Vk ns: This browser is no longer supported.

Вопрос Каковы безопасность, переносимость и эффективность вилтоларсена у мальчиков с мышечной дистрофией Дюшенна (МДД), поддающихся пропуску экзона 53?

Выводы Результаты этого 4-недельного рандомизированного клинического исследования безопасности с последующим 20-недельным открытым периодом лечения у 16 ​​пациентов с МДД показали значительную лекарственную продукцию дистрофина в обеих группах вилтоларсена (40 мг / кг в неделю и 80 мг / кг. неделя) после 20-24 недель лечения.Проведенные по времени функциональные тесты подтвердили клиническое улучшение, связанное с лечением, и вилтоларсен хорошо переносился.

Значение Вилтоларсен может предоставить новый терапевтический вариант для пациентов с МДД, подверженных пропуску экзона 53.

Важность Остается неудовлетворенной потребность в безопасных и эффективных методах лечения мышечной дистрофии Дюшенна (МДД). На сегодняшний день доступно ограниченное количество средств, устраняющих основную причину заболевания.

Объектив Оценить безопасность, переносимость и эффективность вилтоларсена, нового антисмыслового олигонуклеотида, у пациентов с МДД, подверженных пропуску экзона 53.

Дизайн, обстановка и участники Это исследование фазы 2 представляло собой 4-недельное рандомизированное клиническое испытание на безопасность, за которым последовал 20-недельный открытый период лечения пациентов с МДД в ​​возрасте от 4 до 9 лет с пропуском экзона 53. Чтобы набрать 16 участников, по 8 участников в каждой из двух дозовых когорт, 17 участников были отобраны.Набор в исследование произошел в период с 16 декабря 2016 г. по 17 августа 2017 г. на сайтах в США и Канаде. Данные собирались с декабря 2016 года по февраль 2018 года, а данные анализировались с апреля 2018 года по май 2019 года.

Вмешательства Участники получали 40 мг / кг (низкая доза) или 80 мг / кг (высокая доза) вилтоларсена в виде еженедельной внутривенной инфузии.

Основные результаты и мероприятия Основные результаты исследования включали безопасность, переносимость и выработку белка дистрофина de novo, измеренную с помощью вестерн-блоттинга в мышцах двуглавой мышцы участников.Вторичные результаты включали дополнительную оценку мРНК дистрофина и продукции белка, а также клинической силы и функции мышц.

Результаты Из 16 включенных мальчиков с МДД 15 (94%) были белыми, а средний возраст (СО) составлял 7,4 (1,8) года. После 20–24 недель лечения в обеих группах доз вилтоларсена наблюдалась значительная продукция дистрофина, вызванная лекарственными средствами (40 мг / кг в неделю: среднее [диапазон] 5,7% [3,2-10,3] нормы; 80 мг / кг в неделю: среднее [диапазон] 5.9% [1,1-14,4] нормы). Вилтоларсен хорошо переносился; побочных эффектов, возникших в связи с лечением, не потребовалось снижения дозы, прерывания или отмены исследуемого препарата. Во время исследования серьезных нежелательных явлений или летальных исходов не было. По сравнению с 65 контрольными группами, подобранными по возрасту и лечению, у всех 16 участников, получавших вилтоларсен, были выявлены значительные улучшения во временных функциональных тестах по сравнению с исходным уровнем, включая время нахождения в положении лежа на спине (вилтоларсен: -0,19 с; контроль: 0,66 с), время бегать / ходить 10 м (вилтоларсен: 0.23 м / с; контроль: -0,04 м / с) и тест 6-минутной ходьбы (вилтоларсен: 28,9 м; контроль: -65,3 м) при посещении на 25 неделе.

Выводы и актуальность Наблюдалось системное лечение участников с МДД с помощью вилтоларсена, индуцированного выработкой дистрофина de novo, и клиническое улучшение временных функциональных тестов.

Регистрация пробной версии Идентификатор ClinicalTrials.gov: NCT02740972

Мышечная дистрофия Дюшенна (МДД) — это Х-сцепленное заболевание, поражающее примерно 1 из 3500-5000 живорожденных мальчиков. ^{1 -3} Прогрессирующая слабость и дегенерация скелетных мышц вызваны отсутствием функционального белка дистрофина, вторичным по отношению к вариантам с потерей функции в гене DMD. ^{1 , 4} Пациенты с МДД обычно имеют уровень дистрофина менее 3% от нормы. ⁵ Дефицит дистрофина при МДД приводит к прогрессирующей инвалидности и ранней смерти из-за дыхательной недостаточности и сердечной дисфункции. ^{1 , 6} Пациенты с мышечной дистрофией Беккера (МПК) демонстрируют делеции в рамке считывания при МДД, которые позволяют продуцировать частично функциональный усеченный дистрофин с более поздним началом, меньшей тяжестью и более медленным прогрессированием заболевания по сравнению с пациентами с МДД. ⁷

Современные методы лечения МДД в ​​основном назначаются для снятия симптомов. ^{6 , 8} Терапия с пропуском экзонов может частично восстановить уровни функционального дистрофина. ⁹ В этом подходе используются антисмысловые олигонуклеотиды для изменения сплайсинга РНК путем принудительного исключения экзона, соседнего с вариантом DMD. ⁹ Это преобразовывает вариант DMD вне рамки считывания в BMD-подобную делецию в рамке считывания, что приводит к продукции усеченного белка дистрофина, аналогичного пациентам с BMD. ^{7 , 9}

Вилтоларсен, фосфородиамидатный морфолиноолигомер, был разработан для лечения пациентов с вариантами МДД, поддающимися пропуску экзона 53. ¹⁰ Пропуск экзона 53 возможен примерно у 8-10% пациентов, включая пациентов с делециями в экзонах 45-52, 47-52, 48-52, 49-52, 50-52 и 52. ^{4 , 11} В доклинических исследованиях было показано, что вилтоларсен сильно способствует дозозависимому пропуску экзона 53 во время сплайсинга пре-мРНК и повышению уровня белка дистрофина. ^{10 , 11}

Недавние исследования сообщили об эффективности и безопасности вилтоларсена у амбулаторных и стационарных пациентов с МДД. ¹⁰ Здесь мы сообщаем о результатах 2 фазы 24-недельного рандомизированного клинического исследования, разработанного для оценки эффективности, безопасности и переносимости двух дозировок вилтоларсена у мальчиков с МДД в ​​возрасте от 4 до 9 лет.

Протокол испытания был одобрен комиссией по этике каждого участвующего рекрутингового центра, и его можно найти в Приложении 1.Перед проведением любых процедур, связанных с исследованием, участник предоставил письменное или устное информированное согласие, соответствующее возрасту и статусу развития, а родитель или законный опекун участника предоставил письменное информированное согласие и / или разрешение HIPAA. Исследование было проведено в соответствии с принципами Хельсинкской декларации и Положениями о надлежащей клинической практике. Деятельность контролировалась независимой комиссией по мониторингу данных и безопасности.

участника были набраны из 6 сайтов в Северной Америке (5 в США и 1 в Канаде).Подходящими участниками были мальчики в возрасте от 4 до 9 лет с подтвержденным диагнозом МДД, поддающегося пропуску экзона 53. Участники имели нормальные результаты лабораторных тестов на клиническую безопасность (с учетом обнаружения МДД), были амбулаторными и могли пройти время, необходимое для того, чтобы стоять на спине, время для бега / ходьбы на 10 м и время для подъема по 4 ступеням при обследовании. Участники принимали стабильную дозу глюкокортикоидов в течение 3 месяцев или более до включения в исследование и на протяжении всего исследования. Участники были исключены, если они соответствовали любому из следующих критериев при скрининге: острое заболевание, определенное исследователем места (обычно инфекция верхних дыхательных путей, гастроэнтерит или любое лихорадочное заболевание) за 4 недели до первой дозы, признаки симптоматической кардиомиопатии, тяжелая аллергия. или гиперчувствительность к исследуемому препарату, серьезные поведенческие или когнитивные проблемы, любые медицинские данные, которые могут сделать участие небезопасным или ухудшить оценку результатов исследования или проведения исследования в соответствии с мнением исследователя, прием любого другого исследуемого препарата в настоящее время или в предыдущие 3 месяца , операция в предыдущие 3 месяца или запланированная во время исследования, предыдущее участие в исследовании, которое включало введение вилтоларсена, или положительные результаты теста на антиген гепатита В, антитела к гепатиту С или антитела к ВИЧ.Группа внешних компараторов для оценки функции и силы по времени была предоставлена ​​Совместной международной группой нейромышечных исследований (CINRG) по исследованию естественной истории Дюшенна (DNHS) и соответствовала ключевым критериям включения, включая возраст, функциональный статус, географическое положение и статус лечения глюкокортикоидами. . ^{12 , 13}

Эта фаза 2, многоцентровое, 2-периодное рандомизированное рандомизированное клиническое исследование с подбора дозы низкой дозы (40 мг / кг в неделю) и высокой дозы (80 мг / кг в неделю) было проведено у участников с МДД, поддающихся лечению. экзон 53 пропускался с 8 участниками в каждой дозовой когорте.Когорта низких доз вилтоларсена была полностью включена в группу до включения в группу высоких доз вилтоларсена; участники и исследовательские группы были проинформированы о дозовой когорте. В обеих когортах перед первым введением исследуемого препарата были выполнены скрининг участников, клиническая оценка и исходная биопсия скелетных мышц (рисунок в Приложении 2).

Первый период исследования, который соответствовал первым 4 неделям лечения после включения в исследование, был двойным слепым и плацебо-контролируемым.Участники обеих дозированных когорт были рандомизированы 3: 1 для приема вилтоларсена или плацебо. Рандомизация была основана на перестановках блоков, созданных неослепленным статистиком и поддерживаемых Ксеримисом. В когорте с низкими дозами между первоначальным приемом каждого из первых 4 участников требовалась минимум 1 неделя для контроля безопасности. После того, как четвертый участник получил начальную дозу, остальные участники могли получить лечение. После завершения первых 4 недель для всех участников в когорте с низкими дозами результаты безопасности оценивались руководителем исследования, медицинским наблюдателем, комиссией по мониторингу данных и безопасности и спонсором до начала рандомизации в когорте с высокими дозами.Такая же недельная задержка между первоначальным введением дозы для каждого из первых 4 участников наблюдалась для когорты высоких доз, за ​​исключением того, что второй участник в этой когорте не прошел скрининг, поэтому не было 1-недельной задержки в дозировании между участниками 3 и 4.

Второй период исследования для каждого участника начался на 5-й неделе. В течение этого периода все участники получали вилтоларсен в соответствии с дозой их когорты в течение 20-недельного открытого периода лечения. Лечение проводилось путем часовой внутривенной инфузии один раз в неделю на протяжении всего исследования.Исследуемый препарат был упакован, промаркирован и распространен в исследовательских центрах Xerimis. После завершения 24-недельного периода лечения каждому участнику была проведена биопсия скелетных мышц после лечения, и он был допущен к участию в открытом расширенном исследовании. ¹⁴

Для анализа индукции дистрофина были взяты биопсии из двуглавой мышцы на исходном уровне и другой двуглавой мышцы после 24 недель лечения. Образцы мышц были мгновенно заморожены и доставлены в центральную лабораторию.Все лабораторные исследователи оставались слепыми к идентификации образцов. Индукцию дистрофина оценивали с помощью вестерн-блоттинга, полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (RT-PCR), масс-спектрометрии (MS) и иммунофлуоресценции (IF) окрашивания с использованием недавно описанных методов (eMethods в Приложении 2). ²

Первичные результаты исследования включали безопасность, переносимость и фармакокинетику (сообщать отдельно) низкой дозы (40 мг / кг в неделю) и высокой дозы (80 мг / кг в неделю) у амбулаторных мальчиков с МДД.Безопасность оценивалась у участников, получавших 1 дозу вилтоларсена или более, по возникновению нежелательных явлений (НЯ), серьезных НЯ, лабораторным параметрам, показателям жизненно важных функций и результатам физикального обследования при посещении или контакте с участниками, как определено протоколом исследования. Нежелательные явления, возникшие в результате лечения, были закодированы по классам системного органа и предпочтительному термину согласно Медицинскому словарю по регулирующей деятельности. Степень тяжести оценивалась в соответствии с критериями общей терминологии для оценки нежелательных явлений.Продукция мышечного дистрофина оценивалась как продукция белка с помощью вестерн-блоттинга для первичного результата эффективности исследования и как сплайсинг мРНК дистрофина при RT-PCR, продукция белка дистрофина при MS и локализация дистрофина при окрашивании IF для вторичных результатов эффективности исследования.

Дополнительными вторичными результатами эффективности были оценки общих моторных навыков с помощью временных функциональных тестов, включая время стоять на спине, время бега / ходьбы на 10 м, время подъема на 4 ступеньки, амбулаторное обследование North Star и тест 6-минутной ходьбы, а также количественное мышечное тестирование.Эти исходы сравнивали с подобранной контрольной группой естественной истории из CINRG DNHS. ¹³

Размер выборки учитывался как для категориальных исходов (например, НЯ), так и для непрерывных переменных (например, процентного содержания нормального дистрофина и лабораторных переменных безопасности). Размер выборки был рассчитан так, чтобы быть достаточно большим, чтобы наблюдать 1 или несколько НЯ с базовой частотой 10% или выше с вероятностью более 80%. Для непрерывных переменных вероятность обнаружения любого различия равнялась 80%.1 SD или более и 90% мощности для обнаружения различий в 2,4 SD или более между комбинированными группами плацебо и любыми дозированными группами при контроле двусторонней ошибки типа I 0,05. Сравнение комбинированных групп лечения и комбинированных групп плацебо в исследовании имело мощность 80% для обнаружения различий в 1,75 SD и 90% для обнаружения различий в 2,0 SD.

Оценка безопасности и воздействия включала всех рандомизированных участников, получивших 1 или более доз исследуемого продукта. Оценки эффективности проводились у рандомизированных участников, которые получили 1 или более доз исследуемого продукта, прошли базовую оценку и 1 или несколько оценок эффективности после базового уровня.

Все 16 рандомизированных участников были включены в наборы для анализа безопасности и эффективности. Все статистические тесты были выполнены с уровнем значимости 0,05 без поправки на множественные сравнения или множественные результаты. Статистически значимые изменения в процентах нормального продуцирования дистрофина внутри дозированных групп и с обеими комбинированными дозированными группами, измеренные с помощью вестерн-блоттинга, МС, IF-окрашивания и ОТ-ПЦР, оценивали с использованием двусторонних тестов t . Анализ временных функциональных тестов и мышечной силы в исследуемой популяции проводился с помощью двухсторонних парных тестов t .Сравнение исследуемой популяции и популяции CINRG DNHS проводилось с использованием линейной модели со смешанными эффектами. Статистический анализ проводился с использованием SAS версии 9.4 (Институт SAS).

В период с декабря 2016 г. по август 2017 г. в исследовании приняли участие 16 участников (рис. 1). Из 16 включенных мальчиков с МДД 15 (94%) были белыми, а средний возраст (СО) составлял 7,4 (1,8) года. Восемь участников были рандомизированы в каждую когорту доз (группы низкой дозы [40 мг / кг в неделю] и группы высокой дозы [80 мг / кг в неделю] вилтоларсена) в течение начального 4-недельного периода исследования: 6 участников — вилтоларсен и 2 к плацебо.Однако из-за ошибки рандомизации в когорте высоких доз 5 участников получали вилтоларсен в высоких дозах, а 3 участника получали плацебо. В течение 20-недельного открытого периода лечения все участники получали вилтоларсен в соответствии с дозой их когорты (см. Рисунок в Приложении 2). Все 16 рандомизированных участников завершили лечение. В целом участники в 2 дозовых группах были сбалансированы по исходным характеристикам (таблица 1). У всех участников были делеции, охватывающие несколько экзонов, которые можно было пропустить через экзон 53 (таблица 1 в Приложении 2).

Что касается общих исходных характеристик, 65 участников из группы внешнего сравнения, данные которых были взяты из CINRG DNHS, были сопоставлены с участниками, получавшими вилтоларсен (таблица 1). В группу CINRG DNHS вошли 9 пациентов с МДД, подверженных пропуску экзона 53, и 56 пациентов с МДД с вариантами пропуска делеций без экзона 53 (eTable 1 в Приложении 2).

Исходные биопсии мышц показали неопределяемые или низкие уровни дистрофина с помощью вестерн-блоттинга в обеих группах дозирования, что согласуется с диагнозом МДД (рис. 2А).Когда дистрофин был нормализован до тяжелой цепи миозина, когорты с низкой и высокой дозой вилтоларсена показали средний (SD) процент нормальных уровней дистрофина 0,3% (0,1%) и 0,6% (0,8%), соответственно (Рисунок 2B). (eТаблица 2 в Приложении 2). Все участники показали значительное увеличение содержания дистрофина в биопсиях после 25-й недели после лечения, как было измерено с помощью вестерн-блоттинга. Участники показали средний (SD) процент нормальных уровней дистрофина 5,7% (2,4%) в когорте низких доз и 5.9% (4,5%) в когорте высоких доз. Аналогичные результаты были также получены, когда уровни белка дистрофина были нормализованы до α-актинина (таблица 2 в Приложении 2). Значительная разница между исходной биопсией и биопсией после лечения наблюдалась в обеих группах лечения (когорта с низкими дозами вилтоларсена: изменение от исходного уровня, нормализованное до тяжелой цепи миозина, 5,4%; P <0,001; когорта с высокими дозами вилтоларсена: отклонение от исходного уровня, нормализованное. тяжелой цепи миозина, 5,3%; P = 0,01).

Вторичные результаты включали оценку мРНК мышечного дистрофина и продукции белка по локализации MS и IF.В обеих дозированных группах биопсия мышц перед лечением показала, что 100% транскриптов мРНК выходят за рамки рамки. В биопсиях после лечения у всех участников был выявлен пропуск экзона 53, вызванный вилтоларсеном, что привело к высокой доле транскриптов мРНК в рамке считывания (рис. 2С) (таблица 2 в Приложении 2). При сравнении пропуска экзонов после лечения между группами с низкой и высокой дозой наблюдался значительный эффект дозы. При использовании МС различия от исходного уровня для групп с низкой и высокой дозой и для всей группы были значительными; однако значительных различий между группами не наблюдалось.Дистрофин, индуцированный вилтоларсеном, был замечен при окрашивании IF со значительным увеличением процента дистрофин-положительных миофибрилл в биоптатах после лечения в обеих группах дозирования (Рисунок 2D) (eTable 2 в Приложении 2). Значительный дозовый эффект наблюдался между группами с низкой и высокой дозой.

Сравнение показателей индукции дистрофина продемонстрировало соответствие между 4 критериями оценки (вестерн-блоттинг, ОТ-ПЦР, МС и IF-окрашивание). Участники, у которых наблюдались самые высокие уровни дистрофина при Вестерн-блоттинге, также обычно демонстрировали самые высокие уровни пропуска РНК, дистрофина при РС и процент дистрофин-положительных миофибрилл при окрашивании IF.

Прогресс заболевания измерялся с помощью временных функциональных тестов и оценки мышечной силы. Сравнение участников, получавших вилтоларсен, с 65 пациентами из контрольной группы с естественным анамнезом, сопоставимым по возрасту и лечению, из CINRG DNHS продемонстрировало доказательства клинической пользы лечения вилтоларсеном (рис. 3). Участники, получавшие вилтоларсен, показали улучшение или стабилизацию функции в течение 25-недельного периода, тогда как группа внешнего компаратора CINRG DNHS продемонстрировала снижение всех временных функциональных тестов, за исключением времени для подъема на 4 ступеньки.Скорость бега / ходьбы на 10 м в тесте значительно улучшилась у участников, получавших вилтоларсен, на 13 и 25 неделе по сравнению со снижением в контрольной группе из CINRG DNHS (изменение на 25 неделе по сравнению с исходным уровнем: вилтоларсен, 0,23 м / с; контроль, −0,04 м / с). Тест с 6-минутной ходьбой показал значительное улучшение на 25-й неделе у участников, получавших вилтоларсен, тогда как результаты контроля CINRG DNHS за тот же период снизились (изменение на 25-й неделе по сравнению с исходным уровнем: вилтоларсен, 28,9 м; контроль, -65.3 м). Наблюдались значительные улучшения во времени вставания из положения лежа на спине (изменение через 25 недель по сравнению с исходным уровнем: вилтоларсен, -0,19 с; контроль, 0,66 с). Время, необходимое для того, чтобы встать после теста лежа на спине, и время, необходимое для подъема по 4 ступеням, а также тест North Star Ambulatory Assessment также показали улучшение или стабилизацию, но различия между лечением вилтоларсеном и контролем внешнего компаратора не были значительными. Измерения силы мышц с помощью изометрического тестирования не показали различий между участниками, получавшими вилтоларсен, и контрольной группой внешнего компаратора CINRG DNHS.

В целом, 15 из 16 участников (94%) испытали НЯ, вызванные лечением (таблица 2). Серьезных НЯ, возникших в связи с лечением, не было (таблица 2). Возникшие в связи с лечением НЯ не потребовали снижения дозы, прерывания или прекращения приема исследуемого препарата, и о случаях смерти не сообщалось. Большинство участников с НЯ, возникшими в результате лечения, выздоровели к концу исследования. У 2 участников с неразрешенными НЯ оба явления были умеренными. У трех участников были реакции в месте инъекции; все были легкими и разрешились в день начала.По оценке исследователей, НЯ, возникшие в результате лечения, не были связаны с исследуемым препаратом. В течение первого периода исследования не было зарегистрировано ни одного возникшего в результате лечения НЯ более чем у 1 участника. Наиболее частыми НЯ, возникшими в результате лечения во втором периоде исследования, были кашель (по 2 участника в каждой группе доз) и назофарингит (4 участника в группе с высокими дозами). Во втором периоде исследования диарея и рвота наблюдались у 2 участников.

Никаких изменений по сравнению с исходным уровнем в клинических лабораторных показателях крови и мочи не было клинически значимым.Значения креатинкиназы в сыворотке были повышены и сильно варьировали, как и ожидалось при МДД.

Здесь мы сообщаем, что системное лечение пациентов с МДД, подверженных пропуску экзона 53 с помощью вилтоларсена, вызывало значительную продукцию дистрофина de novo и продемонстрировало клиническое улучшение временных функциональных тестов по сравнению с подобранной исторической контрольной группой. Производство дистрофина de novo признано Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США в качестве суррогатного результата для утверждения лекарства от МДД. ¹⁵ Участники исследования, получавшие вилтоларсен, демонстрировали значительно повышенную экспрессию дистрофина на 25-й неделе, по данным вестерн-блоттинга, со средним (SD) уровнем дистрофина 5,7% (2,4%) в группе с низкой дозой и 5,9% (4,5%) в группе. группа высоких доз. Хотя прямые сравнения между исследованиями провести невозможно, уровни дистрофина, вызванные вилтоларсеном, являются самыми высокими на сегодняшний день в клинических испытаниях методов лечения с пропуском экзонов. ^{16 , 17} Кроме того, значительное увеличение уровней дистрофина, индуцированного вилтоларсеном, также наблюдалось при измерении количественным определением MS и локализацией IF.

Было показано, что у пациентов с МДД и МПК уровни дистрофина частично коррелируют с клинической тяжестью. ^{5 , 18 , 19} Более мягкий клинический фенотип МПК может быть связан с уровнем дистрофина всего 3%. ^{5 , 18} В недавних исследованиях биопсии мышц у пациентов с МПК, пациентов с МДД и здоровых людей в контрольной группе умеренно более высокие уровни дистрофина (от 2% до 7% от нормы) были связаны с лучшим функциональным результатом с более старым возрастом потери. передвижения по сравнению с другими пациентами с МДД. ^{19 -22} Эти данные предполагают, что уровни дистрофина всего лишь 2% от нормы связаны с лучшими функциональными результатами. В текущем исследовании 15 из 16 участников (94%), получавших вилтоларсен, достигли уровня дистрофина более 2% от нормы, а 14 из 16 (88%) достигли уровня более 3% от нормы.

Раннее лечение МДД важно для улучшения клинических результатов. ^{23 , 24} Хотя считается, что восстановление некоторого количества дистрофина с помощью терапии с пропуском экзонов замедляет прогрессирование заболевания, оно не может восстановить уже утраченные мышцы. ^{4 , 25} Пациенты с МДД способны восстанавливать мышечную ткань в раннем возрасте; однако по мере прогрессирования заболевания мышечные волокна замещаются жировой и волокнистой соединительной тканью. ²⁶ Пациенты с МДД испытывают ухудшение физического состояния, потерю мышечной массы и снижение показателей функциональных тестов по времени примерно в 7-летнем возрасте. ^{27 , 28} Следовательно, важно начинать лечение с терапии, которая восстанавливает дистрофин как можно раньше в ходе разрушения мышечной ткани, которое продолжается уже при рождении. ²³ Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов поддерживает раннее лечение пациентов с МДД для улучшения здоровья мышц. Фактически, клинические данные показывают, что отсроченное лечение может быть связано со снижением баллов при временных функциональных тестах. ²⁹ Насколько нам известно, это первый отчет об эффективности и безопасности терапии с пропуском экзонов у пациентов с МДД моложе 5 лет. ^{29 -32} У пациентов в возрасте 4 лет после лечения вилтоларсеном отмечалось улучшение уровня дистрофина и синхронизированных моторных тестов.

Основным ограничением исследования является небольшой размер выборки. Однако, учитывая редкость МДД и небольшую популяцию пациентов с МДД, подверженных пропуску экзона 53, исследование, описанное здесь, предоставляет подтверждающие данные по вилтоларсену, несмотря на размер выборки. Кроме того, дизайн исследования и размер выборки сопоставимы с другими клиническими исследованиями, проведенными на этой популяции пациентов. ¹⁷ Дополнительное ограничение присуще оценкам мышечной функции, которые сравнивались с группой внешнего контроля.Улучшение мышечной функции в ходе исследования показало некоторую вариабельность, при этом одни результаты демонстрировали улучшение, а другие — стабилизацию. На это мог повлиять уровень чувствительности к изменению функциональных оценок во время прогрессирования заболевания в этой возрастной группе. Кроме того, использование внешней контрольной группы, хотя и подходит для исследования фазы 2 при редком заболевании с суррогатным первичным результатом, является менее строгим, чем рандомизированный плацебо-контролируемый дизайн.

Результаты подтверждают безопасность, переносимость и эффективность вилтоларсена для лечения пациентов с вариантами МДД, подверженными пропуску экзона 53, что потенциально обеспечивает новый терапевтический вариант для дополнительной популяции пациентов с МДД.

Принято к публикации: 6 марта 2020 г.

Опубликовано в Интернете: 26 мая 2020 г. doi: 10.1001 / jamaneurol.2020.1264

Исправление: Эта статья была исправлена ​​15 июня 2020 г., чтобы исправить значения на рисунке 3C.

Открытый доступ: Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии CC-BY-NC-ND. © 2020 Clemens PR et al. JAMA Неврология .

Автор для переписки: Паула Р. Клеменс, доктор медицины, кафедра неврологии, Медицинская школа Университета Питтсбурга, 3550 Террас-стрит, Питтсбург, Пенсильвания 15261 ([email protected]).

Вклад авторов: Доктор Клеменс имел полный доступ ко всем данным в исследовании и берет на себя ответственность за целостность данных и точность анализа данных.

Концепция и дизайн исследования : Клеменс, Рао, Макдональд, Моргенрот, Осаки, Сато, Ямасита, Хоффман.

Сбор, анализ или интерпретация данных : Все авторы.

Составление рукописи : Клеменс, Рао, Моргенрот, Хоффман.

Критический пересмотр рукописи на предмет важного интеллектуального содержания : Все авторы.

Статистический анализ : Клеменс, Хоффман.

Административная, техническая или материальная поддержка : Connolly, Mah, McDonald, Zaidman, Morgenroth, Hoffman.

Руководство исследованием : Клеменс, Рао, Коннолли, Харпер, Смит, Макдональд, Моргенрот, Хоффман.

Раскрытие информации о конфликте интересов: Доктор Клеменс получил гранты от NS Pharma во время проведения исследования, а также гранты от Spark Therapeutics, Amicus Therapeutics, Sanofi Genzyme, ReveraGen BioPharma и TRiNDS, а также личные гонорары от Spark Therapeutics, UCB. , Pfizer и Roche вне представленных работ.Доктор Рао получил нефинансовую поддержку от детской больницы Энн и Роберта Х. Лурье в Чикаго во время проведения исследования, а также личные гонорары от PTC Therapeutics и Sarepta Therapeutics за пределами представленной работы. Во время проведения исследования доктор Коннелли получил гранты от Медицинской школы Вашингтонского университета и TRiNDS, а также гранты от Sarepta Therapeutics и AveXis и личные гонорары от Sarepta Therapeutics, AveXis, Genentech-Roche, Acceleron Pharma и Catabasis Pharmaceuticals за пределами США. представленная работа.Д-р Харпер получил гранты от NS Pharma, Italfarmaco, ReveraGen BioPharma, Catabasis Pharmaceuticals, AveXis, CSL Behring, Teva Pharmaceutical Industries, Национальных институтов здравоохранения и Центров США по контролю и профилактике заболеваний. Доктор Ма получил гранты от NS Pharma во время проведения исследования, а также гранты от PTC Therapeutics, Pfizer, Roche, Sarepta Therapeutics, Italfarmaco, Novartis, Biogen, ReveraGen BioPharma, Catabasis Pharmaceuticals, Sanofi-Genzyme и Bristol-Myers Squibb. вне представленной работы.Д-р Смит получил зарплату от NS Pharma во время проведения исследования, а также личные гонорары от Pfizer и Sarepta Therapeutics, а также зарплату от Pfizer и ReveraGen BioPharma помимо представленных работ. Доктор Макдональд получил гранты от NS Pharma во время проведения исследования, а также личные гонорары от Bristol-Myers Squibb, Astellas / Mitobridge, Cardero Therapeutics, Capricor Therapeutics, Catabasis Pharmaceuticals, Eli Lilly and Company, Epirium Bio, FibroGen, Halo Therapeutics. , Italfarmaco, BioMarin Pharmaceutical, Novartis, Pfizer, Prosensa, PTC Therapeutics, Santhera Pharmaceuticals и Sarepta Therapeutics за пределами представленных работ.Доктор Зайдман получил нефинансовую поддержку от Biogen помимо представленных работ. Госпожа Моргенрот получала зарплату от TRiNDS во время проведения исследования. Г-н Осаки и д-р Ямасита работают в NS Pharma. Г-н Сато работает в NS Pharma и имеет патент PCT / JP2011 / 070318, выданный и лицензированный Nippon Shinyaku и Национальным центром неврологии и психиатрии, а также патент PCT / JP2019 / 026393 на рассмотрении. Доктор Хоффман получил гранты от AGADA Biosciences и TRiNDS во время проведения исследования и гранты от ReveraGen BioPharma за пределами представленной работы.

Финансирование / поддержка: Совместная международная группа нейромышечных исследований (CINRG) «Исследование естественной истории Дюшенна» (DNHS) была поддержана грантами h233B031118 и h233B0

Министерства образования США и Национального института исследований инвалидности, самостоятельного образа жизни и реабилитации; грант W81XWH-12-1-0417 от Министерства обороны США; грант R01AR061875 от Национального института артрита, опорно-двигательного аппарата и кожных заболеваний; и гранты от родительского проекта «Мышечная дистрофия».Это исследование финансировалось NS Pharma.

Роль спонсора / спонсора: NS Pharma внесла вклад в разработку и проведение исследования; сбор, управление, анализ и интерпретация данных; подготовка, рецензирование или утверждение рукописи; и решение представить рукопись для публикации.

Информация о группе: Кооперативная международная группа нейромышечных исследований (CINRG) по изучению естественной истории Дюшенна (DNHS) Среди исследователей: Калифорнийский университет, Дэвис, Сакраменто: Крейг М.Макдональд, доктор медицины; Эрик К. Хенриксон, доктор философии; Р. Тед Абреш, MS; и Нанетт К. Джойс, DO; Медицинский фонд Сундарам и детская больница Аполло, Ченнаи, Индия: Венкатарман Вишванатан, доктор медицины; и Шивапракасам Чидамбаранатхан, доктор медицины; Holland Bloorview Kids Rehab Hospital, Торонто, Онтарио, Канада: Дуглас Биггар, доктор медицины; и Лора С. Макадам, доктор медицины; Детская больница Альберты, Калгари, Альберта, Канада: Jean K. Mah, MD ; Детская больница Королевы Сильвии, Гетеборг, Швеция: Мар Тулиниус, доктор медицины; Детский национальный медицинский центр, Вашингтон, округ Колумбия: Авиталь Кнаан, доктор философии; Лорен П.Morgenroth, MS; Роберт Лешнер, доктор медицины; Каролина Тези-Роча, доктор медицины; Матхула Тангарадж, доктор медицины; и Тина Дуонг, MS ; Королевская детская больница, Мельбурн, Австралия: Эндрю Корнберг, доктор медицины; и Моник Райан, доктор медицины; Госпиталь Еврейского университета Хадасса, Иерусалим, Израиль: Йорам Нево, MD ; Instituto de Neurociencias Fundacion Favaloro, Буэнос-Айрес, Аргентина: Альберто Дубровски, доктор медицины; Питтсбургский университет и Департамент по делам ветеранов, Питтсбург, Пенсильвания : Паула Р.Клеменс, доктор медицины; и Хода Абдель-Хамид, доктор медицины; Вашингтонский университет в Сент-Луисе, Сент-Луис, Миссури: Энн М. Коннолли, доктор медицины; и Алан Пестронк, доктор медицины; Детская больница Вирджинии, Ричмонд: Жан Тизли, доктор медицины; Университет Теннесси, Мемфис: Тулио Э. Берторини, доктор медицины; Детская больница в Вестмиде, Сидней, Австралия: Ричард Вебстер, доктор медицины; Университет Альберты, Эдмонтон, Альберта, Канада: Ханна Кольски, доктор медицины; Клиника Мэйо, Рочестер, Миннесота: Нэнси Кунц, доктор медицины; Шерилин В.Дрисколл, Мэриленд; и Джон Б. Боденштайнер, доктор медицины; Университет Пуэрто-Рико, Сан-Хуан, Пуэрто-Рико: Хосе Карло, доктор медицины; Университет Павии и больница Нигуарда Ка Гранда, Милан, Италия: Ксения Горни, доктор медицины, доктор философии ; Детская больница Техаса, Хьюстон: Тимоти Лотце, доктор медицины; и Миннесотский университет, Миннеаполис: Джон У. Дэй, доктор медицины, доктор философии; и Питер Карачунски, доктор медицины.

Заявление об ограничении ответственности: Авторы несут полную ответственность за содержание этой статьи, которая не отражает точку зрения Министерства по делам ветеранов или правительства США.

Заявление об обмене данными: См. Приложение 3.

Дополнительные материалы: Мы благодарим участников исследования и их семьи за их участие в испытании. Мы благодарим Марка Яроса, доктора философии (Summit Analytical, Денвер, Колорадо), Фила Шейла, доктора философии (Summit Analytical), и Хизер Гордиш-Дрессман, доктора философии (Детская национальная больница, Вашингтон, округ Колумбия), в анализе исследования. Доктора Ярош, Шейл и Гордиш-Дрессман получили компенсацию от NS Pharma.

P3492 Карведилол и его аналог ВК-II-86 ослабляют вызванные растяжением проявления механоэлектрической обратной связи | European Heart Journal

Предпосылки

Механическое растяжение изменяет обработку Ca2 + и электрофизиологию миокарда, способствуя аритмогенезу.Вызванное перегрузкой магазина высвобождение Ca2 + (SOICR) через рецептор рианодина (RyR2), по-видимому, связано с этим пагубным эффектом. Карведилол и его аналог VK-II-86 (который не обладает значительными бета-блокирующими эффектами) подавляют SOCIR, напрямую сокращая открытую продолжительность сердечного RyR2, и могут модулировать связанные с кальцием изменения, вызванные растяжением миокарда.

Цель

Целью этого исследования было изучить с помощью спектрального анализа фибрилляции желудочков (ФЖ), предотвращают ли карведилол и ВК-II-86 аритмогенные эффекты, вызванные растяжением.

Методы

Модификации VF, вызванные острым растяжением, были изучены в перфузированных по Лангендорфу сердцах кроликов с использованием нескольких эпикардиальных электродов в контрольных условиях (n = 10), во время инфузии карведилола (0,1 и 1 мкМ) (n = 10) и во время VK. -II-86 настой (0,1 и 1 мкМ) (n = 10). Спектральные методы использовались для определения базовой линии и характеристик растяжения в трех упомянутых выше сериях: определялись доминирующая частота VF (DF) и спектральная концентрация VF (SpC).Использовался двухфакторный тест ANOVA, и значимость была достигнута при p <0,05.

Результаты

Растяжение миокарда значительно увеличивало DF по сравнению со значениями до растяжения в контрольных условиях (13,3 ± 1,2 против 16,1 ± 3,0 Гц, p <0,05) и во время перфузии 0,1 мкм карведилола (11,6 ± 1,5 против 13,6 ± 2,9 Гц, p <0,05) и 0,1 мкМ VK-II-86 (13,2 ± 2,2 против 16,2 ± 4,1 Гц, p <0,05). Однако максимальная концентрация обоих препаратов (1 мкМ) устраняла это вызванное растяжением ускорение ФЖ (карведилол: 6.9 ± 2,2 против 7,3 ± 2,6 Гц, нс; ВК-II-86: 7,0 ± 1,4 против 7,1 ± 0,6 Гц, нс). Значительное уменьшение SpC, вызванное растяжением, в контрольных условиях (31,4 ± 8,6 против 23,2 ± 6,4%, p <0,01) ослаблялось 0,1 мкМ карведилолом (0,1 мкМ: 27,6 ± 8,4 против 23,5 ± 6,1%, нс) и 0,1 мкМ. мкМ ВК-II-86 (24,7 ± 5,4 против 21,2 ± 3,9%, нс), но не менее 1 мкМ обоих препаратов (карведилол: 41,3 ± 11,3 против 30,3 ± 5,7%, р <0,05; ВК-II-86: 34,7 ± 7,2 против 28,3 ± 3,9%, p <0,01). Тем не менее, во время растяжения регулярность и организация аритмии были выше (более высокие SpC) при самой высокой концентрации карведилола (p <0.01) и ВК-II-86 (р <0,05), чем в контрольных условиях (контроль: 23,2 ± 6,4%, карведилол 1 мкМ: 30,3 ± 5,7%, ВК-II-86 1 мкМ: 28,3 ± 3,9%).

Заключение

Карведилол и его аналог VK-II-86 устраняли изменения в частоте активации VF, вызванные растяжением миокарда при наивысшей изученной концентрации, а также ослабляли вызванную растяжением неоднородность активации при самой низкой концентрации.