влиять генетический фон (Mackay et al. 2005), мы проверили эпистатические эффекты на плодовитость в полногеномном анализе. Наконец, поскольку возрастная плодовитость часто (Rose 1984, 1991), но не всегда (Harshman and Hoffmann 2000) отрицательно коррелирует с продолжительностью жизни, мы сравниваем результаты этого исследования с нашим предыдущим исследованием продолжительности жизни для выявления предполагаемых плейотропных локусов. влияющие на эти две черты.Мы обсуждаем эти результаты в свете двух ведущих эволюционных теорий старения: антагонистической плейотропии (AP) (Williams, 1957) и накопления мутаций (MA) (Medawar, 1952). Чтобы изучить потенциальное влияние AP, мы сравниваем локализации и возрастные аллельные эффекты QTL плодовитости с местоположениями и аллельными эффектами QTL, влияющими на продолжительность жизни спаривания, которые ранее были картированы с использованием того же набора RIL в аналогичных условиях окружающей среды (Leips и Mackay 2002). Согласно модели AP, QTL, влияющий на плодовитость и продолжительность жизни, должен колокализоваться, и аллели в этих локусах должны проявлять антагонистические эффекты на эти признаки.Чтобы изучить наши данные на предмет доказательств в поддержку МА, мы используем данные о генетических компонентах вариабельности плодовитости между линиями в каждом возрасте. Уникальное предсказание этой теории, примененное к нашему картированию популяции RIL (популяция гомозиготных линий), состоит в том, что генетический компонент изменчивости плодовитости должен увеличиваться с возрастом (Hughes and Charlesworth 1994; Hughes and Reynolds 2004).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Запасы мух:

Наша картографическая популяция состояла из набора из 92 RIL (Nuzhdin et al. 1997), полученный от скрещивания двух изогенных штаммов, Oregon-R ( Ore ) (Lindsley and Zimm 1992) и российского штамма 2b , изогенной линии, полученной из популяции мух, отобранных для снижения самцов. сексуальная активность (Пасюкова, Нуждин, 1993). Процедура, используемая для создания RIL, была ранее описана (Nuzhdin et al. 1997) и кратко изложена здесь. F 1 потомство скрещивания штаммов Ore и 2b было подвергнуто обратному скрещиванию со штаммом 2b , а затем случайным образом скрещено в четырех поколениях.После последнего поколения случайного спаривания 200 пар самец-самка были использованы для создания сублиний из этой популяции путем скрещивания братьев и сестер в течение 25 поколений. Впоследствии из этих подстрок было создано 98 RIL. Из исходных 98 RIL 92 сохранились на момент проведения этого эксперимента.

Анализ плодовитости в раннем и позднем возрасте:

Общее количество яиц, отложенных одиночными самками за 2-дневный период, использовалось как оценка плодовитости в возрасте 1 и 4 недель.Две повторяющиеся группы мух каждого генотипа были созданы одновременно, чтобы можно было измерить плодовитость в раннем и позднем возрасте у разных самок из каждой RIL. Мы измерили плодовитость в раннем и позднем возрасте у разных самок, чтобы минимизировать влияние обращения в раннем возрасте на плодовитость позднего возраста и уменьшить влияние негенетических фенотипических корреляций между плодовитостью в раннем и позднем возрасте. Однако одним ограничением этого дизайна является то, что, поскольку плодовитость измерялась у разных самок в раннем и позднем возрасте, мы не могли рассчитать фенотипическую корреляцию между плодовитостью в раннем и позднем возрасте.

Для получения самок для каждой оценки плодовитости 15-20 пар мух линий Ore и 2b и каждой из 92 RIL было разрешено откладывать яйца в течение 4-дневного периода в камерах для сбора яиц (описано ниже). Из этих камер были собраны 50 личинок первой или второй возрастной стадии каждого генотипа и помещены во флаконы, содержащие 5 мл стандартной среды кукурузной муки / агара / патоки для стандартизации плотности личинок. Эту процедуру повторяли с пятью повторными пробирками на линию.Плотность личинок контролировалась таким образом, чтобы уменьшить влияние изменения плотности личинок на размер самок при эклозии, признак, который положительно коррелирует с плодовитостью (Robertson 1957; Tantawy and Rahka 1964; Partridge et al. 1986; Nunney 1996; Zwaan et al. 1995). Из каждого повторного флакона были собраны три девственные самки, появившиеся в один и тот же день, и помещены в флакон, содержащий стандартный корм для мух. Чтобы обеспечить себе партнеров, шесть молодых самцов (<1 недели) штамма Samarkand ( Sam ) были добавлены в каждый флакон (два самца: по одной самке на флакон). Sam (неродственная изогенная лаборатория) самцов использовали в качестве партнеров для стандартизации потенциальных эффектов мужского генотипа на плодовитость самок.

Возрастная плодовитость отдельных самок измерялась в молодом (4–5 дней) и старом (28 дней) возрасте аналогично тому, как это было сделано Houle et al . (1994) и Сервис (2000). Эти даты были выбраны потому, что репродуктивная продукция обычно достигает максимума у ​​ D. melanogaster примерно через 6–12 дней после закрытия и снижается после этой точки (Houle et al. 1994; Татарский и др. 1996; Гассер и др. 2000). В каждом возрасте из каждой пробирки извлекали одиночных самок и помещали в камеру для откладывания яиц с одним самцом Sam . Камеры для откладки яиц состояли из стандартных флаконов для мух на 10 мл, содержащих 1 мл затвердевшего 2% агара для обеспечения источника влаги и 1 мл корма для мух для откладки яиц. Пищу помещали на плоскую сторону пробки из затвердевшего пенопласта (которая также использовалась для закрытия флакона). Затем флакон перевернули так, чтобы пробка с пищей оказалась на дне флакона.Самкам позволяли откладывать яйца на пищевых пробках в течение 24 часов, после чего каждую пробку удаляли для подсчета яиц. Пробку, содержащую свежие продукты, заменили во флаконах, и описанный выше процесс повторили в течение второго 24-часового периода. После этого второго дня откладки яиц все самки были выброшены.

Для каждого возраста оценки плодовитости были сделаны на 15 самках на линию (пять повторных флаконов, содержащих 3 самки на ампулу на линию), всего 2760 наблюдений (1380 молодых мух и 1380 старых мух).

Статистический анализ:

Мы проверили различия в возрастной плодовитости между инбредными родительскими линиями ( Ore и 2b ) и RIL в отдельных анализах.Различия в плодовитости родительских штаммов были проверены с использованием смешанной модели ANOVA в соответствии с моделью y = μ + A + S + ( A × S ) + R ( A × S ) + ошибка , где μ - общее среднее значение, A - фиксированный эффект возраста (1 или 4 недели), S - фиксированный эффект родительского штамма ( Ore или 2b ) и R - это случайный эффект повторения, вложенного в возраст и деформацию.Мухи в особой реплике - это те мухи, которые находились в одном флаконе до того возраста, в котором мы измерили плодовитость.

Для оценки генетических различий в плодовитости RIL мы использовали три отдельных анализа. Первые два анализа использовали дисперсионный анализ случайных эффектов для проверки генетических различий между линиями в возрасте 1 и 4 недель и предоставили оценки компонентов дисперсии между линиями для плодовитости в каждом возрасте. Модель разделила случайные эффекты линии ( L ) и репликации ( R ) внутри линии и остаточную ошибку в соответствии с моделью y = μ + L + R ( L ) + ошибка. для мух в каждой возрастной группе.В третьей модели мы использовали дисперсионный анализ смешанной модели для всего набора данных, чтобы изучить возможность взаимодействия линий по возрасту, которое, по сути, могло бы сказать нам, было ли влияние возраста на плодовитость одинаковым между линиями. Для этого анализа мы использовали модель y = μ + A + L + ( A × L ) + R ( A × L ) + error , где A - фиксированный эффект. возраста на плодовитость и все другие эффекты случайны.

Все статистические анализы проводились с использованием SAS V.9.1. Процедуры PROC GLM и VARCOMP использовались для анализа дисперсии RIL в пределах каждого возраста и для оценки компонентов дисперсии в пределах каждого возраста. Процедура PROC MIXED использовалась для обоих анализов смешанной модели, а значимость случайных эффектов определялась с помощью тестов отношения правдоподобия (Littell et al. 2002). Фенотипические данные были ln-преобразованы, чтобы соответствовать предположениям ANOVA.

Компоненты дисперсии из приведенного выше анализа случайных эффектов были использованы для расчета доли общей фенотипической изменчивости плодовитости, объясняемой генетическими различиями между линиями в каждом возрасте (также отдельно оцениваемыми как коэффициент генетической изменчивости) и генетической корреляцией плодовитости. в молодом и пожилом возрасте.Коэффициент генетической изменчивости ( CV G ) был рассчитан для каждого возраста как CV G = 100 ( V L ) 1/2 /, где V L - компонент межстрочной дисперсии и представляет собой общую среднюю плодовитость (Houle, 1992). Генетическая корреляция по возрастам ( r GA ) была вычислена как cov 12 / (σ L1 σ L2 ) (Robertson 1959), где cov 12 - ковариация между линейными средними при 1 и 4-недельный возраст, а σ L1 и σ L2 являются квадратными корнями компонентов межлинейной дисперсии плодовитости в возрасте 1 и 4 недель из анализа сокращенной модели.

Картирование QTL:

Молекулярные маркеры, использованные для определения генотипа RIL, были цитологическими сайтами вставки мобильного элемента roo (Нуждин et al. 1997). Использовали 81 информативный маркер (Нуждин и др. 1997; Лейпс и Маккей 2000) со средним расстоянием между маркерами 7,9 см. Расстояние между маркерами оценивали по наблюдаемым частотам рекомбинации ( r ) между парами маркеров с использованием функции карты Косамби 100d M = 0.25 ln [(1 + 2 r ) / (1-2 r )]. Расстояние между маркерами в этом исследовании немного больше, чем в предыдущих исследованиях с использованием этих RIL (Nuzhdin et al. 1997; Wayne et al. 2001; Leips and Mackay 2002), потому что потеря 6 из исходных 98 линий уменьшило количество наблюдаемых событий рекомбинации в популяции картирования.

Картирование

QTL было выполнено с использованием составного интервального картирования (Zeng 1994) в QTL Cartographer (версия 1.14) и как описано в Leips and Mackay (2002).Эта процедура картирования проверяет гипотезу о том, что интервал между соседними маркерами содержит QTL, влияющий на количественный признак, при одновременном контроле эффектов связанного QTL за пределами тестового интервала. Маркеры, на которых был обусловлен анализ QTL, были основаны на пошаговом регрессионном анализе прямого-обратного исключения. Поскольку результаты каждого анализа могут быть чувствительны к окну кондиционирования, используемому в каждом интервале тестирования, мы протестировали диапазон размеров окна (5, 10, 15 и 20 см), чтобы оценить влияние размера окна на отношения правдоподобия для каждого из них. QTL.На основе результатов этого набора анализов мы использовали размер окна 10 см, потому что QTL, идентифицированный с этим размером окна, также был определен как значимый во всех анализах, независимо от размера окна, и поэтому представляет собой консервативный выбор. Уровень значимости для каждого анализа QTL определялся путем случайной перестановки данных плодовитости 1000 раз и вычисления статистики отношения максимального правдоподобия по всем тестовым интервалам для каждой перестановки. Статистика LR из исходных данных, которая была превышена максимумом перестановки статистики LR <50 раз, считалась значимой при = 0.05 (Черчилль и Дёрге 1994; Дёрге и Черчилль 1996).

Мы использовали ANOVA (PROC GLM в SAS V.9.1), чтобы сначала проверить эпистаз путем поиска значимых парных взаимодействий между QTL, которые оказали значительное аддитивное влияние на плодовитость на основе нашего анализа картирования. Для каждого взаимодействия генотип каждого маркера (гомозиготный по аллелю Ore или 2b ), ближайший к каждому значимому пику QTL, использовали для оценки значимости взаимодействий маркеров на плодовитость.Поскольку эпистаз может также возникать между QTL без основных эффектов на признак (Mackay et al. 2005), мы выполнили полногеномный скрининг на предмет парных взаимодействий между всеми возможными парами маркеров, используя двусторонний дисперсионный анализ ANOVA, где y = μ + M i + M j + ( M i × M j ) + error , где M - генотип каждого маркера в позициях i и j в каждой строке.Использование 81 маркера означает, что мы проверили 3240 возможных взаимодействий. Таким образом, мы ожидаем 162, 32,4, 3,24 и 0,324 значимых взаимодействий только случайно при P <0,05, <0,01, <0,001 и <0,0001, соответственно.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Генетическая изменчивость возрастной плодовитости (родительские штаммы):

Средняя плодовитость штамма Ore (± 1 стандартная ошибка) в возрасте 1 и 4 недель составила 19,5 ± 3,0 и 10,06 ± 2,7 яиц. , соответственно. Средняя плодовитость штамма 2b через 1 и 4 недели составила 10.87 ± 2,6 и 8,53 ± 1,4 яиц соответственно. Несмотря на эти различия, не было значительных различий в плодовитости между родительскими линиями при усреднении по обоим возрастам ( F 1,16 = 2,51, P = 0,13). Также не было значительного влияния возраста ( F 1,16 = 3,36 P = 0,08) и не было значимого возраста по взаимодействию родительской линии ( F 1,16 = 1,23, P = 0,28).

Генетическая изменчивость возрастной плодовитости (RIL):

Плодовитость через 1 и 4 недели, усредненная по всем RIL, составила 14.8 и 15,2 соответственно (таблица 1), а диапазон плодовитости RIL в возрасте 1 и 4 недель был аналогичным (неделя 1: 5–23 яйца / самка; неделя 4: 3–27 яиц / самка). Таким образом, при усреднении по всем линиям плодовитость очень мало изменилась между 1 и 4 неделями.

ТАБЛИЦА 1

Сводная статистика для данных плодовитости из набора рекомбинантных инбредных линий

Однако на основе ANOVA для каждого возраста мы обнаружили значительные различия в плодовитости между RIL как в 1 ( F)). = 2.03, P <0,0001) и 4 ( F = 2,44, P <0,0001) недель. Примечательно, что генетический компонент общей вариабельности плодовитости на 4 неделе был почти вдвое больше, чем на 1 неделе (Таблица 1). Это не потому, что у людей старшего возраста было меньше фенотипических различий. Фактически, величина остаточной дисперсии плодовитости была на 30% выше при анализе 4-недельных самок по сравнению с 1-недельными самками. Это увеличение вариабельности окружающей среды с возрастом согласуется с другими исследованиями плодовитости (Rose and Charlesworth, 1981) и долголетия (Charlesworth, Hughes, 1996) у дрозофилы и предполагает, что пожилые особи могут быть более чувствительны к изменчивости окружающей среды, чем молодые мухи (Charlesworth и Хьюз 1996).Другое возможное объяснение состоит в том, что, поскольку старые мухи испытали более широкий диапазон условий окружающей среды, кумулятивный эффект этой вариации приводит к большей фенотипической вариативности среди людей старшего возраста.

Хотя RIL различались по плодовитости в каждом возрасте, влияние возраста на плодовитость резко отличалось для разных линий (рис. 1). Срок зависимости от линии по возрасту был значимым (χ 2 (1) = 23,4, P < 0,0001), и генетическая корреляция плодовитости в возрасте 1 и 4 недель не отличалась от нуля значимо (Таблица 1).Вместе эти результаты предполагают, что гены, вносящие вклад в вариации плодовитости в раннем возрасте, отличаются от генов, вызывающих вариации плодовитости на 4-й неделе, и / или что аллельные эффекты локусов, которые вносят вклад в генетические вариации плодовитости, меняются с возрастом.

Рис. 1.—

Средняя плодовитость каждой линии на 1-й и 4-й неделе. Плодовитость измерялась как количество яиц, отложенных одной самкой за 2-дневный период. Показатели плодовитости в пределах линий измеряли у разных самок в каждом возрасте.

Возрастной QTL для плодовитости:

Мы идентифицировали два или три QTL, влияющих на плодовитость в возрасте 1 недели, один на второй хромосоме и еще один или два на третьей хромосоме (рис. 2). Учитывая близость двух QTL на третьей хромосоме и доверительные интервалы вокруг каждого, неясно, являются ли они разными QTL. Наиболее вероятное положение QTL на второй хромосоме находится в цитологической позиции 34E с поддерживающим интервалом 2-LOD (Lynch and Walsh 1998), простирающимся от цитологических позиций 30D до 38A.Вариация этого QTL объясняла 10% вариации плодовитости между линиями в возрасте 1 недели. Аддитивный эффект аллеля Ore в этом локусе увеличивал плодовитость самок на 0,78 яиц / день по сравнению с эффектами аллеля 2b . Один из QTL на третьей хромосоме имеет самую высокую вероятность находиться в положении на уровне 85F (интервал поддержки 2-LOD 73D – 87E). Вариация в этом локусе объясняет 14% генетической изменчивости плодовитости, а аллель Ore в этом локусе также увеличивает плодовитость на 0.74 яйца / день по сравнению с эффектом аллеля 2b . Третий QTL появляется в позиции 87B (интервал поддержки 2-LOD также колеблется от 73D до 87E) и объясняет дополнительные 10% генетической изменчивости. В этом локусе аллель Ore увеличивает плодовитость на 0,67 яиц / день по сравнению с аллелем 2b . Интересно, что направление эффектов аллелей 2b одинаково в обоих сайтах и ​​может отражать тот факт, что эта линия получена из популяции, отобранной для снижения активности спаривания самцов.Однако родительские штаммы 2b и Ore не различаются генетически по пригодности (Wayne et al. 2001), поэтому маловероятно, что наблюдаемые здесь эффекты связаны с общим эффектом аллелей 2b на снижение общего фитнес.

Рисунок 2.—

Результаты составного интервального картирования, показывающие положения QTL, влияющие на плодовитость в каждом возрасте. Пороговое значение значимости для каждого возраста указано горизонтальными линиями. Позиции информативных маркеров обозначены треугольниками на осях x .Линии над пиками указывают интервалы поддержки 2-LOD для местоположения QTL.

Неожиданно мы не обнаружили QTL, который влиял бы на плодовитость в 4-недельном возрасте, несмотря на тот факт, что ANOVA показал более высокую степень генетически обусловленных вариаций плодовитости в позднем возрасте, чем для плодовитости в раннем возрасте. Это говорит о том, что генетическая изменчивость плодовитости между линиями в более старшем возрасте обусловлена ​​аллелями с небольшими эффектами, специфичными для позднего возраста. Наше наблюдение об отсутствии генетической корреляции плодовитости между молодым и пожилым возрастом, таким образом, объясняется уменьшением эффектов QTL, влияющих на плодовитость в раннем возрасте.

Влияние эпистаза среди маркерных локусов на плодовитость:

Ни один из парных тестов на эпистаз среди QTL с основными эффектами на плодовитость не был значимым. В глобальном тесте парных взаимодействий между локусами в раннем возрасте в общей сложности 97 маркеров показали значительные эпистатические эффекты на плодовитость ( P <0,05). Из них 83 взаимодействия имели -значения P от 0,01 до ≤0,05, 13 имели -значения P от 0,001 до <0,01, и только одно взаимодействие имело значение P <0.001. В сравнимом тесте с использованием плодовитости в позднем возрасте 98 маркеров показали значительные эпистатические эффекты на плодовитость ( P <0,05). Из них 92 взаимодействия имели -значения P между 0,01 и ≤0,05, а 6 имели -значения P между 0,001 и <0,01. Учитывая 3240 возможных парных взаимодействий, количество обнаруженных нами значимых взаимодействий находится в пределах количества взаимодействий, ожидаемых только случайно (ожидаемое: 162 P ≤ 0,05, 32.4 P <0,01 и 3,2 P <0,001).

ОБСУЖДЕНИЕ

Возрастные эффекты QTL:

Наши результаты показывают, что относительное влияние генов, регулирующих возрастной график репродукции, изменяется с возрастом. Эта интерпретация подтверждается высокой степенью вариабельности между линиями во влиянии возраста на плодовитость и отсутствием генетической корреляции между плодовитостью раннего и позднего возраста в RIL. Объединение результатов QTL с результатами анализа генетических компонентов изменчивости приводит к интерпретации, что вариабельность плодовитости в более молодом возрасте определялась, по крайней мере частично, несколькими генами умеренного эффекта, но плодовитость в пожилом возрасте определялась гораздо большим количеством локусов. меньшего эффекта.Хотя неясно, сколько фактических генов в регионах QTL вносят вклад в вариацию плодовитости в раннем возрасте, ясно, что их относительное влияние на плодовитость значительно уменьшается с возрастом.

Гены с возрастными эффектами на другие компоненты фитнеса были задействованы во многих других исследованиях D. melanogaster (Kosuda 1985; Engstrom et al. 1989; Hughes and Charlesworth 1994; Hughes 1995; Charlesworth and Hughes 1996; Промислоу и др. 1996; Татарский и др. 1996; Pletcher et al. 1998, 1999; Mack et al. 2000; Ямпольский и др. 2000; Куртсингер и Хазаэли 2002; Hughes et al. 2002; Snoke and Promislow 2003), и несколько исследований начали картировать QTL, лежащий в основе этих возрастных эффектов на показатели смертности (Curtsinger and Khazaeli 2002; Nuzhdin et al. 2005) и уровень метаболизма (Khazaeli et al. 2005). . Наши данные о возрастных эффектах QTL аналогичны результатам, полученным Khazaeli et al. (2005). В их исследовании на скорость метаболизма на 16-й и 29-й дни после закрытия и продолжительность жизни, по-видимому, влияет один и тот же QTL, но эти QTL не влияют на скорость метаболизма в самом молодом и старшем возрастах, изученных в их исследовании. Результаты Нуждина и др. . (2005) также согласуются с нашими в том, что ни один QTL, идентифицированный в их исследовании, не оказал значительного влияния на уровень смертности во всех изученных возрастах. Еще более интригующим было то, что их результаты показали, что в двух QTL аллельные эффекты на уровень смертности отрицательно коррелировали для разных возрастов, причем один и тот же аллель имел положительный или отрицательный эффект на смертность, в зависимости от возраста.

Учитывая временный характер эффектов QTL на стареющие фенотипы, важной целью будущих исследований будет определение факторов, которые вызывают возрастные генетические эффекты. Одна из возможностей заключается в том, что возрастные мутационные эффекты являются результатом взаимодействий между генотипом и средой. Согласно этому сценарию, генетические влияния на фенотип зависят от внутренних физиологических условий; Возрастные изменения физиологии организма модулируют эффекты этих локусов, так что они оказывают заметный фенотипический эффект только в определенном диапазоне условий.Кроме того, возрастные изменения в экспрессии генов могут вызывать возрастные эффекты. Многочисленные исследования продемонстрировали возрастные изменения в экспрессии генов (Rogina et al. 1998; Jin et al. 2001; Weindruch et al. 2001; Pletcher et al. 2002; Seroude et al. ). 2002; McCarroll et al. 2004; Kim et al. 2005), и возможно, что возраст, в котором проявляются заметные эффекты аллельной изменчивости, совпадает с возрастом пика экспрессии этих локусов.В том же духе появляется все больше доказательств того, что возрастные изменения в структуре хроматина, который непосредственно регулирует экспрессию генов, являются механизмом регуляции старения (Chang and Min 2002; Rogina et al. 2002; Tissenbaum and Guarente 2002; Issa 2003; Jaenisch and Bird 2003). Возможно, что генетические вариации ферментов, контролирующих возрастные изменения ремоделирования хроматина, вызывают возрастные эффекты определенных локусов на старение.

Действие гена:

Мы нашли мало убедительных доказательств влияния эпистаза на плодовитость у наших RIL в любом возрасте.По общему признанию, метод, используемый для корректировки количества ожидаемых ложных срабатываний, является консервативным и поэтому не исключает потенциального значения эпистаза для плодовитости в нашей популяции картографии. Более сложный статистический подход, который обладает большей мощностью для обнаружения эпистаза, мог бы быть более полезным в этом отношении (Kao et al. 1999), но такие методы требуют гораздо больших размеров выборки, чем мы использовали в этом исследовании. Если наша интерпретация эпистаза верна - что между локусами очень мало эпистатических взаимодействий, которые влияют на плодовитость, то это усиливает нашу интерпретацию результатов QTL.Это связано с тем, что используемый метод составного интервального картирования дает предвзятые оценки положения и маргинальных эффектов QTL, учитывая любую величину эпистаза и связи между эпистатическим QTL (Kao and Zeng 2002).

Отсутствие эпистатических взаимодействий, влияющих на плодовитость, резко контрастирует с предыдущими работами по этим линиям, которые обнаружили обширный эпистаз среди QTL, влияющий на продолжительность жизни девственной жизни (Leips and Mackay 2000; Mackay et al. 2005). Интересно, что при измерении этих линий на предмет продолжительности жизни супружеской пары оказалось, что эпистатически взаимодействовала только одна пара маркеров.Таким образом, оказалось, что различия в статусе спаривания влияют на степень влияния эпистаза на продолжительность жизни. Необходима дополнительная работа, чтобы оценить, в какой степени эпистаз зависит от условий окружающей среды / физиологического состояния и влияют ли эпистатические взаимодействия в большей или меньшей степени на разные признаки.

Значение для эволюционных теорий старения:

Во многих исследованиях генетической основы старения использовались зависящие от возраста компоненты дисперсии для проверки предсказаний теорий старения MA и AP.В этих исследованиях обычно используются схемы разведения, позволяющие оценить аддитивные и доминирующие генетические компоненты изменчивости признака с возрастом, которые затем могут быть оценены в свете прогнозов каждой теории. Хотя увеличение аддитивного компонента вариации ( V A ) с возрастом можно ожидать от любой модели старения (Charlesworth and Hughes 1996), уникальное предсказание теории МА состоит в том, что генетический компонент вариации среди гомозиготных линий будет увеличиваться с возрастом.Используя эту метрику, результаты нашего исследования подтверждают, что МА производят вариации между линиями репродуктивного старения. В пределах возрастного диапазона, охваченного этим экспериментом (от 1 до 4 недель) наши результаты согласуются с большинством исследований возрастных генетических эффектов на ряд признаков, включая плодовитость (Энгстром и др. 1989; Татар и др. 1996), возрастная смертность (Hughes and Charlesworth 1994; Charlesworth and Hughes 1996; Promislow et al. 1996; Tatar et al. 1996; Hughes et al. 2002; Сноук и Промислоу, 2003), а также аспекты успеха спаривания самцов (Косуда, 1985; Хьюз, 1995; Чарльзуорт и Хьюз, 1996; Хьюз, и др., , 2002, Сноук, Промислоу, 2003). Отсутствие значительной генетической корреляции между плодовитостью в раннем и позднем возрасте добавляет дополнительную поддержку теории МА, поскольку эта модель предполагает, что влияние аллелей на приспособленность в раннем возрасте не коррелирует с влиянием аллелей на приспособленность в более позднем возрасте (Partridge and Barton 1993). ).В рамках модели AP мы ожидаем увидеть отрицательную генетическую корреляцию между плодовитостью в раннем и позднем возрасте. На основе этих сводных статистических данных мы можем сделать вывод, что МА способствует изменчивости возрастной плодовитости в нашей популяции, составленной на картах.

Чтобы изучить доказательства, подтверждающие теорию AP, мы сравнили результаты этого исследования с нашим более ранним исследованием, отображающим QTL, влияющим на продолжительность жизни спарившихся самцов и самок в одной и той же популяции RIL (Leips and Mackay 2002). Предыдущий эксперимент отличался от нынешнего тем, что измерения продолжительности жизни были выполнены на потомках от гибрида каждого RIL и инбредных родительских штаммов, Ore и 2b .Таким образом, аллельные эффекты QTL на продолжительность жизни были оценены в различных генетических фонах. Однако был только один случай, когда было показано, что QTL продолжительности жизни эпистатически взаимодействует в этом более раннем исследовании, и ни один из двух задействованных QTL не был идентифицирован как QTL плодовитости. Следовательно, сравнение аддитивных аллельных эффектов плодовитости QTL на продолжительность жизни с использованием этих двух исследований уместно для поиска доказательств, подтверждающих теорию AP. В то время как антагонистические отношения, предполагаемые AP, предположительно могут существовать между любым количеством черт, которые влияют на приспособленность в раннем возрасте и отрицательно коррелируют с долголетием (Leroi et al. 2005), одним из наиболее часто наблюдаемых компромиссов, поддерживающих теорию AP, является компромисс между плодовитостью в раннем возрасте и продолжительностью жизни (Rose and Charlesworth 1981; Rose 1991; Marden et al. 2003; Leroi et al. al. 2005). Применение этой теории к нашим исследованиям картирования QTL предсказало бы отрицательную корреляцию между плодовитостью в раннем возрасте и продолжительностью жизни среди RIL. На уровне QTL мы ожидаем, что QTL, влияющий на продолжительность жизни и плодовитость в раннем возрасте, должен колокализоваться и что аллельные эффекты в этих локусах должны иметь противоположные эффекты на эти два признака.Чтобы исследовать эти возможности, мы сначала вычислили корреляцию между средней продолжительностью жизни самцов и самок из нашего более раннего исследования с плодовитостью в раннем и позднем возрасте. Как предсказал AP, мы обнаружили значительную отрицательную корреляцию ( r = −0,43, P < 0,0001), но, что интересно, эта корреляция была между ранней плодовитостью самок и продолжительностью жизни самцов из RIL × Ore Пересекать. На уровне QTL оба QTL плодовитости в раннем возрасте совместно локализуются с QTL, влияя на продолжительность жизни, и аллели в этих локусах действительно имеют антагонистические эффекты.Как ни странно и в соответствии с корреляционным анализом, описанным выше, именно продолжительность жизни мужчин , а не женщин проявляет антагонистические аллельные эффекты с женской плодовитостью в раннем возрасте. В QTL на второй хромосоме аллель Ore увеличивает плодовитость на 0,78 яиц / день по сравнению с аллелем 2b , но сокращает продолжительность жизни самцов на 4 дня. Аллельные эффекты на QTL на третьей хромосоме аналогичны эффектам на QTL на второй; Аллель Ore увеличивает плодовитость в раннем возрасте на 0.74 яйца в день, но сокращает продолжительность жизни самцов на 5 дней. Таким образом, оказывается, что аллельные эффекты этих QTL могут проявлять половой антагонизм с аллелями, оказывающими благоприятное влияние на один пол, но пагубное влияние на другой. Сексуальный антагонизм в исследованиях QTL не является чем-то необычным (Nuzhdin et al. 1997; Leips and Mackay 2000; Vieira et al. 2000; Wayne et al. 2001), хотя он и не универсален (Curtsinger and Khazaeli 2002). Другое возможное объяснение заключается в том, что мужское долголетие генетически коррелирует с мужской плодовитостью (которая не измерялась) и, таким образом, указывает на положительную корреляцию между мужской и женской физической подготовкой.Здесь следует отметить, что аллельные эффекты в этих QTL потенциально представляют собой комбинированные эффекты многих генов в области QTL. Следовательно, фактические гены, которые вносят вклад в вариацию плодовитости, могут находиться в том же регионе, но отличаться от генов, влияющих на продолжительность жизни самцов. Только путем определения фактических локусов, лежащих в основе вариации этих признаков, можно решить эту проблему. Кроме того, взаимодействия генотипа с окружающей средой могут влиять на знак и величину аллельных эффектов QTL (Leips and Mackay 2000; Vieira et al. 2000), и вполне может быть, что при различных условиях окружающей среды будет очевиден компромисс между плодовитостью и продолжительностью жизни самок. Марден и др. . (2003) обнаружили именно такую ​​ситуацию при изучении комбинированного влияния мутации Indy на продолжительность жизни и плодовитость. Компромисс между этими характеристиками был очевиден только тогда, когда мухи выращивались на диете с ограничением калорий. Подтверждение степени, в которой конкретные аллели способствуют компромиссу между признаками, потребует, чтобы мы не только идентифицировали локусы, которые влияют на эти признаки, но также наблюдали аллельные эффекты на все признаки, затронутые в ряде экологически значимых сред.

От QTL к гену:

Идентификация QTL с возрастными эффектами на жизненные черты представляет собой первый из многих шагов к пониманию сложности генетической основы изменчивости этих черт. Идентификация фактических генов, которые вносят вклад в вариацию плодовитости, выявленную в этом исследовании, потребует мелкомасштабного картирования областей QTL с использованием скрещиваний с дефицитными штаммами и тестов комплементации с генами-кандидатами в уточненных областях QTL ( e.г. , Пасюкова и др. 2000). После того, как кандидаты определены, тестирование влияния естественной сегрегации вариаций на плодовитость может быть выполнено с помощью картографических исследований ассоциаций (, например, , De Luca et al. 2003). Области QTL, идентифицированные в этом исследовании, содержат много генов-кандидатов, которые участвуют в некоторых аспектах репродукции / оогенеза и могут вносить вклад в вариации в этом исследовании. Эти гены включают недочеренных , rho-6 , цуккини , kekkon-1 , vasa , cactus и kelch на второй хромосоме и rho-253 jaelstrom , . , бикоид , браконьерский и кальмар на третьей хромосоме.Поскольку существуют сотни генов в каждой из этих областей QTL, большая часть неизвестных функций, определение фактических локусов, вносящих вклад в вариацию плодовитости, потребует дополнительных усилий по картированию.

Одним из ограничений этого исследования, которое действительно является ограничением исследований QTL в целом, является то, что в наших линиях представлен только ограниченный образец генетического разнообразия. Кроме того, использованная популяция для картирования была получена из двух инбредных лабораторных штаммов, а не изолятов из естественной популяции.Таким образом, общность наших результатов должна быть проверена путем повторения этого исследования с независимыми линиями, идеально построенными из естественной популяции. Тот факт, что родительские штаммы не различались по плодовитости, но мы все еще могли картировать QTL в полученном из них RIL, не является необычным (, например, , Leips and Mackay 2000; Vieira et al. 2000). Эти результаты предполагают, что QTL с положительными и отрицательными эффектами на плодовитость, которые были зафиксированы для каждого родительского штамма, выявлялись, когда они появлялись в различных комбинациях в RIL.

Если предположить, что мы сможем использовать быстро развивающиеся технологические инструменты для идентификации и характеристики генетической архитектуры жизненных черт на молекулярно-генетическом уровне, многие вопросы останутся после того, как мы получим локусы. Например, учитывая генетические вариации в возрастном проявлении признака, является ли вариация результатом действия другого подмножества генов, воздействующих на признак в разном возрасте, или вариация возникает из-за различий во влиянии определенных аллелей в одном и том же возрасте. гены с возрастом? Модулируют ли физиологические изменения с возрастом аллельные эффекты на признаки (аналогично взаимодействиям между генотипом и средой)? И если да, то каковы соответствующие физиологические изменения, которые изменяют эти аллельные эффекты? Такие вопросы представляют собой некоторые из многих проблем, которые остаются в понимании генетической основы изменчивости жизненного цикла.

Благодарности

Мы благодарим Стефани Роллманн за вдумчивое обсуждение многих аспектов проекта и Кимберли Хьюз, Ташауну Феликс и двух анонимных рецензентов за их конструктивные комментарии к рукописи. Эта работа была поддержана грантом Национального научного фонда DEB-0349856 и грантом Национальной исследовательской службы США (NIH), грантом GM18818-03 для J.L. и грантом NIH GM45344 для T.F.C.M.

  • Получено 19 июля 2005 г.
  • Принято 19 октября 2005 г.
  • Авторские права © 2006 Американского генетического общества

Ссылки

  1. Айгаки Т. и С. Охба, 1984 Индивидуальный анализ возрастных изменений репродуктивной активности и продолжительности жизни Drosophila virilis. Exp. Геронтол. 19 : 13–23.

  2. Ayyadevara, S., R. Ayyadevara, A. Vertino, A. Galecki, J. J. Thaden et al. , 2003 Генетические локусы, модулирующие приспособленность и продолжительность жизни у Caenorhabditis elegans : картирование интервалов категориальных признаков у рекомбинантно-инбредных червей CL2a × Bergerac-BO.Генетика 163 : 557–570.

  3. Бартон, Н. Х. и П. Д. Кейтли, 2002 Понимание количественной генетической изменчивости. Nat. Преподобный Жене. 3 : 11–21.

  4. Бартон, Н. Х., и М. Турелли, 1989 г. Эволюционная количественная генетика: как мало мы знаем? Анну. Преподобный Жене. 23 : 337–370.

  5. Broekmans, F. J., M. J. Faddy, G. Scheffer и E. R. te Velde, 2004 Количество антральных фолликулов связано с возрастом естественной потери фертильности и возрастом наступления менопаузы.Менопауза 11 : 607–614.

  6. Чанг, К. Т., и К. Т. Мин, 2002 Регулирование продолжительности жизни с помощью гистондеацетилазы. Aging Res. Ред. 1 : 313–326.

  7. Charlesworth, B., 1994 Эволюция популяций с возрастной структурой. Cambridge University Press, Кембридж, Великобритания.

  8. Charlesworth, B., and K. A. Hughes, 1996 Возрастная инбридинговая депрессия и компоненты генетической изменчивости в связи с эволюцией старения.Proc. Natl. Акад. Sci. USA 93 : 6140–6145.

  9. Черчилль Г. А. и Р. В. Дёрге, 1994 Эмпирические пороговые значения для количественного картирования признаков. Генетика 138 : 963–971.

  10. Colosimo, P. F., K. E. Hosemann, S. Balabhadra, G. Villarreal, Jr., M. Dickson et al. , 2005 Широко распространенная параллельная эволюция колюшек путем многократной фиксации аллелей эктодисплазина. Наука 307 : 1928–1933.

  11. Curtsinger, J. W., and A. A. Khazaeli, 2002 Продолжительность жизни, QTL, возрастная специфичность и плейотропия у Drosophila. Мех. Aging Dev. 123 : 81–93.

  12. Де Лука М., Рошина Н.В., Гейгер-Торнсберри Г.Л., Лайман Р.Ф., Пасюкова Е.Г. и др. , 2003 Допа декарбоксилаза (Ddc) влияет на изменение продолжительности жизни дрозофилы. Nat. Genet. 34 : 429–433.

  13. Doerge, R.W., and G.A. Churchill, 1996 Перестановочные тесты для нескольких локусов, влияющих на количественный характер. Генетика 142 : 285–294.

  14. Дрневич, Дж. М., М. М. Риди, Э. А. Руеди, С. Родригес-Зас и К. А. Хьюз, 2004 г. Количественная эволюционная геномика: дифференциальная экспрессия генов и репродуктивный успех самцов у Drosophila melanogaster. Proc. Биол. Sci. 271 : 2267–2273.

  15. Engstrom, G., L.-E. Лильедаль, М.Расмусон и Т. Бьорклунд, 1989 Выражение генетических и экологических изменений во время старения. Теор. Прил. Genet. 77 : 119–122.

  16. Фанара, Дж. Дж., К. О. Робинсон, С. М. Роллманн, Р. Р. Анхольт и Т. Ф. Маккей, 2002 г. Ванасо - кандидатный ген количественного признака обонятельного поведения дрозофилы. Генетика 162 : 1321–1328.

  17. Федорка, К. М., М. Зук и Т. А. Муссо, 2004 Подавление иммунитета и стоимость воспроизводства наземного сверчка, Allonemobius socius.Эволюция 58 : 2478–2485.

  18. Fiumera, A.C., B. L. Dumont и A. G. Clark, 2005 Конкурентоспособность сперматозоидов у Drosophila melanogaster связана с вариациями в мужских репродуктивных белках. Генетика 169 : 243–257.

  19. Фокс, К. В., М. Л. Буш, Д. А. Рофф и В. Г. Валлин, 2004 г. Эволюционная генетика продолжительности жизни и показателей смертности в двух популяциях жука-семени, Callosobruchus maculatus.Наследственность 92 : 170–181.

  20. Фрай, Дж. Д., С. В. Нуждин, Е. Г. Пасюкова и Т. Ф. Маккей, 1998 QTL-картирование взаимодействия генотип-среда для приспособленности у Drosophila melanogaster. Genet. Res. 71 : 133–141.

  21. Гассер, М., М. Кайзер, Д. Берриган и С. С. Стернс, 2000 г. История жизни коррелятов эволюции при высокой и низкой смертности взрослых. Эволюция 54 : 1260–1272.

  22. Гейгер-Торнсберри, Г.L., and T. F. Mackay, 2004 Локусы количественных признаков, влияющие на естественную изменчивость долголетия дрозофилы. Мех. Aging Dev. 125 : 179–189.

  23. Gurganus, M. C., S. V. Nuzhdin, J. W. Leips, T. F. Mackay, 1999 Картирование с высоким разрешением локусов количественных признаков для количества стерноплевральных щетинок у Drosophila melanogaster. Генетика 152 : 1585–1604.

  24. Gustafsson, L., D. Nordling, M. S.Андерссон, Б. С. Шелдон и А. Кварнстрем, 1994 Инфекционные болезни, репродуктивное усилие и стоимость воспроизводства у птиц. Филос. Пер. R. Soc. Лондон. B Biol. Sci. 346 : 323–331.

  25. Halaschek-Wiener, J., J. S. Khattra, S. McKay, A. Pouzyrev, J. M. Stott et al. , 2005 Анализ долгоживущих мутантов daf-2 C. elegans с использованием серийного анализа экспрессии генов. Genome Res. 15 : 603–615.

  26. Harbison, S.Т., А. Х. Ямамото, Дж. Дж. Фанара, К. К. Норга и Т. Ф. Маккей, 2004 Локусы количественных признаков, влияющие на устойчивость к голоданию у Drosophila melanogaster. Генетика 166 : 1807–1823.

  27. Хард, Дж. Дж., У. Э. Брэдшоу и К. М. Хольцапфель, 1993 Генетическая основа фотопериодизма и его эволюционное расхождение среди популяций кувшинного комара, Wyeomyia smithii. Am. Nat. 142 : 457–473.

  28. Харшман, Л.G., and A.A. Hoffmann, 2000 Лабораторные селекционные эксперименты с использованием дрозофилы: что они на самом деле говорят нам? Trends Ecol. Evol. 15 : 32–36.

  29. Houle, D., 1992 Сравнение эволюционируемости и изменчивости количественных признаков. Генетика 130 : 195–204.

  30. Houle, D., K. A. Hughes, D. K. Hoffmaster, J. Ihara, S. Assimacopoulos et al. , 1994 Влияние спонтанной мутации на количественные признаки.I. Вариации и ковариации жизненных черт. Генетика 138 : 773–785.

  31. Hsin, H., and C. Kenyon, 1999 Сигналы репродуктивной системы регулируют продолжительность жизни C. elegans. Nature 399 : 362–366.

  32. Hughes, K. A., 1995 Эволюционная генетика мужских признаков жизненного цикла у Drosophila melanogaster. Эволюция 49 : 521–537.

  33. Хьюз, К.А. и Б. Чарльзуорт, 1994 Генетический анализ старения у дрозофилы. Природа 367 : 64–66.

  34. Хьюз, К. А. и Р. М. Рейнольдс, 2004 Эволюционные и механистические теории старения. Анну. Преподобный Энтомол. 50 : 421–445.

  35. Хьюз, К. А., Дж. А. Алипаз, Дж. М. Дрневич и Р. М. Рейнольдс, 2002 г. Проверка эволюционных теорий старения. Proc. Natl. Акад. Sci. USA 99 : 14286–14291.

  36. Исса, Дж.П., 2003 Возрастные эпигенетические изменения и иммунная система. Clin. Иммунол. 109 : 103–108.

  37. Джексон, А. У., А. Т. Галецки, Д. Т. Берк и Р. А. Миллер, 2003 Генетические полиморфизмы в генах мышей, регулирующих возрастные и устойчивые к возрасту субпопуляции Т-клеток. Genes Immun. 4 : 30–39.

  38. Jaenisch, R., and A. Bird, 2003 Эпигенетическая регуляция экспрессии генов: как геном объединяет внутренние и внешние сигналы.Nat. Genet. 33 (Дополнение): 245–254.

  39. Джин, В., Р. М. Райли, Р. Д. Вольфингер, К. П. Уайт, Г. Пассадор-Гургель, и др. , 2001 Вклад пола, генотипа и возраста в вариабельность транскрипции у Drosophila melanogaster. Nat. Genet. 29 : 389–395.

  40. Жувентин П. и Ф. С. Добсон, 2002 г. Почему разводят животных раз в два года? Случай с альбатросами. Proc. R. Soc. Лондон. B Biol. Sci. 269 ​​: 1955–1961.

  41. Кеберлейн, М., К. Т. Киркланд, С. Филдс и Б. К. Кеннеди, 2005 Гены, определяющие продолжительность репликативной жизни дрожжей на долгоживущем генетическом фоне. Мех. Aging Dev. 126 : 491–504.

  42. Као, К. Х., З. Б. Зенг, 2002 Моделирование эпистаза локусов количественных признаков с использованием модели Кокерхема. Генетика 160 : 1243–1261.

  43. Као, К. Х., З. Б. Зенг и Р. Д. Тисдейл, 1999 Множественное интервальное картирование для локусов количественных признаков.Генетика 152 : 1203–1216.

  44. Кеньон, К., Дж. Чанг, Э. Генш, А. Руднер и Р. Табтианг, 1993 г. Мутант C. elegans, который живет вдвое дольше, чем дикий тип. Nature 366 : 461–464.

  45. Khazaeli, A. A., W. Van Voorhies и J. W. Curtsinger, 2005 Долголетие и метаболизм у Drosophila melanogaster : генетические корреляции между продолжительностью жизни и возрастной скоростью метаболизма в популяциях, искусственно отобранных для долгой жизни.Генетика 169 : 231–242.

  46. Ким, С. Н., Дж. Х. Ри, Ю. Х. Сонг, Д. Ю. Парк, М. Хван, и др. , 2005 Возрастные изменения экспрессии генов в голове дрозофилы. Neurobiol. Старение 26 : 1083–1091.

  47. Найт, К. Г., Р. Б. Азеведо и А. М. Леруа, 2001 г. Проверка плейотропии жизненного цикла у Caenorhabditis elegans. Эволюция 55 : 1795–1804.

  48. Косуда, К., 1985 Влияние старения на брачную активность самцов Drosophila melanogaster. Behav. Genet. 15 : 297–303.

  49. Круук, Л. Э., Т. Х. Клаттон-Брок, Дж. Слейт, Дж. М. Пембертон, С. Brotherstone и др. , 2000 Наследственность приспособленности в популяции диких млекопитающих. Proc. Natl. Акад. Sci. USA 97 : 698–703.

  50. Лейпс, Дж. И Т. Ф. Маккей, 2000 Локусы количественных признаков для продолжительности жизни у Drosophila melanogaster : взаимодействие с генетическим фоном и плотностью личинок.Генетика 155 : 1773–1788.

  51. Лейпс, Дж. И Т. Ф. Маккей, 2002 Сложная генетическая архитектура продолжительности жизни дрозофилы. Exp. Aging Res. 28 : 361–390.

  52. Лейпс, Дж., Дж. Трэвис и Ф. Х. Родд, 2000 г. Генетическое влияние на динамику экспериментальной популяции наименьшего киллифа. Ecol. Monogr. 70 : 289–309.

  53. Леруа, А. М., А. Бартке, Г. Де Бенедиктис, К.Франчески, А. Гартнер и др. , 2005 Какие существуют доказательства существования отдельных генов с антагонистическими плейотропными эффектами? Мех. Aging Dev. 126 : 421–429.

  54. Lin, J. Z., 2000 Взаимосвязь между локусами системы спаривания и характеристиками, связанными с приспособленностью, у Mimulus (Scrophulariaceae): тест на вредоносную плейотропию QTL с большими эффектами. Геном 43 : 628–633.

  55. Линь Ю.J., L. Seroude и S. Benzer, 1998 г. Увеличенная продолжительность жизни и стрессоустойчивость у мутантных Drosophila methuselah. Наука 282 : 943–946.

  56. Линдсли, Д. Л. и Г. Г. Зимм, 1992 г. Геном Drosophila melanogaster. Academic Press, Сан-Диего.

  57. Литтел Р. К., У. У. Строуп и Р. Дж. Фройнд, 2002 SAS для линейных моделей. Институт SAS, Кэри, Северная Каролина.

  58. Лонг, А.D., S. L. Mullaney, L. A. Reid, J. D. Fry, C.H. Langley et al. , 1995 Картирование с высоким разрешением генетических факторов, влияющих на количество брюшной щетины у Drosophila melanogaster. Генетика 139 : 1273–1291.

  59. Линч М. и Б. Уолш, 1998 Генетика и анализ количественных признаков. Sinauer Associates, Сандерленд, Массачусетс.

  60. Мак, П. Д., В. К. Лестер и Д. Е. Промислоу, 2000 г. Возрастные эффекты новых мутаций у Drosophila melanogaster.II. Плодовитость и способность к спариванию самцов. Genetica 110 : 31–41.

  61. Маккей Т. Ф., 2001 Генетическая архитектура количественных признаков. Анну. Преподобный Жене. 35 : 303–339.

  62. Mackay, TFC, Н.В. Рошина, JW Leips и EG Pasyukova, 2005 Сложная генетическая архитектура долголетия дрозофил, стр. 181–216 в Справочник по биологии старения , под редакцией EJ Masoro и SN Austad .Эльзевир, Оксфорд.

  63. Марден, Дж. Х., Б. Рогина, К. Л. Монтут и С. Л. Хельфанд, 2003 г. Условный компромисс между старением и жизнедеятельностью долгоживущих мутантных мух Indy. Proc. Natl. Акад. Sci. USA 100 : 3369–3373.

  64. McCarroll, S. A., C. T. Murphy, S. Zou, S. D. Pletcher, C. S. Chin et al. , 2004 Сравнение паттернов геномной экспрессии у разных видов позволяет определить общий транскрипционный профиль при старении.Nat. Genet. 36 : 197–204.

  65. Медавар, П. Б., 1952 Нерешенная проблема биологии. Х. К. Льюис, Лондон.

  66. Moehring, A. J., and T. F. Mackay, 2004 Количественная генетическая основа брачного поведения самцов у Drosophila melanogaster. Генетика 167 : 1249–1263.

  67. Муссо Т.А. и Д.А. Рофф, 1987 г. Естественный отбор и наследуемость компонентов приспособленности.Наследственность 59 (Pt. 2): 181–197.

  68. Nguyen, T. T., N. Klueva, V. Chamareck, A. Aarti, G. Magpantay et al. , 2004 Картирование насыщенности областей QTL и идентификация предполагаемых генов-кандидатов на устойчивость к засухе у риса. Мол. Genet. Геномика 272 : 35–46.

  69. Николс, С. М., Б. Д. Бавистер, К. А. Бреннер, П. Дж. Дидье, Р. М. Харрисон, и др. , 2005 Старение яичников у макаки резус (Macaca mulatta).Гм. Репрод. 20 : 79–83.

  70. Новосельцев В. Н., Аркинг Р., Кери Дж. Р., Новосельцева Ю. А., Яшин А. И., 2004 Как выглядит индивидуальный паттерн плодовитости у дрозофилы и средиземноморских мух. Аня. NY Acad. Sci. 1019 : 577–580.

  71. Nunney, L., 1996 Ответ на отбор для быстрого развития личинок у Drosophila melanogaster и его влияние на вес взрослых особей: пример компромисса в пригодности.Эволюция 50 : 1193–1204.

  72. Нуждин С.В., Пасюкова Е.Г., Дильда К.Л., З-Б. Зенг и Т. Ф. Маккей, 1997 Локусы специфичных для пола количественных признаков, влияющих на продолжительность жизни у Drosophila melanogaster. Proc. Natl. Акад. Sci. США 94 : 9734–9739.

  73. Нуждин, С. В., А. Хазаэли, Дж. Куртсингер, 2005 Анализ выживаемости локусов количественных признаков продолжительности жизни в Drosophila melanogaster. Генетика 170 : 719–731.

  74. Оксанен, Т. А., Э. Коскела и Т. Маппес, 2002 Гормональные манипуляции с числом потомства: материнские усилия и репродуктивные издержки. Evolution Int. J. Org. Эволюция 56 : 1530–1537.

  75. Оттингер, М. А., М. Абдельнаби, К. Ли, К. Чен, Н. Томпсон и др. , 2004 Японский перепел: модель для изучения репродуктивного старения гипоталамической системы. Exp. Геронтол. 39 : 1679–1693.

  76. Палссон, А.и G. Gibson, 2004 Ассоциация между нуклеотидной изменчивостью Egfr и формой крыла у Drosophila melanogaster. Генетика 167 : 1187–1198.

  77. Партридж, Л. и Н. Х. Бартон, 1993 Оптимальность, мутации и эволюция старения. Nature 362 : 305–311.

  78. Партридж, Л., К. Фаулер, С. Тревитт и У. Шарп, 1986 Исследование влияния самцов на выживаемость и скорость яйценоскости самок Drosophila melanogaster. J. Insect Physiol. 32 : 925–929.

  79. Пасюкова Е.Г., Нуждин С.В., 1993 Нестабильность Doc и copia в изогенном подвое Drosophila melanogaster. Мол. Genet Genet. 240 : 302–306.

  80. Пасюкова, Э. Г., К. Виейра, Т. Ф. Маккей, 2000 г. Картирование дефицита локусов количественных признаков, влияющих на продолжительность жизни, у Drosophila melanogaster. Генетика 156 : 1129–1146.

  81. Пасюкова, Е.Г., Н. В. Рошина и Т. Ф. Маккей, 2004 г. Шаттл: ген-кандидат количественного признака продолжительности жизни дрозофилы. Ячейка старения 3 : 297–307.

  82. Перипато, А. К., Р. А. Де Брито, С. Р. Матиоли, Л. С. Плетчер, Т. Т. Вон, и др. , 2004 Эпистаз, влияющий на размер помета у мышей. J. Evol. Биол. 17 : 593–602.

  83. Picard, F., M. Kurtev, N. Chung, A. Topark-Ngarm, T. Senawong et al., 2004 Sirt1 способствует мобилизации жира в белых адипоцитах, подавляя PPAR-гамма. Nature 429 : 771–776.

  84. Pletcher, S. D., D. Houle и J. W. Curtsinger, 1998 Возрастные свойства спонтанных мутаций, влияющих на смертность у Drosophila melanogaster. Генетика 148 : 287–303.

  85. Плетчер, С. Д., Д. Хоул и Дж. У. Куртсингер, 1999 Эволюция возрастных показателей смертности у Drosophila melanogaster : генетическая дивергенция среди невыбранных линий.Генетика 153 : 813–823.

  86. Pletcher, S. D., S. J. Macdonald, R. Marguerie, U. Certa, S. C. Stearns et al. , 2002 Полногеномные профили транскриптов у стареющих и ограниченных калориями Drosophila melanogaster. Curr. Биол. 12 : 712–723.

  87. Промислоу, Д. Э., М. Татар, А. А. Хазаэли и Дж. У. Куртсингер, 1996 Возрастные паттерны генетической изменчивости у Drosophila melanogaster. И.Смертность. Генетика 143 : 839–848.

  88. Раузер, К. Л., Л. Д. Мюллер и М. Р. Роуз, 2003 г. Старение, плодородие и бессмертие. Exp. Геронтол. 38 : 27–33.

  89. Ricklefs, R.E., A. Scheuerlein и A. Cohen, 2003 Возрастные закономерности фертильности у содержащихся в неволе популяций птиц и млекопитающих. Exp. Геронтол. 38 : 741–745.

  90. Робертсон А., 1959 Выборочная дисперсия коэффициента генетической корреляции.Биометрия 15 : 469–485.

  91. Робертсон, Ф. У., 1957 Исследования в области количественного наследования. XI. Генетическая и экологическая корреляция между размером тела и продуктивностью яиц у Drosophila melanogaster. J. Genet. 55 : 428–443.

  92. Rogina, B., and S. L. Helfand, 2004 Sir2 обеспечивает долголетие у мухи посредством пути, связанного с ограничением калорийности. Proc. Natl. Акад. Sci. USA 101 : 15998–16003.

  93. Rogina, B., J. W. Vaupel, L. Partridge и S. L. Helfand, 1998 Регуляция экспрессии генов сохраняется у стареющих Drosophila melanogaster. Curr. Биол. 8 : 475–478.

  94. Рогина, Б., С. Л. Хельфанд и С. Франкель, 2002 Регулирование продолжительности жизни с помощью деацетилазы Rpd3 дрозофилы и ограничение калорийности. Science 298: 1745.

  95. Ронг, Ю.С., С.В. Титен, Х. Б. Се, М.M. Golic, M. Bastiani et al. , 2002 Направленный мутагенез путем гомологичной рекомбинации у D. melanogaster. Genes Dev. 16 : 1568–1581.

  96. Rose, M. R., 1984 Лабораторная эволюция отложенного старения у Drosophila melanogaster. Evolution 38 : 1004–1010.

  97. Роуз М. Р., 1991 Эволюционная биология старения. Oxford University Press, Нью-Йорк.

  98. Роуз, М.R., and B. Charlesworth, 1981 Генетика истории жизни Drosophila melanogaster. II. Эксперименты по исследовательскому отбору. Генетика 97 : 187–196.

  99. Seroude, L., T. Brummel, P. Kapahi and S. Benzer, 2002 Пространственно-временной анализ экспрессии генов во время старения у Drosophila melanogaster. Ячейка старения 1 : 47–56.

  100. Service, P. M., 2000 Генетическая структура женского анамнеза D.melanogaster: сравнение популяций. Genet. Res. 75 : 153–166.

  101. Шоу, Р. Г., Г. А. Платенкамп, Ф. Х. Шоу и Р. Х. Подольски, 1995 Количественная генетика реакции на конкурентов у Nemophila menziesii : полевой эксперимент. Генетика 139 : 397–406.

  102. Шук Д. Р. и Т. Э. Джонсон, 1999 Локусы количественных признаков, влияющие на выживаемость и связанные с фертильностью черты у Caenorhabditis elegans , демонстрируют взаимодействия генотипа окружающей среды, плейотропию и эпистаз.Генетика 153 : 1233–1243.

  103. Skoracka, A., and L. Kuczynski, 2004 Демография ржавого клеща зерновых Abacarus hystrix (Acari: Eriophyoidea) на траве кряквы. Exp. Прил. Акарол. 32 : 231–242.

  104. Slate, J., P. M. Visscher, S. MacGregor, D. Stevens, M. L. Tate et al. , 2002 Сканирование генома на предмет локусов количественных признаков в дикой популяции благородного оленя ( Cervus elaphus ). Генетика 162 : 1863–1873.

  105. Сноук, М. С. и Д. Е. Л. Промислоу, 2003 г. Количественные генетические тесты недавней теории старения: возрастная смертность и мужская фертильность у Drosophila melanogaster. Наследственность 91 : 546–556.

  106. Sommer, S. и P. B. Pearman, 2003 Количественный генетический анализ особенностей жизненного цикла личинок в двух альпийских популяциях Rana temporaria. Genetica 118 : 1–10.

  107. Стернс, С.C., 1992 Эволюция историй жизни. Oxford University Press, Оксфорд.

  108. Steinmetz, L. M., H. Sinha, D. R. Richards, J. I. Spiegelman, P. J. Oefner et al. , 2002 Рассмотрение архитектуры локуса количественных признаков у дрожжей. Природа 416 : 326–330.

  109. Сан, Дж., Д. Фолк, Т. Дж. Брэдли и Дж. Тауэр, 2002 Индуцированная сверхэкспрессия митохондриальной Mn-супероксиддисмутазы увеличивает продолжительность жизни взрослых особей Drosophila melanogaster. Генетика 161 : 661–672.

  110. Sun, S., C. T. Ting and C.-I Wu, 2004 Нормальная функция гена видообразования Odysseus и его гибридный эффект стерильности. Наука 305 : 81–83.

  111. Тантави, А.О., и Ф.А. Рака, 1964 г. Исследования природных популяций дрозофилы. IV. Генетические вариации и корреляции между четырьмя признаками у D. melanogaster и D. simulans. Генетика 50 : 1349–1355.

  112. Татар, М. и Д. Э. Промислоу, 1997 г. Затраты на репродуктивную функцию самок. Эволюция 51 : 1323–1326.

  113. Tatar, M., D. E. Promislow, A. A. Khazaeli и J. W. Curtsinger, 1996 Возрастные закономерности генетической изменчивости у Drosophila melanogaster. II. Плодовитость и ее генетическая ковариация с возрастной смертностью. Генетика 143 : 849–858.

  114. Татарский, М., А. Копельман, Д. Эпштейн, М. П. Ту, К. М. Инь и др. , 2001 Мутантный гомолог рецептора инсулина дрозофилы, который увеличивает продолжительность жизни и нарушает нейроэндокринную функцию. Наука 292 : 107–110.

  115. Тиссенбаум, Х.А., и Л. Гуаренте, 2002 Модельные организмы как руководство по старению млекопитающих. Dev. Ячейка 2 : 9–19.

  116. Tu, M. P., D. Epstein and M. Tatar, 2002 Демография медленного старения у самцов и самок дрозофил, мутантных по гомологу субстрата инсулиновых рецепторов chico.Ячейка старения 1 : 75–80.

  117. Турелли М. и Н. Х. Бартон, 2004 Полигенная изменчивость, поддерживаемая балансирующим отбором: плейотропия, полозависимые аллельные эффекты и взаимодействия G × E . Генетика 166 : 1053–1079.

  118. Ungerer, M. C., and L. H. Rieseberg, 2003 Генетическая архитектура реакции отбора у Arabidopsis thaliana. Evolution Int. J. Org. Эволюция 57 : 2531–2539.

  119. Валенсуэла, Р. К., С. Н. Форбс, П. Кейм и П. М. Сервис, 2004 Локусы количественных признаков, влияющие на продолжительность жизни в реплицированных популяциях Drosophila melanogaster. II. Ответ на выбор. Генетика 168 : 313–324.

  120. Верхувен, К. Дж., Т. К. Ванхала, А. Биэр, Э. Нево и Дж. М. ван Дамм, 2004 Генетическая основа адаптивной дифференциации популяции: количественный анализ локуса признаков приспособленности в двух популяциях дикого ячменя из контрастирующих среды обитания.Evolution Int. J. Org. Эволюция 58 : 270–283.

  121. Vieira, C., E.G. Pasyukova, Z. B. Zeng, J. B. Hackett, R.F. Lyman et al. , 2000 Взаимодействие генотипа и окружающей среды для локусов количественных признаков, влияющих на продолжительность жизни у Drosophila melanogaster. Генетика 154 : 213–227.

  122. Уэйн, М. Л., и Л. М. Макинтайр, 2002 г. Сочетание картирования и систематизации: подход к идентификации генов-кандидатов.Proc. Natl. Акад. Sci. USA 99 : 14903–14906.

  123. Wayne, M. L., J. B. Hackett, C. L. Dilda, S. V. Nuzhdin, E.G. Pasyukova et al. , 2001 Количественное картирование локусов признаков фитнес-связанных признаков у Drosophila melanogaster. Genet. Res. 77 : 107–116.

  124. Weindruch, R., T. Kayo, C.K. Lee и T.A. Prolla, 2001 Микроматричный профили экспрессии генов при старении и ее изменения путем ограничения калорийности у мышей.J. Nutr. 131 : 918S – 923S.

  125. Weinig, C., L.A. Dorn, N.C. Kane, Z.M German, S. S. Halldorsdottir et al. , 2003 Гетерогенный отбор по определенным локусам в естественной среде у Arabidopsis thaliana. Генетика 165 : 321–329.

  126. Уильямс, Г. К., 1957 Плейотропия, естественный отбор и эволюция старения. Эволюция 11 : 398–411.

  127. Виндиг, Дж.J., R. F. Veerkamp и S. Nylin, 2004 Количественная генетическая изменчивость в островной популяции крапчатой ​​древесной бабочки (Pararge aegeria). Наследственность 93 : 450–454.

  128. Ямпольский, Л., Л. Э. Пирс и Д. Э. Промислоу, 2000 Возрастные эффекты новых мутаций у Drosophila melanogaster. I. Смертность. Genetica 110 : 11–29.

  129. Zeng, Z-B., 1994 Прецизионное картирование локусов количественных признаков. Генетика 136 : 1457–1468.

  130. Чжун, Д., А. Пай и Г. Ян, 2005 г. Дорогостоящая устойчивость к паразитизму: данные одновременного количественного картирования локусов признаков устойчивости и приспособленности у Tribolium castaneum. Генетика 169 : 2127–2135.

  131. Zwaan, B.J., R. Bijlsma и R.F. Hoekstra, 1995 Искусственный отбор на время развития у Drosophila melanogaster в отношении старения: прямые и коррелированные реакции.Эволюция 49 : 635–648.

bayanebartar - لتس ، موزشگاه و مون لتس ، IELTS

منشور اخلاقی و انضباطی موسسه فرهنگی آموزشی (ВИП)
موسسه فرهنگی آموزشی بیان برتر با توجه به اهمیت دوره های آموزشی خود, عدم رعایت مسائل انضباطی و مقررات آموزشی را باعث ایجاد بی نظمی و پایین آمدن بازدهی کلاس می داند که در نتیجه منجر به عدم بهره گیری کافی زبان آموزان می شود. لذا آیین نامه انضباطی این مرکز جهت اطلاع رسانی در اختیار دانشجویان قرار خواهد گرفت که رعایت تمامی موارد آن برای داوطلبین عزیز الزامی است و در صورت عدم رعایت, موسسه محق خواهد بود بدون هیچ توضیحی و بدون برگشت هیچ وجهی, زبان آموز خاطی را از ادامه شرکت در کلاس ها منع کند.

1. یک آزمون آزمایشی آیلتس (ماک) رایگان برای هر دانشجو دوره سامیت در نظر گرفته شده که موظف هستند آزمون را بعد از اتمام دوره در تاریخ های معین شده ثبت نام نمایند و بدیهی است خارج از این تاریخ ها آزمون رایگان منقضی خواهد شد و ر فرد ملزم به پرداخت هزینه برای ثبت نام آزمون می باشد.
2.رعایت ادب و احترام نسبت به مدیر, اساتید و دیگر کارکنان دوره های آموزشی
3.سعی شایسته در یادگیری, تحصیل و اطاعت از دستورهای آموزشی و تربیتی
4.رعایت موازین اخلاقی, حفظ حجاب و شئونات اسلامی, حضور به موقع در محل برگزاری لاس ها و روج آن در ایان ساعت در ایان ساعت موزشی ، رهیز از تجمع در راهروها و محیط در راهروها و محیط در راهروها و محیط در راهروها و محیط مقالبلساخروا و محیط مقالبلساخرتم البلن, 9ارتما, 9ت حفظ انضباط موزشی موسسه ، غیبت بیش از سه جلسه در کلاس ها بدون هماهنگی به معنای انصراف از حضور دور دود دور دور در ب ا
6.پنج دقیقه بل از شروع لاس ا داوطلب ملزم به حضور در محل تشکیل لاس ها می باشد. (از آوردن مراه هنگام تشکیل کلاس های درسی جداً خودداری فرمایید).
7.تسویه حساب مالی داوطلبان می بایست قبل از روع اولین جلسه کلاس به صورت امل انجام شود. در غیراین ورت موسسه جهت منع حضور داوطلب در لاسها ، محق و مختار واهد بود. تبصره: درصورت وجود رایط خاص پرداخت برای زبان آموز ، نحوه پرداخت در قبض رسید دج می گردد.

Условий: مدارک و ریه دریافتی تحت هیچ رایطی مسترد نمی گردد.
تبصره 1: درصورت انصراف زبان آموز به هردلیل پس از ثبت نام, بیش از 14 روز کاری مانده تا شروع کلاس 10 درصد, 10 الی 14 روز کاری مانده تا شروع کلاس 20 درصد, کمتر از 10 روز کاری مانده تا شروع کلاس پس از سر 30 درصد از ل ریه ، مابقی ریه عودت داده میشود و س از روع لاس ا تحت هیچ رایطی ریه رداخنی عودتتت ودت. تبصره 2: در راستای احترام به عقاید زبان آموزان, چنانچه بیش از 50 درصد زبان آموزان به استناد فرم نظرسنجی موسسه فقط تا جلسه سوم برگزاری کلاس, نسبت به نحوه تدریس مدرس دوره معترض باشند, موسسه متعهد میگردد بلافاصله نسبت به تعویض مدرس اقدام نماید.بدیهی است درخواست پس از نظرسنجی جلسه سوم منجر به تعویض استاد نخواهد شد. تبصره 3: تشکیل حتی یک لسه از یک درس در هرکلاس ، حتی بدون حضور زبان موز به منزله روع لاس ا می.
تبصره 4: انتقال نه کلاس هر دلیل و مشکلی از سمت زبان آموز به ترم یا ترم های آتی امکان ر نم.
8.مسئولیت کلیه حوادث و مشکلات کاری, شغلی و خانوادگی زبان آموز, مشکلات پزشکی و بستری های بیمارستانی, پس از شروع کلاس ها صرفا متوجه زبان آموز بوده و موسسه با توجه به عدم امکان جایگزینی در کلاس شروع شده, هیچ گونه تعهدی در ارتباط با عودت وجه و ا حتی جابجایی کلاس زبان آموز نخواهد داشت.
9.

چنانچه دانشجو بدون مشورت و صلاحدید مشاورین اقدام به ثبت نام آنلاین درتمامی دوره ها کند, هرگونه مسئولیتی از موسسه سلب و به عهده ی دانشجو خواهد بود

404 Файл не найден - MURAL

  • Дом
  • О
  • Просматривать
    • Просмотр по Год
    • Просмотр по Академический блок
    • Просмотр по Автор
  • регистр
  • eTheses
  • Статистика
  • Библиотека MU
  • Политика репозитория
  • Libguide
  • Авторизоваться

Не удалось найти файл: /6418/1 / ciaran_pollard_thesis_final_document.pdf

Файл, к которому вы пытаетесь получить доступ, может быть связан с этим элементом:

Поллард, Кьяран П. (2015) Температурно-зависимая модель развития видов ивовых жуков (Coleoptera: Chrysomelidae) в Ирландии: моделирование фенологии / вольтинизма в ответ на изменение климата. Кандидатская диссертация, Национальный университет Ирландии Мэйнут.

Если вы перешли на эту страницу, перейдя по ссылке в репозитории, пожалуйста, свяжитесь с администрацией MURAL - Библиотеки исследовательского архива Университета Мейнута.В противном случае убедитесь, что вы правильно ввели URL-адрес, или свяжитесь с человеком или сайтом, которые предоставили вам этот URL-адрес.

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *